p53、Ki67肿瘤标志物在不同分型腺性膀胱炎中的表达及临床意义

方海伟，程跃，蒋军辉，沈志久，王国耀，李和明

p53、Ki67肿瘤标志物在不同分型腺性膀胱炎中的表达及临床意义

方海伟，程跃，蒋军辉，沈志久，王国耀，李和明

目的：探讨p53、Ki67在不同分型腺性膀胱炎中的表达及临床意义。方法：将40例患者按膀胱镜检及组织病理学类型进行分组，采用免疫组织化学SABC法，检查p53、Ki67在各分型腺性膀胱炎中的表达，并与10例正常膀胱黏膜组进行比较。结果：乳头状瘤型、肠腺瘤型腺性膀胱炎有较高的p53、Ki67表达率，并与正常膀胱黏膜比较有显著性差异。慢性炎症型、滤泡水肿型则p53、Ki67表达率较低，与正常膀胱黏膜无差异。肠上皮型、前列腺型腺性膀胱炎p53表达率较高，并且与正常膀胱黏膜组比较有显著性差异。肠上皮型、前列腺型腺性膀胱炎Ki67表达率较高，与膀胱正常黏膜组比较，前列腺型组有显著性差异，肠上皮型无显著性差异。结论：对于乳头状瘤型、肠腺瘤型、肠上皮型及前列腺型腺性膀胱炎应进行积极的手术治疗及抗癌药物膀胱灌注，并严密术后随访。对于慢性炎症型、滤泡水肿型及无化生型腺性膀胱炎，在去除慢性刺激因素下进行临床观察即可。

肿瘤标志物；腺性膀胱炎；免疫组化

腺性膀胱炎是膀胱黏膜上皮增生性病变，随着腔内技术的发展和对疾病认识的提高，其发病率有逐年上升的趋势，但其发病机制至今仍未完全明了。自1958年Shaw提出腺性膀胱炎可能发展为腺癌以来，许多学者倾向于认为腺性膀胱炎为膀胱癌的癌前病变，主张采用积极的治疗手段。但近年来有关腺性膀胱炎的报告明显增多，与膀胱腺癌的低发病率不相一致。在对腺性膀胱炎病因和生物学行为不甚明了的情况下，过多的外科治疗和抗癌药膀胱灌注成为目前腺性膀胱癌治疗的普遍现象。2007年1月—2008年7月，我们通过对不同分型腺性膀胱炎与肿瘤标志物（p53、Ki67）相关性研究，期望达到简单的临床分型预测各种腺性膀胱炎的预后，为临床上腺性膀胱炎的治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 标本来源 手术切除标本蜡块40例，根据膀胱镜检查及组织病理学类型分别进行分组。膀胱镜所见分组：慢性炎症型10例，滤泡水肿型8例，乳头状瘤型15例，肠腺瘤样型7例。组织病理学分组：无化生型24例，肠化生型9例，前列腺型7例。同时取正常膀胱黏膜组织10例。全部标本行免疫组织化学检查。

1.2 主要试剂 免疫组织化学SABC试剂盒及p53、Ki67等单克隆抗体均购自武汉博士德生物公司。

1.3 方法 采用免疫组织化学SABC法：切片常规脱蜡，逐级水化，用0.3%H2O2阻断内源性过氧化物酶30 min，置于微波炉45℃中温化20 min，小牛血清封闭30 min。按1∶30比例加入抗p53抗体，置于4℃水箱中过夜，再加入二抗（羊抗鼠IgG）及SABC复合物，置室温中复温60 min。上述各步骤间均以PBS缓冲液振洗15 min，DAB显色，逐级脱水、透明、封片。以试剂盒提供的阳性石蜡切片作为阳性对照，用PBS缓冲液替代一抗，作为阴性对照。Ki67与p53免疫组织化学方法基本相同。

1.4 数据统计学分析 采用SPSS 11.5软件包进行统计学处理，应用四格表Fisher确切概率法比较p53、Ki67在不同分型腺性膀胱炎与正常膀胱黏膜间差异。P＜0.05认为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 p53 40例膀胱镜下分组p53阳性表达率详见表1。乳头瘤型组、肠腺瘤型组与正常黏膜组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；慢性炎症型组、滤泡水肿型组与正常黏膜组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；肠上皮型组、前列腺型组与正常黏膜组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；无化生型组与正常黏膜组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。肠腺瘤型腺性膀胱炎p53染色见图1。

表1 p53在各分型腺性膀胱炎中的表达（n，%）

图1 肠腺瘤型腺性膀胱炎p53染色

2.2 Ki67 40例膀胱镜下分组p53阳性表达率详见表2。乳头瘤型组、肠腺瘤型组与正常黏膜组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；慢性炎症型组、滤泡水肿型组与正常黏膜组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；前列腺型组与正常黏膜组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；无化生型组、肠上皮型组与正常黏膜组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。肠腺瘤型腺性膀胱炎Ki67染色见图2。

表2 Ki67在各分型腺性膀胱炎中的表达（n，%）

图2 肠腺瘤型腺性膀胱炎ki67染色

3 讨论

腺性膀胱炎是一种原因不明的膀胱黏膜慢性增生性病变，1887年Vol Limberk首先报告，多数学者倾向于认为是膀胱慢性感染、梗阻、结石、异物及留置导尿管等慢性刺激引起[1-2]。临床上主要表现为尿频、尿急、尿痛膀胱刺激症状及血尿和排尿困难等。其发病机制目前较为被接受的是移行上皮化生学说：正常的膀胱黏膜在慢性刺激下基底层细胞呈灶性增生形成细胞巢，并向固有层生长，进而巢中心部退化而形成囊腔，最后腔内柱状上皮形成，即腺性膀胱炎。腺性膀胱炎的发生和发展是一个渐变的过程：移行上皮单纯增生－Brunn芽－Brunn巢－囊性膀胱炎－腺性膀胱炎。

对于腺性膀胱炎的生物学行为，目前存在两种观点[3]，部分学者认为腺性膀胱炎为尿路上皮正常变异现象，是尿路上皮形态学多变性的表现，无大的临床意义，更多学者认为其为癌前病变[4-5]，主张采用积极的治疗手段并严密随访。目前国内外文献尚无确切的证据表明腺性膀胱炎与癌前病变有直接的联系，且临床上腺性膀胱炎转变为膀胱腺癌的报告较少。过多的外科手术治疗和抗癌药膀胱灌注有“过度治疗”之嫌。本研究通过将腺性膀胱炎进行临床和病理分组，研究p53、Ki67肿瘤标志物在各分型中的表达，并与正常膀胱黏膜作比较，以期对腺性膀胱炎简单分型来指导临床治疗。

p53、Ki67是目前被公认的膀胱癌的肿瘤标志物，并与膀胱癌的发展、复发、转移，肿瘤的分级、分期有关[6-7]。本研究中40腺性膀胱炎中以慢性炎症型、滤泡水肿型及无化生型为主，这与目前文献报告及临床观察较为符合。研究中发现膀胱镜下乳头状瘤型、肠腺瘤型腺性膀胱炎有较高的p53、Ki67表达率，并与正常膀胱黏膜比较有显著性差异。而慢性炎症型、滤泡水肿型则p53、Ki67表达率较低，与正常膀胱黏膜无差异。肠上皮型、前列腺型腺性膀胱炎p53表达率较高，并且与正常膀胱黏膜组比较有显著性差异。有文献报道广泛的肠上皮化生现象是腺性膀胱炎不确定的恶变因素[8]，这一结论也与本研究结果相符。肠上皮型、前列腺型腺性膀胱炎Ki67表达率较高，与膀胱正常黏膜组比较，前列腺型组有显著性差异，肠上皮型无显著性差异，这可能与标本例数较少有关。这一结果似乎可解释临床上腺性膀胱炎转变为膀胱腺癌的低发病率现象。

因此，对临床上腺性膀胱炎患者，我们主张进行临床及病理分型，对于乳头状瘤型、肠腺瘤型、肠上皮型及前列腺型腺性膀胱炎进行积极的手术治疗及抗癌药物膀胱灌注，并严密术后随访。对于慢性炎症型、滤泡水肿型及无化生型腺性膀胱炎，在去除慢性刺激因素下进行临床观察即可。当然这一结果有待进一步的循证医学证实。

[1]曾伟，陈志强，叶章群.下尿路感染与腺性膀胱炎关系的临床研究[J].临床泌尿外科杂志，2004，16（6）：350

[2]Semins MJ,Schoenberg MP.A case of florid cystitis glandularis[J]. Nat Clin Pract Urol,2007,4:341.

[3]佟威利，宫大鑫，刘屹立，等.腺性膀胱炎治疗方法的探讨[J].中华外科杂志，2003，41(5):365.

[4]Kastan MB,Zambetti GP.Parc-ing p53 in the cytoplasm[J].Cell, 2003,112(1):29.

[5]闵立贵，牛宏伟.腺性膀胱炎（附172例报告）[J].中华泌尿外科杂志，2003，170(50):308.

[6]Fechner G,Perabo G,Schmidt DH,et al.Preclinical evaluation of a radiosensitizing effect of gemcitabine in p53 mutant and p53 wild type bladder cancer cells[J].Urology,2003,61(2):468.

[7]Malmstrom PU,Ren ZP,Sheriff A,et al.Early metastatic progres⁃sion of bladder carcinoma:molecular profile of primary tumor and sentinel lymph node[J].J Urol,2002,168(5):2240.

[8]Rau AR,Kini H,Pai RR.Morphological evaluation of cystitis glan⁃dularis[J].Indian J Pathol Microbiol.2009,52(2):203.

（收稿：2009-08-06 修回：2009-10-26）

（责任编辑 张亚强）

Expression and Clinical Significance of p53,Ki67 in Different Types of Cystitis Glandularis

Fang Haiwei,Cheng Yue,Jiang Junhui,et al. Department of Urology,Affiliated Hospital of Ninbo University,Ningbo（315010）,China

Objective To evaluate the expression of p53 and Ki67in different type of cystitis glandularis and its clinical significance. Methods Immunohistochemical method was used to demonstrate the expression of p53 and Ki67 in 40 cases of cyctitis glandularis and 10 cases of normal bladder tissue. Results The expression of p53 and Ki67 in papilloma subtype and adenoma subtype were higher in the normal bladder tissue (P＜0.05).The expression of p53 in intestinal subtype and prostatic subtype were higher than that in the normal bladder(P＜0.05).The expression of Ki67 in prostatic subtype were higher than that in the normal bladder tissue (P＜0.05). Conclusion Active surgical treatment sand anti-cancer drugs with close follow-up are indicated for papilloma subtype,adenoma subtype,intestinal subtype and prostatic subtype of cystitis glandularis.

p53,Ki67,cystitis glandularis

R694+.3

A

1007-6948(2010)02-0183-03

浙江省医学会临床科研基金（2007zyc40)

宁波大学附属宁波第一医院泌尿中心(宁波315010)

方海伟，Tel：13566037907，E－mail：fhwei8054@sohu. com