慢性乙型肝炎血清 HBV DNA基因检测及其临床意义

梁红峰 梁 健

广东省阳江市人民医院检验科（529500）

目前，乙型肝炎病毒 （hepatitis B virus，HBV）感染的诊断主要依赖于血清特异性抗原抗体和HBV DNA检测，外周血中HBV DNA是病毒复制活跃最直接和可靠的标志，其含量能直接代表患者病毒血症的水平。聚合酶链反应（PCR）是检测乙型肝炎病毒血症的最敏感技术，应用定量 PCR技术检测病毒基因水平国内已有报道[1]。我们采用荧光定量PCR方法检测150例不同类型慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA基因含量，以探讨轻、中、重度慢性乙型肝炎患者与病毒复制水平之间的相关性。

1 材料与方法

1.1 病例选择

研究对象为2007年8月至2008年8月阳江市人民医院传染科收治住院的不同类型慢性乙型肝炎患者150例，诊断符合2000年（西安）全国病毒性肝炎与肝病学术会议修订的诊断标准[2]。其中慢性乙型肝炎轻度70例、中度60例、重度20例，男性126例，女性24例，年龄5～60岁，平均32.7岁，平均病程（6.0±5.4）年。

表1 慢性乙型肝炎患者肝损害程度与血清 HBV DNA含量的关系（±s）

表1 慢性乙型肝炎患者肝损害程度与血清 HBV DNA含量的关系（±s）

注：*与重度比较P＞0.05

组别 例数 HBV DNA (拷贝/mL) HBV DNA≤103 104～106 ≥107慢性乙型肝炎(轻度) 70 17 44 16 5.57±1.80*慢性乙型肝炎(中度) 60 11 35 26 6.25±1.95*慢性乙型肝炎(重度) 20 5 17 7 5.71 ±1.89

1.2 检测方法

HBV DNA基因含量检测采用美国Biotronics公司生产的荧光标记（Amp liSensor）HBV DNA定量试剂盒进行定量聚合酶链反应（PCR）检测，检测仪器采用美国Biotronics公司AG9600荧光定量PCR分析仪，以＜5×103拷贝/mL为阴性结果。为易于统计，均以检测结果绝对值的对数值进行比较。血清TBil、ALT、AST测定采用美国 BECKMAN COUT LER CX5PRO全自动生化分析仪测定，TBil＞17.1μmol /L、ALT＞ 40U/L、AST＞40U/L为异常，所有检测及实验均严格按照试剂说明书进行操作。

1.3 统计学处理

采用t检验及χ2检验。

2 结 果

2.1 慢性乙型肝炎血清 HBV DNA基因含量与肝损害程度的关系

见表1。

2.2 血清 HBV DNA基因含量与肝功能的关系

见表2。

表2 慢性乙型肝炎血清 HBV DNA基因含量与肝功能的关系（±s）

表2 慢性乙型肝炎血清 HBV DNA基因含量与肝功能的关系（±s）

注:各组间比较无明显差异，TBil组、ALT组、AST组，P＞0.05

HBV DNA(拷贝/mL) 例数 TBil(μmol /L) ALT(U /L) AST(U /L)≤103 23 42.00±56.79 222±343 137±220 104～106 86 38.22±54.02 259±326 204±335≥107 41 28.41±39.00 335±447 218±278合计 150 36.13±50.73 274±368 196±301

3 讨 论

在我国HBV慢性感染者大约占10%，是慢性肝炎、肝硬化、肝癌发生的主要原因。而 HBV感染传统的血清学诊断指标多采用ELISA法检测，它实际检测的是人体对HBV的免疫反应状态，该方法除敏感性较PCR低外，而荧光定量PCR方法则是检测 HBV DNA的基因含量，更准确灵敏、真实地反映了HBV的感染状态和复制情况，对于乙型肝炎的临床诊断、治疗方案的选择和疗效评价均具有较重要的指导作用[3]。文献报道检测血清HBV DNA含量，能较好地反映HBV感染者的病毒血症水平和传染性强弱程度，本研究150例慢性乙型肝炎虽然有的病例血清HBeAg阴性，但部分患者有高水平的HBV DNA，提示有活跃的病毒复制[4]。对于血清HBeAg阴性、抗-HBe阳性，而HBVDNA高水平、肝功能异常的患者在临床上应引起足够的重视，因此类患者常存在HBV持续活跃复制，且与乙型肝炎慢性化、病变活动或重型化等有关[5,6]。血清HBV DNA含量与慢性乙型肝炎病情轻重的关系仍不十分清楚。国内报道，慢性乙型肝炎患者中随着肝损害程度的加重（依次为轻度、中度、重度），其HBV DNA基因含量逐渐下降，认为患者病情越重病毒复制水平越低[7,8]。本研究结果显示，慢性乙型肝炎轻度、中度血清HBV DNA基因含量与慢性乙型肝炎重度比较，无明显差异，未发现慢性乙型肝炎患者随肝损害程度的加重HBV DNA基因含量逐渐下降的现象。本文研究结果显示血清HBV DNA基因含量与血清TBil、ALT、AST水平无相关性，即血清HBV DNA的复制水平与肝脏的炎症程度无关，提示机体对HBV的免疫应答是造成肝组织破坏和肝功能损害的主要机制，而HBV并不直接导致肝脏细胞病变。

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