诃子粗提物影响家兔离体小肠运动的试验

王 军,张秀凤,宋予震,霍 军

(郑州牧业工程高等专科学校,河南 郑州 450011)

诃子为常用中药之一,为使君子科植物,诃子的干燥果实又名诃黎勒或随风子。其主要成分为鞣酸[1]。本品长圆形或卵圆形,长 2～4 cm,直径2～2.5 cm。表面黄棕色或暗棕色,略具光泽,有5～6条纵棱线及不规则的皱纹,基部有圆形果梗痕。质坚实。果肉厚0.2～0.4 cm,黄棕色或黄褐色。果核 1.5～2.5 cm,直径 1～1.5 cm,浅黄色,粗糙,坚硬。无臭,味酸涩后甜。现代药理试验证明,诃子具有良好的敛郁涩肠而止泻、降火利咽、调和药性、解毒、抑菌、杀灭或抑制恶性肿瘤细胞等作用,临床应用广泛,尤其在民族医学藏药和蒙药中最为常用。在藏药学经典著作《晶珠本草》中,诃子被称“藏药之王”。诃子在蒙药中也是使用频率最高的药物[2]。例如诃子的提取物有较强的抑菌作用,临床上多用于肺部及消化道的感染。诃子在我国资源丰富且具有多方面的药理活性,在疾病预防、治疗以及饲料添加剂等诸方面都不失为一种应用前景广阔的药物,具有广泛的开发价值,尤其是在治疗水泻等胃肠道疾病方面有很重要的作用[3],因此对诃子的作用机理及临床应用要更进一步的研究。

本试验设计采用离体家兔小肠灌流,观察了诃子提取物导致离体小肠平滑肌收缩力的作用,并初步探讨了其作用机制。

1 材料、试剂和仪器

试验材料:诃子粗提物由郑州牧业工程高等专科学校提供。试验用家兔购自郑州牧业工程高等专科学校实验动物中心。试验仪器:恒温水浴锅、天平、张力换能器、平滑肌离体灌流装置、生物信号采集系统、100～1000μL微量移液器。试验试剂 ∶乙酰胆碱(1∶100000)、酚妥拉明、心得安、台氏液等。

2 药液浓度的配置

用天平称取诃子粗提物1 g置于有刻度的试管中,加入台式液9mL,摇匀使之充分溶解,所得相当于生药1 g/mL药液。

3 试验方法

3.1 标本制备 将禁食24 h的兔击晕,快速剖腹,分别剪下十二指肠、空肠和回肠2～3 cm左右,分别放入38℃台式液中轻轻漂洗,取活动较有规律的一段长2～3 cm的肠段,一端固定于浴管底部的小钩上,另一端用手术线连接固定于张力换能器的应变簧片上。将标本浸置于含37℃台式液的浴管中。通过调整使肠管及其连线有一定的紧张度,即有一定的前负荷,一般前负荷为1～4 g。肠段勿牵拉过紧或过松,肠段避免与周围管壁接触,以免摩擦[4-6],用塑料管将充满氧气的气囊与浴管底部的进气管相连,调节塑料管上的螺旋夹,以控制气流量。

3.2 试验记录与加药 待肠管活动稳定后再用移液器加样,同时打下标记,以收缩频率(次/min)幅度和收缩张力(g)为指标,用生物信号采集处理系统通过第3通道纪录。采用生物统计学方法,所有数据用均值标准差(D)表示,各组均值间的差异性用t检验判断,P＜0.05表示差异显著,P＜0.01表示差异极显著。

4 结果与分析

4.1 诃子粗提物对离体小肠平滑肌肠管收缩活动的影响 诃子粗提物1.0 g/mL,可使十二指肠、空肠和回肠的收缩幅度减小、张力明显降低(P＜0.05),紧张性下降,收缩频率减慢,但无显著差异(P＞0.05)(见图 1、图 2和图3),试验后灌流离体小肠,肠管逐渐又恢复至加样前正常的波峰。

4.2 诃子的粗提物对十二指肠的作用机制

4.2.1 十二指肠正常情况下先加入乙酰胆碱阻断胆碱能M受体,然后再逐渐加入1 g/mL诃子的粗提物并且逐渐加大其剂量,可以得知小剂量时与单独加入1 g/mL诃子的粗提物相比较无明显差异(P＞0.05),但随着诃子粗提物剂量的加大差异开始显著(P＜0.05)(见图4),表明诃子粗提物对十二指肠的抑制可能由胆碱能M受体介导,但诃子粗提物激活M受体抑制十二指肠的运动与诃子的浓度相关。

4.2.2 用酚妥拉明阻断肾上腺α受体和用心得安 肾上腺β受体后,再加入1 g/mL诃子的粗提物,可以得知与单独加入1 g/mL诃子的粗提物相比较,十二指肠张力降低百分率差异极显著(P＜0.01)(见图5和图6)。表明诃子粗提物对酚妥拉明有拮抗作用,其抑制可能是由肾上腺α受体或肾上腺β受体介导。

5 讨论

5.1 诃子含有多种化学成分,其主要成分为鞣酸,不同炮制工艺对诃子中鞣酸质含量有影响[9]。本试验中诃子的粗提物可以使家兔的十二指肠、空肠和回肠的平滑肌有显著的抑制活动,这一结果与以往的报道诃子具有良好的敛郁涩肠而止泻[7]相符,可能是与鞣酸的作用相关。

5.2 诃子粗提物对家兔的离体十二指肠、空肠和回肠有明显抑制作用,可使十二指肠、空肠和回肠的收缩幅度减小、张力明显降低,紧张性下降,收缩频率减慢不显著,表明诃子粗提物可能通过抑制小肠运动的张力使肠管内容物停留时间延长从而发挥其止泻作用的。

5.3 诃子可用于治疗消化系统疾病,如栗福星就报道过诃子对牛腹泻的治疗。这可能与其抑制小肠的收缩活动有关。小肠是消化吸收的主要场所,其机械活动受到神经和体液因素调节,也受中药中某些化学物质的调节。如β受体激活可使小肠平滑肌舒张,本试验中用胆碱能可以阻断M受体,酚妥拉明可以阻断β受体,心得安可以阻断α受体 ,然后在兔离体十二指肠中加入诃子粗提物的结果中可推之诃子的作用可能与激活肾上腺α、β受体和胆碱能M受体都有关,但与激活胆碱能M受体与诃子粗提物的浓度相关,从而提示诃子含有抗胆碱能受体成分,但需要在用药方面应考虑其剂量。诃子对肠管的作用机制与其剂量的使用方面还有待于进一步研究,才能使诃子在开发应用方面有效的利用。

[1]李经纬,余瀛鳌,蔡景峰,等.中医大辞典[M].北京:人民卫生出版社,1987:821.

[2]王金华,孙芳云,杜冠华,等.诃子的药理作用研究进展[J].中国民族医药杂志,2006,12(6):22-24.

[3]栗福星,刘利勇.巧用诃子治疗牛水泻[J].中国牛业科学,2007,33(2):5.

[4]宁榴贤,曾凡潘,吴兴达,等.磁处理党参药液对小肠平滑肌收缩活动影响的研究[J].生物磁学,2004,4(3):6-9.

[5]宋士军,李芳芳,张丽华,等.何首乌对家兔小肠平滑肌收缩活动和电活动的影响[J].河北医科大学学报,2007,28(2):85-88.

[6]张丽华,宋士军,孙英,等.鱼腥草对家兔小肠平滑肌收缩活动和电活动的影响[J].河北中医学学报,2007,22(1):3-5.

[7]苏孝共,朱光辉,王增寿,等.诃子的炮制研究[J].江西中医学院学报,2006,18(5):49-50.