HPLC法测复方氯霉素阴道泡腾片中氯霉素的含量

陈叶平 高婷婷

复方氯霉素阴道泡腾片由氯霉素、己烯雌酚与辅料组成，具有杀菌、抗炎作用，主要用于各种阴道炎、宫颈糜烂和官颈炎。该品种现行标准氯霉素含量测定采用亚硝酸钠滴定法[1]，操作比较繁琐，易容易引起结果的误差，本实验采用高效液相色普法该制剂中氯霉素的含量，方法简便、敏感、准确，结果较满意，现介绍如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

岛津LC-10ATVP高效液相色谱仪；瑞士梅特勒GB204电子天平（0.1mg）；PMS-3C型精密PH计；超声清洗机等。

1.2 试药

复方氯霉素阴道泡腾片（市售品，批号20070922、20080302、20081017）；氯霉素对照品（中国药品生物制品检定所，批号130436-200704）。

1.3 试剂

庚烷磺酸钠、二甲基甲酰胺、冰醋酸为分析纯、乙腈为色谱纯、水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[2]

菲罗门色谱柱C18（250mm×4.60mm，5μm）；流动相0.1%庚烷磺酸钠的溶液（取0.1%庚烷磺酸钠溶液500mL与二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL，混匀）-已腈（70∶30）；检测波长275nm；流速1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL。

2.2 试验溶液的制备

2.2.1 对照品溶液

精密称取干燥剂至恒重的氯霉素对照品10mg，置100mL量瓶中，加适量的甲醇使溶解，加流动相稀释至刻度，作为对照品储备溶液。精密量取该溶液5mL，置于10mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀， 即得对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液

精密称取本品内容物50mg，置100mL量瓶中，加甲醇5mL，再加适量流动相，超声处理5min，再加流动相至刻度，经0.45μm微孔滤膜过滤，滤液作为供试品储备溶液。精密量取该溶液5mL，置于50mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。

2.2.3 阴性对照品溶液

按处方比例制备缺少氯霉素的阴性样品，并按“2.2.2”项下方法制备成阴性对照品溶液。

2.3 系统适用性实验

分别取“2.2.1”、“2.2.2”、“2.2.3”项下的溶液，按“2.1”项下色谱条件经验进样，记录色谱图，见图1。由色谱图可知，阴性对照品色谱在对照品出峰位置上无干扰峰，即在本实验条件下对测定无干扰。氯霉素的保留时间为7.898min，理论塔板数高于9000。

2.4 线性关系的考察

图1 色谱对照图

精密吸取“2.2.1”项下对照品储备溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、10.0mL，分别置10mL量瓶中，加流动相稀释于刻度，摇匀，进样，测得峰面积。以质量浓度（C）为横坐标，峰面积（A）为纵坐标，得回归方程：Y=5E+0.7X，r=0.9995（n=6）。表明氯霉素在0.005～0.05mg/mL范围内呈良好的线性关系。

2.5 精密度试验

取“2.2.1”项下对照品溶液连续进样5次，记录峰面积。RSD为0.07%（n=5）。

2.6 重复性试验

按“2.2.2”项下方法处理同一批批号（20080302）样品5份，依法测定，按外标法计算含量，结果氯霉素的含量为标示量的101.7%：RSD为0.12%（n=5）。

表1 回收率试验表

表2 样品含量测定表

2.7 回收率试验

精密称取已知含量的供试品适量（相当于氯霉素0.5mg）项下的溶液5mL于10mL量瓶中，共3份，分别加入对照溶液3、4、5mL，再加流动相至刻度，分别加样分析，结果见表1。

2.8 样品含量测定

称取3批不同批号的样品分别按按“2.2.2“项下方法处理，进样，记录色谱图，按外标法计算含量，并与结果见表2。

3 讨 论

本法用于测量复方氯霉素阴道泡腾片中氯霉素的含量，无其他成分的干扰，专属性强，重复性好，精密度高，与化学测量法进行比较，测量结果基本一致，适宜控制本品质量。

[1]国家食品药品监督局标准[S].WS-10001(HD～14840-2003).

[2]国家药典委员会编.中华人民共和国药典[S].北京:化学工业出版社,2005:776.