Bax和E2F-1在子宫腺肌病中的表达及意义

张 巍，艾中伟，郑立红，陈 萍，王 玉

（齐齐哈尔医学院病理中心，黑龙江齐齐哈尔 161006）

子宫腺肌病（adenomyosis，AM）严重影响妇女的身心健康，发病率逐年上升而发病机制尚不清楚，因而备受关注。近年来，关于子宫内膜异位症（endometriosis，EM）的研究取得很大进展，但对子宫腺肌病的深入研究却较少。本研究应用免疫组化SP法检测子宫腺肌病中凋亡调节蛋白Bax及转录因子E2F-1的表达情况，以探讨其与子宫腺肌病发生及发展的相关性，为寻找该病的病因及临床防治提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集齐齐哈尔医学院各附属医院2006～2008年因患子宫腺肌病而行手术治疗的术后切除标本72例为研究组，取其异位子宫内膜及原位内膜，其中，增生期39例，分泌期33例；对照组正常子宫内膜取自因非子宫内膜疾病（子宫肌瘤等良性病变）而切除子宫的内膜标本55例，其中，增生期31例，分泌期24例。所有患者平均年龄（43.5±4.7）岁，月经周期25～41 d。两组患者术前均无性激素治疗等特殊病史，孕产次、月经周期等差异均无统计学意义，标本内膜分期及诊断依据月经周期时间结合HE染色组织切片后的病理诊断为准。

1.2 试剂与方法

所有标本行常规石蜡包埋后4 μm厚连续切片4张，1张行HE染色，其他做免疫组化染色（SP法）。E2F-1鼠抗人单克隆抗体购自美国Neo Markers公司。Bax单克隆抗体、SP试剂盒、DAB显色试剂盒购自福州迈新生物技术公司。设阴性及阳性对照，其他按说明书常规操作。

1.3 结果判定

免疫组化染色反应为黄至棕黄色颗粒，Bax的阳性表达产物为细胞膜和细胞质内黄色或棕黄色颗粒，E2F-1的阳性表达产物为细胞核内棕黄色颗粒。细胞数>10%为阳性标准。

1.4 统计学处理

采用χ2检验，经SPSS 12.0分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Bax的表达

在子宫腺肌病组织中，其原位子宫内膜和异位子宫内膜中Bax蛋白的表达明显增加，与正常子宫内膜组织比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。子宫腺肌病组织中Bax表达在增生期和分泌期差异无统计学意义（P>0.05），Bax在原位与异位内膜组间表达差异无统计学意义（P>0.05）（表1）。

表1 子宫腺肌病组织和正常子宫内膜组织中Bax的表达[n(%)]Tab.1 The expression of Bax in endometrium of adenomyosis and normal endometrium[n(%)]

2.2 E2F-1的表达

转录因子E2F-1在子宫腺肌病组织中的表达明显增加，且其表达与正常子宫内膜组织比较，差异有统计学意义（P<0.05）。子宫腺肌病组织中E2F-1表达在增生期与分泌期差异无统计学意义（P>0.05），E2F-1在原位与异位内膜组间的表达差异无统计学意义（P>0.05）。在子宫腺肌病患者组织中Bax、E2F-1的表达具有一定的正相关性（表2）。

表2 子宫腺肌病组织和正常子宫内膜组织中E2F-1的表达[n(%)]Tab.2 The expression of E2F-1 in endometrium of adenomyosis and normal endometrium[n(%)]

3 讨论

细胞凋亡（apoptosis，APO）是一种由基因调控的细胞自身程序性死亡，在生物体的正常生理活动和病理过程中都有十分重要的意义。当细胞凋亡调控程序紊乱时就会引发疾病，但近年研究热点都在恶性肿瘤上[1-2]，子宫腺肌病虽为良性病变，但其异位内膜腺体及间质侵及子宫肌层，其生物学行为与恶性肿瘤有相似之处，以此推断其发病机制可能与凋亡相关。近年来研究发现，子宫内膜异位症患者内膜细胞与正常人内膜细胞凋亡率差异显著，细胞凋亡异常可能是子宫内膜异位症发生及发展的重要原因之一[3-4]。

凋亡调节蛋白Bax于1993年被发现，作为Bcl-2的对抗剂。bcl-2基因是近年来发现的细胞凋亡控制基因，通过控制细胞凋亡而延长细胞的寿命[5]。在正常子宫内膜中Bcl-2表达呈周期性变化，增生期强于分泌期，分泌期强于月经期，但在子宫腺肌病病灶中，Bcl-2持续表达而无周期性变化[6]。与其相似，Bax可促进细胞死亡，被称为“凋亡促进基因”，可通过调节细胞凋亡而缩短细胞寿命。本研究显示，在正常子宫内膜中Bax表达呈明显周期性变化，且增生期高于分泌期；在子宫腺肌病组织中Bax蛋白的表达显著高于正常子宫内膜组织，且持续表达而无周期性变化（正常子宫内膜Bax表达低于子宫腺肌病的异位内膜Bax表达）。以此推断子宫腺肌病的发病机制可能与Bax的表达增加、内膜细胞对凋亡敏感性下降有关。这为研究子宫腺肌病的发病机制和寻找防治对策提供了新的理论依据。

E2F-1蛋白作为转录因子家族中的一员，对细胞周期限制点起直接调控作用，是细胞周期中G1期向S期过渡的重要调控因子[7-8]。E2F-1的表达可缩短细胞从G1期进入S期的时间，使细胞周期失调，引发细胞过度增殖。研究显示，E2F-1既可作为癌基因又能作为抑癌基因起作用，推测与细胞所处环境不同及器官特异性有关[9-12]。本研究表明，E2F-1的表达在子宫腺肌病组织中明显高于正常子宫内膜组织，说明E2F-1蛋白的高表达可促进异位内膜过度增殖，可使异位内膜细胞具有更强的分裂增殖及浸润能力，与子宫腺肌病的发生呈正相关。

综上所述，Bax、E2F-1的表达与子宫腺肌病的发生密切相关。子宫内膜细胞自发性凋亡是其保持正常结构的关键，而凋亡异常是子宫腺肌病发生的重要因素。因此，推测E2F-1表达增高，同时Bcl-2也增高，两者发挥协同作用诱发子宫腺肌病。研究细胞凋亡对探讨子宫腺肌病的发病机制及指导临床治疗有重要意义。

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