猪心传导系标本的制作

2010-08-15林小博

中国当代医药 2010年25期

关键词：猪心心内膜窦房结

张冬，林小博

(漯河医学高等专科学校解剖学教研室，河南漯河 462002)

猪心传导系标本的制作

张冬，林小博

(漯河医学高等专科学校解剖学教研室，河南漯河 462002)

目的：综合利用心传导系显示技术，制作满足解剖学教学要求的心传导系标本。方法：用新鲜猪心，经常规解剖显示其大体结构。综合利用一系列心传导系显示技术处理标本。结果：该技术制作的标本，心传导系各结构显示清晰全面，便于教学。结论：该方法制作的心传导系标本能够满足教学及科研使用。

猪心；心传导系；制作技术

人体解剖学是研究人体正常形态结构的科学，是其他医学学科的先导课，是一门实践性较强的学科。解剖学的实验教学历来受到重视，由于心传导系统的各个结构不能在经固定液固定的标本上制作显现，需要新鲜的心才能染色显示，所以常用动物心脏制作心传导系标本。猪心在解剖结构上和人比较相似且又容易获得，常作为实验材料应用到解剖学实验教学中。大体显示心传导系形态的方法可归纳为两大类：一类是大体解剖法，即用解剖器械解剖，直接显示心传导系；另一类是染色法，即用化学药品染色达到显示心传导系的目的。大体解剖法主要适用于显示心脏传导系中的窦房结、房室结、房室束等大结构。染色法主要适用于显示心脏传导系中的左右束支以及浦肯野纤维网等小结构。两类方法各有利弊[1]，单靠一种方法制作的猪心传导系标本不方便观察，作者尝试综合运用多种制作方法，效果满意，现报道如下：

1 材料与方法

1.1 材料

新鲜猪心、解剖显微镜、解剖器械、1 ml注射器及 4号针头、502胶水、细毛笔和脱脂棉球、印度墨汁过滤水溶液、3%～5%的复方碘溶液。

1.2 方法和步骤

由于染色对标本的新鲜度要求较高，所以先染色显示左右束支以及蒲肯野纤维。

1.2.1 左右束支以及蒲肯野纤维显示由于猪心较小，墨汁不易注入包绕房室束和左右束支的结缔组织鞘内，为精确定位结缔组织鞘内的位置，提高注入的准确率，先用复方碘溶液涂染，临时显示左右束支以及蒲肯野纤维；待显示后再采用墨汁注入法定型染色以显示左右束支以及蒲肯野纤维分布。具体操作方法：①复方碘溶液涂抹染色[2]，由于蒲肯野纤维内含有大量糖元，糖元与碘结合即呈蓝色反应，在新鲜标本心内膜下涂以复方碘溶液，即可把左右束支及蒲肯野纤维染成蓝黑色条纹。操作过程是先经肺动脉口剪开，沿右冠状沟稍下方剪向锐缘（相当于人的心下缘），到后室间沟处再转向下，直达近心尖处，将右心室游离壁向下翻，暴露右束支主干和主要分支的走行部位。再打开左心室从心左缘纵行剪开，并向上以此剪开二尖瓣和主动脉瓣，使左室前后乳头肌分居前后，暴露左室间隔面及游离壁。为方便观察，腱索和瓣膜一并剪除。暴露完毕后，用棉球或毛笔将复方碘液涂于心内膜表面，内膜下蒲肯野纤维很快呈棕黑色。②墨汁注射染色[3]，在剖开的心室壁游离缘处，根据复方碘液染色显示注射墨汁染色。右手持注射器，稍用力使注射器针尖平行按压在有左右束支及其分支的心内膜上，使心内膜微陷同时保持针尖斜面向上。之后向前进针，使针尖的斜面完全进入心内膜下后，再进针1～2 mm。平稳转动注射器180°，使针尖斜面转向心肌；接着先试着轻推活塞，若进针正确，轻轻推压即可使墨水进入；若阻力较大，且无墨水注入，则说明针尖未进入到结缔组织鞘内，需调整或重新进针。注射时要缓缓注射，同时用刀柄轻轻推送或用手轻轻抚摸注射部位，以防压力过大，导致鞘膜破裂。依照上述方法由传导系远端向近端逆向灌注墨汁染色，依次把左、右束支及其分支和浦肯野纤维网全部染色。

1.2.2 窦房结、房室结及房室束的显示窦房结与周围组织界线不明显，用肉眼解剖法难以确定，因而需要借助窦房结动脉寻认窦房结。房室结较大，寻找较窦房结容易。具体方法[4]：①在右冠状动脉注射染料后，沿右冠状动脉窦房结支，寻认窦房结；窦房结色黄而较周围组织致密，一般在前腔静脉（相当于人的上腔静脉）与右心耳交界处前面的最高点上界沟的内侧，靠近前腔静脉处的心外膜下，围绕窦房结动脉周围的一段心肌处。②纵行切开右心房和后腔静脉（相当于人的下腔静脉），在冠状窦的前方钝性分离心内膜，在房室交界区可见一色稍白而致密的团块状结构，即是房室结。③借助碘染色追迹，仔细用小镊子剥除心内膜或薄层心肌。显示左、右束支的起始部和房室束。④染色，由于标本要在标本盒中保存，加之窦房结、房室结及房室束都比较小，标本需要染色才能方便学生观察。由于窦房结和房室结不宜着色，可以用注射器注入少许墨汁，然后用502胶封住。

1.2.3 固定封存缝合两心室壁游离缘，使心室内膜平展，标签编号，放入 10%甲醛溶液中固定 1周。固定后放入5%过氧化氢溶液漂白1周，然后将制好的心脏标本放入装有5%甲醛溶液的标本盒中保存。

2 结果

经过上述方法制作的标本显示心传导系统比较清晰，特别是能在盒装标本中清楚地显示窦房结、房室结和房室束，方便学生观察，利于提高教学效果。但是由于保存在液体中，学生观察时会因为折光等因素，很难想象在活体上的空间相对结构，不利于后续课程中心电知识的学习，如果能通过进一步的塑化技术处理，做成塑化标本，将更有助于提高教学效果。

3 讨论

3.1 对材料的要求

①猪心要新鲜，取出动物跳动的心脏后，需在 1～2 h内染色，效果较好，时间久则效果渐差，过 6～10 h后常不能染示。另外，存放时间过长的猪心，其心室内膜韧性变小，不易灌注。②重量和体积宜大，一般而言，重量和体积越大的猪心，其心内膜下结缔组织鞘越粗，越易操作。③碳素墨水的选材原则为颗粒越小越好，用滤纸过滤墨水后更佳。④环境温度以10～20℃为宜，该温度下，方便操作，多人配合可做到1 d内完成标本制作，无需冻存过夜，利于标本保鲜。