早期梅毒的TRUST和TPPA检测对比临床探讨

朱玉梅

早期梅毒的TRUST和TPPA检测对比临床探讨

朱玉梅

目的 应用两种不同的血清学检测方法测定血清梅毒抗体，比较其检测方法的特性。方法 对200例临床确诊的患者同时进行甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)两种方法进行检测，分析和比较两种方法的敏感性。结果 200例样本中，186例为TPPA阳性，阳性率为93.1%；144例为TRUST阳性，阳性率为72.0%。结论 在梅毒诊断中，TPPA的敏感性高于TRUST。

梅毒；TPPA；TRUST；敏感性

梅毒螺旋体感染俗称梅毒，是由苍白密螺旋体(treponema pallidum)即梅毒螺旋体(treponema pallidum TP)所引起的一种慢性、系统性的传播性疾病，是我国三大性传播疾病之一[1]。当人体感染梅毒后，螺旋体很快散播全身，可侵犯机体各组织与器官，临床表现多样，病程较长，且时隐时显。近年来我国梅毒的发病率有逐年增加的趋势、研究新的快速、价廉、简便、敏感且特异的诊断方法是当前主要研究热点。

目前梅毒的实验室筛查诊断方法有两类：一类是非梅毒螺旋体抗原血清试验(如VDRL、RPR、USR、TRUST)，这些试验具有相同的标准化抗原(心磷脂、卵磷脂和胆固醇)，所以敏感性相同；另一类采用梅毒螺旋体抗原血清试验(如TPHA、TPPA、FTAABS、TPELISA)，其特异性、灵敏度各异。免疫印迹法可作为确证试验，但成本较高、操作复杂，尚不适用于临床筛查[2]。本文采用TRUST、TPPA同时检测200例标本，现报道如下。

1 材料和方法

1.1 标本来源 标本来源于2008年1月～2009年7月间本院性病门诊确诊梅毒患者200例，年龄19～52岁，男性107例，女性93例，采用真空采血管一次性抽取静脉血约3mL，静置待凝，分离血清，-20℃冰箱内保存备用。

1.2 试剂和仪器 甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)试剂盒(上海荣盛生物技术有限公司提供)；梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)试剂盒(日本富士瑞必欧公司提供)；加样器(上海求精生化试剂仪器有限公司提供)。

1.3 方法 清晨空腹采集静脉血3mL，所有标本同时进行TRUST和TPPA检测。两项试验均为阳性者为梅毒血清学阳性，TRUST定性试验阳性者加检TRUST血清滴度(血清作1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32、1∶64稀释)。按试剂盒说明书操作。

1.4 统计学处理 采用SPSS软件检验各组间差异。

2 结果

200例血清均用TRUST和TPPA两种方法检测，结果见表1。

在144例TRUST阳性血清中做TPPA试验，发现有10例阴性，均可见TRUST对梅毒诊断特异性为93%与文献[3]中描述基本相符。

以TPPA为标准TRUST的特异性为82.4%和敏感度93.5%。见表2。

3 讨论

梅毒螺旋体(TP)又称苍白密螺旋体，人体是其惟一宿主，主要是以性传播为主，人体在感染苍白螺旋体后可产生两种抗体：一种是针对病原体表面物质产生的特异性抗体IgG和IgM；另一种则是梅毒螺旋体在破坏人体组织时释放的类脂类抗原性物质刺激机体产生具有抗体性质的反应素。

中华人民共和国《国家标准梅毒诊断标准及处理原则》指出，梅毒诊断必须根据病史、临床症状、体检及实验室检查等进行综合分析，慎重做出诊断。梅毒血清试验是梅毒临床诊断中重要的依据之一，但决不能认为是可以替代一切的惟一的依据，因为任何一种试验都不能做到100%的准确，都会出现一些假阳性结果。所以，对其判断应该慎之又慎[5-6]。

梅毒的实验室诊断在梅毒的诊断中有非常重要的意义，是诊断梅毒的重要依据。当人体感染梅毒螺旋体后4～10周，血清中可产生抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体(主要是IgG、IgM)和一定数量的抗类脂质抗原的非特异性反应素抗体(主要是IgM和IgG)。梅毒的实验室诊断就是运用各种免疫学及生物化学的方法来检测此两种抗体。这种诊断梅毒的方法已成为梅毒临床诊断不可缺少的步骤。由于梅毒病理和临床经过的复杂性，以及病期长和时隐时现的特点，临床上还存在生物学假阳性的情况，故将临床血清试验分为两大类：一类为非梅毒螺旋体抗原血清试验，常用性病研究实验室试验(VDRL)、不加热血清反应素试验(USR)、血浆反应素环状卡片试验(RPR、TRUST)，主要应用于初筛试验和疗效观察；另一类为梅毒螺旋体抗原血清试验，常用有梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)、19sIgM梅毒螺旋体血球凝集试验(19sIgM．TPHA)试验，主要应用于确证试验，对疗效观察意义不大。

梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)是针对梅毒特异性抗体的检测。人体一旦感染梅毒螺旋体后，该抗体检测终身为阳性。它采用双抗体夹心法，具有很高的特异性和敏感度，且重复性好。TPPA具有快速、简便、敏感和特异等特点。只要有血清通常用作1∶80以上稀释微量的抗体就可使致敏明胶颗粒发生凝聚作用。试剂盒内的血清吸收剂可消除试验中的生物学假阳性反应，提高实验的特异性。本实验通过对200例血清均用TRUST和TPPA两种方法检测，对比检验结果发现TRUST阳性率为72%，而TPPA实验阳性率为93%。实验结果表明TPPA实验阳性检测率较高，结合临床资料200名患者临床确诊为早期梅毒，也与对梅毒诊断特异性为93.1%与文献[3]中描述基本相符。

表1 TRUST和TPPA两种方法检测200例血清结果比较

表2 以TPPA为标准TRUST的特异性和敏感度

甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)则主要是测定血清中的心磷脂抗体。梅毒螺旋体内部具有类脂质抗原，在螺旋体属中各群之间或同螺旋体以外均可出现交叉反应，而且采用肉眼观测，其漏检率较高，故特异性、敏感度较低，但其价格低廉、操作简便。本研究以TPPA为标准TRUST的特异性为82.4%和敏感度93.5%说明以TPPA实验在特异性和敏感度等指标均优于TRUST实验。

虽然TPPA具有更高的敏感性和特异性，但TRUST实验具有快速简便的特性，这两种试验都可用于梅毒的筛查和治疗效果的检测。试验的优点：方法简易、快速、敏感性和特异性好。适用于大量人群的血清筛查。早期梅毒硬下疳出现一二周后可呈阳性，经治疗后血清滴度可下降并转阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发或再感染的指征。

TRUST滴度与疾病损害程度呈正相关，是疾病急性期出现较早的抗体，而本文所讨论的TPPA是检测IgG抗体，故当急性期疾病未治愈或愈后患者都可能出现阳性。TRUST试验在抗体含量过高时可出现前带现象，生物学假阳性反应可出现于孕妇、患上呼吸道感染、肺炎、活动性肺结核、风湿性心脏病、亚急性细菌性心内膜炎、传染性肝炎、肝硬化、慢性肾炎、钩端螺旋体病、麻风、疟疾、猩红热、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮及海洛因成瘾等疾病，常导致过激治疗。因此对疾病的诊断特异性要与TPPA诊断结合在一起。

[1]郭兑山,长劲东,郭津津.梅毒螺旋体抗体IgG酶联免疫吸附实验的建立[J].中华皮肤科杂志,2001,34(3):224-225.

[2]王芳,成海.梅毒螺旋体实验室检测技术[J].中国皮肤性病学杂志,2003,17(2):135-136.

[3]Young H.Guidelines for serological testing forsyphilis[J].Sex Transm Infec,2000,76(5):403-405.

[4]Pope V,Fears MB,Morril WE,et al.Comparison of the Serodia Treponema pallidum particle agglutination，CaptiaSyphilisG,and Spirotek ReaginⅡ tests with standard test techniques for diagnosis of syphilis[J].J Clin Micr obilogy,2000,38(7):2543-2545.

[5]龙振华.实用病毒学[M].北京:中国人口出版社,1999:265-266.

[6]李明友,黎永新.TRUST和TPPA联合检测对梅毒的监控和诊治价值[J].现代医院,2006,6(4):53.

10.3969/j.issn.1009-4393.2010.20.073

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