两种刺五加提取物对大鼠脑缺血/再灌注损伤后SOD和MDA水平的影响

张凯波 吴松泉

浙江省丽水学院医学院（323000）

刺五加提取物和刺五加注射液在临床上广泛应用，具有明显的抗脑缺血/再灌注损伤作用[1,2]。但同时亦有报道称刺五加注射液引起各类不良反应及过敏反应[3,4]。探究其原因除了患者个体差异外，主要是因为刺五加制剂成分复杂，输液过程中产生微粒变化。因此解决这一问题的关键是确定刺五加提取物中抗脑缺血/再灌注损伤的有效成分。本实验以两种不同的刺五加提取物分别干预脑缺血/再灌注损伤的大鼠，观察自由基灭活酶和自由基产物的变化，以推断刺五加抗脑缺血/再灌注损伤的有效部位。

1 材料与方法

1.1 实验药物

刺五加总黄酮和刺五加去总黄酮提取物，原药材购自宝丰药业，刺五加总黄酮和刺五加去总黄酮提取物由黑龙江中医药大学药物研究所提取。

1.2 试剂

SOD临床检测试剂盒、MDA检测试剂。

1.3 动物分组

SD大鼠32只，（300±20）g，雌雄各半，随机分为4组，每组8只，分别为A组（模型组），B组（刺五加总黄酮组），C组（刺五加去总黄酮提取物组），D组（假手术组）。

1.4 给药方法及动物模型制备

A、D两组给予生理盐水灌胃，B组C组分别以刺五加总黄酮和去总黄酮提取物灌胃，给药剂量按体表面积比例计算得18mL/kg。各组均连续给药1周后禁食不禁水24h后参考longa[5]方法并加以改进造大脑中动脉闭塞（MCAO）局灶性脑缺血模型，3h后拔出线栓实现再灌注，立即断头取脑。以1∶10比例制成脑组织匀浆，－4℃保存备用。

1.5 观察指标与检测方法

脑组织SOD含量以黄嘌呤氧化酶法测定。脑组织MDA含量以改良八木国夫法[6]测定。

1.6 数据处理

2 结 果

如表1所示，与D组比较A组大鼠脑组织SOD明显下降，MDA水平明显上升（P＜0.05）。与A组相比，B组大鼠脑组织SOD有显著提高（P＜0.05），MDA水平显著下降（P＜0.05）；C组大鼠脑组织SOD、MDA水平也有一定变化，但与A组比较无显著性差异（P＞0.05）。

表1 局造性脑缺血/再灌注后各组SOD和MDA水平（±s）

表1 局造性脑缺血/再灌注后各组SOD和MDA水平（±s）

★与D组比较P＜0.05；* 与A组比较P＜0.05；☆A组比较P＞0.05

组别 n SOD（NU/mL） MDA（nmol/mol）A组 8 40.32±2.54★ 7.57±1.88★B组 8 56.57±2.83* 5.43±1.54*C组 8 42.13±1.96 ☆ 4.41±1.67☆D组 8 63. 48±3.23 1.79±0.85

3 讨 论

脑缺血/再灌注损伤初期使机体爆发性产生了大量的自由基，清除自由基系统因此受到消耗和抑制，表现为超氧自由基清除剂活力迅速下降。SOD对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，此酶能清除O2·，保护细胞免受损伤。SOD是体内主要的自由基清除剂，MDA是氧自由基与生物膜多聚不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的产物，其产生量与氧自由基的量相平行，因而测定MDA最可反映氧自由基的水平，间接反映出细胞损伤的程度。脑缺血/再灌注损伤引起了整个机体氧化抗氧化系统的失衡，SOD和MDA参与了整个机体对脑缺血/再灌注损伤的反应，并与损伤的病程发展密切相关[7]。SOD活力与MDA含量在理论上是互相牵制，此消彼长的关系，SOD和MDA水平变化一方面是自由基清除和生成水平的直接体现，另一方面可以较好地反映脑神经细胞的损伤、修复情况。

本实验中模型组大鼠脑组织SOD和MDA水平与假手术组比较有明显变化验证了这一理论。同时我们可以看到B组与A组比较，刺五加总黄酮能有效提高脑组织SOD含量，同时降低MDA水平，二者有比较有显著性差异。而C组与A组比较虽然有数字的变化，但二者间在统计学上无显著性差异。因此我们认为从影响自由基代谢的角度看，刺五加总黄酮具有抑制有害自由基产生、诱导自由基灭活酶生成的作用，是刺五加抗脑缺血/再灌注损伤的有效部位。

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