山楂水提物对大鼠离体胃、肠平滑肌条收缩性的影响研究

温小萍，邓卅，林原，刁云鹏，黄珊珊，张厚利#（1.海南省人民医院药学部，海口市 570311；.大连医科大学药学院，大连市 116044）

山楂为蔷薇科植物山楂Crataegus Pinnatifida Bge、山里红Crataegus Pinnatifida Bge.var.major N.E.Br.的干燥成熟果实。山楂为传统的中药，其果肉、叶及核均可入药。中医认为，山楂性味酸、甘，微温，归脾、胃、肝经；具有开胃消食、消积化滞、活血化瘀、收敛止痢的功效，近年来常以山楂用于高血压、冠心病及高脂血症的治疗[1，2]。

现代研究证明，山楂中主要含有熊果酸、黄酮、有机酸等多种化合物，其中有机酸既含有枸橼酸和苹果酸等水溶性有机酸，又含有熊果酸和齐墩果酸等脂溶性三萜酸[3～5]。有研究表明，山楂中的有机酸具有助消化、健胃消食作用。但是，山楂对胃肠道平滑肌的收缩状况的直接影响及其作用机制却未见文献报道。考虑到大鼠胃平滑肌条模型是研究胃肠道运动的经典模型，笔者采用大鼠胃、肠平滑肌条考察山楂对胃肠道平滑肌运动的影响。

1 材料

1.1 仪器

HW-400S恒温平滑肌槽/BL-420F生物机能实验系统（成都泰盟科技有限公司）。

1.2 试药

山楂饮片购自大连海王星辰大药房，由大连医科大学药学院张厚利副教授鉴定为真品。乙酰胆碱、阿托品（上海信谊金朱药业有限公司，批号分别为081024、071202）；克氏液（笔者自制：氯化钠 114.0 μmol·L-1、氯化钾 4.7 μmol·L-1、氯化镁1.2 μmol·L-1、氯化钙 2.5 μmol·L-1、磷酸二氢钠 1.8 μmol·L-1、葡萄糖11.5 μmol·L-1、碳酸氢钠18.0 μmol·L-1，pH 7.4）。

1.3 动物

SD大鼠40只，♀♂各半，体质量180～250 g，由大连医科大学实验动物中心提供（动物生产许可证号：SCXK（辽）2002-0002）。

2 方法

2.1 药品的制备

取山楂100 g，用1000 mL 80℃的水浸泡1 h，煮沸1.5 h，过滤，滤渣加入800 mL水再次煮沸1 h，过滤，去渣，合并滤液，用旋转蒸发仪减压浓缩至浸膏，备用。使用时加蒸馏水配成所需浓度。

2.2 山楂水提物对大鼠胃平滑肌条运动的影响

实验前大鼠禁食48 h，不禁水，击毙后立即剖开腹腔，取出胃迅速放入克氏液中，剪出胃底部。沿胃小弯剪开胃腔，去除黏膜，平行剪开5～6道使形成较长胃底条，取2 cm胃底条下端固定于浴槽下部通气侧弯钩上，上端与换能器相连，放入37℃克氏液浴槽中并通以95%O2和5%CO2，稳定约50 min，记录张力曲线及给予不同剂量山楂水提物且稳定10 min后胃平滑肌条收缩状况。观察大鼠离体胃平滑肌条的收缩振幅。

2.3 山楂水提物对大鼠肠平滑肌条运动的影响

实验前大鼠禁食4 h，不禁水，击毙后立即剖开腹腔，沿回盲部向上取出一段长度约为5～8 cm的小肠，立即放入冰浴的克氏液中贮藏，备用。取2 cm肠管下端固定于浴槽下部通气侧弯钩上，上端与换能器相连，放入37℃克氏液浴槽中并通以95%O2和5%CO2，稳定约30 min，记录张力曲线及给予不同剂量山楂水提物且稳定10 min后肠平滑肌条收缩状况。观察大鼠离体肠平滑肌条的收缩振幅。

3 结果

3.1 山楂水提物对大鼠胃平滑肌条运动的影响

正常克氏液条件下，设定胃平滑肌条的收缩幅度为100%；加入山楂水提物5 mg·mL-1，胃平滑肌条的收缩幅度为（115±4.88）%，即对大鼠胃平滑肌的收缩有显著加强作用（P＜0.01）。当山楂水提物的浓度增加为10、20、40 mg·mL-1时，胃平滑肌条收缩幅度分别 为（121± 5.31）% 、（134± 6.25）%、（147±8.06）%，表明山楂水提物在5～20 mg·mL-1浓度范围内可显著加强大鼠胃平滑肌条的运动，且具有显著剂量依赖性。山楂水提物对大鼠胃平滑肌条运动的影响见图1。

图1 山楂水提物对大鼠胃平滑肌条运动的影响与给予山楂水提物前比较：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01Fig 1 Effect of Folium Crataegi water extract on the contractility of isolated gastric muscle in ratsvs.before Folium Crataegi water extract treatment：＊P＜0.05 ，＊＊P＜0.01

3.2 山楂水提物对大鼠肠平滑肌条运动的影响

正常克氏液条件下，设定肠平滑肌条的收缩幅度为100%，加入山楂水提物 5 mg·mL-1时，肠平滑肌条的收缩幅度为（126±4.65）%，即对大鼠肠平滑肌的收缩具有显著加强作用（P＜0.01）。当山楂水提物的浓度增加为 10、20、40 mg·mL-1时，胃平滑肌条收缩幅度分别为（137±4.88）%、（148±5.61）%、（166±7.34）%，表明山楂水提物在5～20 mg·mL-1浓度范围内可显著加强大鼠肠平滑肌条的运动，且具有显著剂量依赖性。山楂水提物对大鼠肠平滑肌条运动的影响见图2。

图2 山楂水提物对大鼠肠平滑肌条运动的影响与给予山楂水提物前比较：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01Fig 2 Effect of Folium Crataegi water extract on the contractility of isolated rat intestinal smooth musclevs.before Folium Crataegi water extract treatment：＊P＜0.05 ，＊＊P＜0.01

3.3 山楂水提物对乙酰胆碱作用下大鼠肠平滑肌运动的影响

正常克氏液条件下，待大鼠肠平滑肌条在收缩稳定后，加入终浓度为4 μmol·L-1的乙酰胆碱，可使肠平滑肌的收缩显著增强，收缩幅度由正常的100%增加为（165±0.13）%，在此基础上加入山楂水提物（终浓度20 mg·mL-1）可进一步增强肠平滑肌的收缩，收缩幅度变为（178±0.19）%。结果表明，山楂水提物对乙酰胆碱具有显著的协同作用。山楂水提物对乙酰胆碱作用下大鼠肠平滑肌运动的影响见图3。

图3 山楂水提物对乙酰胆碱作用下大鼠肠平滑肌运动的影响与克氏液比较：＊P＜0.01；与乙酰胆碱比较：#P＜0.01Fig 3 Effect of Folium Crataegi water extract on contractility of isolated rat gastric and intestinal smooth muscles induced by acetylcholinevs.kreb’solution：＊P＜0.01；vs.acetylcholine：#P＜0.01

3.4 山楂水提物对阿托品作用下大鼠肠平滑肌运动的影响

正常克氏液条件下，待肠平滑肌条在收缩稳定后，加入终浓度为5 μmol·L-1的阿托品，可使肠道平滑肌的收缩显著减弱，收缩幅度由正常的100%减弱为（48±0.17）%，在此基础上加入山楂水提物（终浓度20 mg·mL-1）可使肠道平滑肌收缩显著加强，收缩幅度变为（97±0.11）%。结果表明，山楂水提物对阿托品具有显著的拮抗作用。山楂水提物对阿托品作用下大鼠肠平滑肌运动的影响见图4。

图4 山楂水提物对阿托品作用下大鼠肠平滑肌运动的影响与克氏液比较：＊P＜0.01；与阿托品比较：#P＜0.01Fig 4 Effect of Folium Crataegi water extract on the contractility of isolated rat intestinal smooth muscle induced by atropinevs.kreb’solution：＊P＜0.01；vs.atropine：#P＜0.01

4 讨论

本研究结果表明，山楂水提物对正常收缩条件下的大鼠胃、肠平滑肌条收缩幅度有显著加强作用；对乙酰胆碱引起的肠平滑肌条强烈收缩有协同作用；对阿托品引起的肠平滑肌条的抑制效应有对抗作用。说明山楂水提物对胃、肠平滑肌运动具有显著增强作用。本研究中山楂水提物对胃肠道的显著增强作用主要归因于山楂水提物中存在大量的有机酸。

从山楂中发现且分离得到的物质有150多种，其中主要有黄酮类、低聚黄烷类、有机酸类，另外还含有三萜类、甾体类和有机胺类等[6，7]。山楂生品中水溶性有机酸的含量较高，为5%～9%，其中枸橼酸占水溶性有机酸总量的60%左右。所以，山楂生品对胃肠刺激作用大，炮制后则一定程度上降低了总有机酸的含量，减少了对胃肠的刺激作用，保证了临床疗效的发挥[8，9]。这完全符合山楂的一般应用规律，即消食化积用炒制品，同时与笔者所研究的焦山楂对胃肠道平滑肌的作用结果相符。

[1]孙翠玉.山楂的研究进展[J].基层中药杂志，2001，15（5）：53.

[2]陈 佳，宋少江.山楂的研究进展[J].中药研究与信息，2005，7（7）：20.

[3]赵 宏，杨 波，刘玉含.山楂果中主要成分的提取及成分分析方法研究[J].黑龙江医药科学，2005，28（6）：24.

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[5]马坤芳，王德旺，都述虎，等.HPLC法测定山楂叶中总黄酮的含量[J].中国药房，2008，19（33）：2599.

[6]刘荣华，邵 峰，邓雅琼，等.山楂化学成分研究进展[J].中药材，2008，3（7）：104.

[7]时岩鹏，丁杏苞.山楂化学成分的研究[J].中草药，2000，31（3）：173.

[8]杨 滨，李 化，赵宇新.山楂炮制前后有机酸含量的变化[J].中国中药杂志，2004，29（11）：38.

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