高效液相色谱法测定健儿乐颗粒中芍药苷含量

2010-07-29张琼英

中国药业 2010年17期

张琼英

（重庆医科大学附属第二医院，重庆 400010）

健儿乐颗粒是由山楂、白芍、竹叶卷心等制成的中药制剂，具有清热平肝、清心除烦、健脾消食的功效，用于治疗儿童烦躁不安、夜惊夜啼、夜眠不宁、消化不良。为有效控制产品质量，笔者采用高效液相色谱法测定健儿乐颗粒中芍药苷的含量，现报道如下。

1 仪器与试药

Waters 2695/2996型高效液相色谱仪（Waters公司）。芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号为110736-200527）；健儿乐颗粒（市售品，批号分别为 090801，090802，090803，090804，090901）；水为纯化水，乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：DiamonsilTMC18柱（250 mm × 4.6 mm，5μm）；流动相：乙腈 -0.1%磷酸溶液（14 ∶86）；流速：1.0 mL/min；检测波长：230 nm。理论板数以芍药苷计算不低于3000。

2.2 溶液制备

精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1 mL含0.0884 mg的溶液，作为对照品溶液。取本品10 g，研细，精密称取4.5 g，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50 mL，称定质量，超声处理（功率240 W，频率 45 kHz）30 min，放冷，再称定质量，用稀乙醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。按健儿乐颗粒制备工艺，制备缺白芍的阴性样品，照供试品溶液制备方法制成阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

专属性考察：取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照品溶液各10μL，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。可见供试品溶液色谱中，在与对照品溶液色谱相应位置上有一相同色谱峰，阴性对照品溶液在此保留时间内无吸收峰，表明阴性对照品对测定无干扰，专属性较好（图1）。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察：精密吸取对照品溶液 2，4，8，16，20μL，注入液相色谱仪。以芍药苷进样量为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程 Y=504756.12 X-13501.42，r=0.9999（n=5）。结果表明，芍药苷进样量在 0.1768 ～1.7680μg范围内与峰面积线性关系良好。

精密度试验：精密吸取对照品溶液10μL，重复进样5次，测定芍药苷峰面积。结果的RSD为0.6%（n=5）。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于 0，2，4，10，16 h 时进样。结果芍药苷峰面积的RSD为0.7%（n=5），表明供试品溶液稳定性良好。

重现性试验：按拟订的含量测定方法，取同一批样品6份，依法测定。结果芍药苷平均含量为5.86 mg/袋，RSD为0.90%（n=6）。

加样回收试验：取已知含量的样品6份，分别加入芍药苷对照品，按供试品溶液制备方法制备溶液，测定其芍药苷含量，计算回收率。结果见表1。