布渣叶水提物解热退黄作用的实验研究Δ
2010-05-22曾聪彦梅全喜高玉桥戴卫波钟希文冯剑威广州中医药大学附属中山中医院药学部中山市528400
曾聪彦,梅全喜,高玉桥,戴卫波,林 慧,钟希文,冯剑威,胡 莹(广州中医药大学附属中山中医院药学部,中山市 528400)
布渣叶又名蓑衣子、破布叶、麻布叶、烂布渣、布包木等,为椴树科植物破布叶Microcos paniculata L.的干燥叶,具有清热消滞、利湿退黄之功效,用于感冒、湿热食滞之脘腹痛、食少泄泻、湿热黄疸[1]。布渣叶药用历史并不长,古代和现代的临床应用也比较少,主要在广东民间煲凉茶的原料中出现,其保健作用广为认可[2]。现代研究表明,布渣叶含有挥发油、黄酮类、生物碱、三萜类、有机酸、氨基酸、蒽醌、强心苷等成分[3]。药理研究表明,本品有降血脂、抗衰老及杀虫作用[4],而针对本品具有清热消滞、利湿退黄功能的药效学研究则未见有报道。因此,笔者根据布渣叶的功能主治对其进行解热退黄药效学研究,为以后更好开发应用布渣叶提供理论依据。
1 材料
1.1 仪器
TD25-WS型48孔多管架自动平衡离心机(长沙湘仪离心机仪器有限公司);S648型三用水浴箱(汕头市第二医疗器械厂);7170A型全自动生化分析仪(日本日立公司);微量移液器(上海求精生化试剂仪器有限公司);BS224S型电子天平(北京赛多利斯仪器有限公司)。
1.2 试药
布渣叶(购于广东省中山市香山药业有限公司,经广东中山市药品检验所鉴定为真品);吲哚美辛片(上海信宜九福药业有限公司,批号:070302);α-萘异硫氰酸萘脂(ANIT,北京恒业精细化学品有限公司);干酵母(深圳稻香村食品有限公司);生理盐水、蒸馏水(广州中医药大学附属中山中医院制剂室自制)。
1.3 动物
SD大鼠,♀♂兼半,体质量180~220 g;SPF级昆明种小鼠,♀♂兼用,体质量(20±2)g,均由广东省医学实验动物中心提供(动物合格证号:SCXK(粤)2003-0002)。
2 方法
2.1 布渣叶水提物的制备
取布渣叶药材2.34 kg,加水,煎煮2次,合并滤液,浓缩成1500 mL,加适量防腐剂,放冷,贮藏于冰箱中,临用前配制成所需浓度。
2.2 布渣叶水提物的解热作用[5]
选用SD大鼠60只,♀♂兼半,测量其基础肛温。选出9只做预实验,观察酵母混悬液致大鼠发热时间段以及选择酵母的剂量。将余下的SD大鼠51只称重,随机分为5组,即空白(生理盐水)、吲哚美辛(0.00225 g·kg-1)及布渣叶水提物高、中、低剂量(16.8、8.4、4.2 g·kg-1)组。各组大鼠连续ig 3 d,第3天ig后立即sc 20%酵母混悬液0.8 mL·100 g-1。测定大鼠注射酵母混悬液后4、5、6、7、8、9 h的肛温,记录体温变化,比较组间差异。
2.3 布渣叶水提物的退黄作用[6]
取昆明种小鼠65只,♂30只,♀35只,随机分成5组,即空白(生理盐水)、模型(生理盐水)及布渣叶水提物高、中、低剂量(23.4、11.7、5.58 g·kg-1)组。ig 给药,每天1次,连续15 d。除空白组外,其余各组分别于第13天ig后2 h ig ANIT花生油溶液60 mg·kg-1。所有小鼠处死前禁食12 h,第15天断头取血,以3500 r·min-1离心10 min,测总胆红素(T-Bil)、直接胆红素(D-Bil)含量及碱性磷酸酶(ALP)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性。
2.4 统计学方法
3 结果
3.1 布渣叶水提物的解热作用
注射酵母后7 h,空白组大鼠体温变化升到最大值;与空白组比较,布渣叶水提物高、中剂量组大鼠体温显著降低(P<0.05),且温度变化接近正常基础体温水平。在5 h段,空白组大鼠体温变化降低到比较低的水平;与空白组比较,布渣叶水提物中、低剂量组大鼠体温显著降低(P<0.05),且体温变化接近正常基础体温水平。结果表明,布渣叶水提物有较好的解热作用,并能促使干酵母致大鼠体温波段变化维持在正常水平。布渣叶水提物对发热模型大鼠的解热作用见表1。
3.2 布渣叶水提物的退黄作用
表1 布渣叶水提物对发热模型大鼠的解热作用()Tab 1 Antipyretic effect of water extract of M.paniculata in febrile model rats()
表1 布渣叶水提物对发热模型大鼠的解热作用()Tab 1 Antipyretic effect of water extract of M.paniculata in febrile model rats()
与空白组比较:*P<0.05vs.blank group:*P<0.05
组别空白组吲哚美辛组布渣叶水提物高剂量组布渣叶水提物中剂量组布渣叶水提物低剂量组剂量/g·kg-1-0.0022516.88.44.2 n 注射酵母后不同时间大鼠体温变化/Δ℃基础体温/℃37.2±0.3536.9±0.4037.3±0.6637.3±0.4437.0±0.5410101010114 h-0.34±0.420.24±0.54*-0.63±0.70-0.38±0.830.02±0.535 h-0.28±0.330.33±0.71*-0.35±0.660.44±0.39*0.43±0.75*6 h 0.32±0.620.2±0.850.53±0.550.55±0.340.66±0.727 h 1.14±0.480.40±0.52*0.51±0.66*0.44±0.30*0.84±0.688 h 0.68±0.650.01±0.49*0.43±0.830.43±0.480.90±0.719 h 0.41±0.91-0.32±0.91*-0.03±0.69-0.01±0.791.28±0.52*
与模型组比较,布渣叶水提物高、中、低剂量组小鼠血清中T-Bil与D-Bil的含量显著降低(P<0.05),ALP、AST和ALT的活性显著降低(P<0.05),说明布渣叶水提物有显著的退黄与改善肝功能的作用。布渣叶水提物对模型小鼠血清T-Bil、D-Bil、ALP、AST和ALT的影响见表2。
4 讨论
表2 布渣叶水提物对模型小鼠血清T-Bil、D-Bil、ALP、AST和ALT的影响()Tab 2 Effects of water extract of M.paniculata of T-Bil,D-Bil,ALP,AST andALT in mice serum()
表2 布渣叶水提物对模型小鼠血清T-Bil、D-Bil、ALP、AST和ALT的影响()Tab 2 Effects of water extract of M.paniculata of T-Bil,D-Bil,ALP,AST andALT in mice serum()
与空白组比较:*P<0.05;与模型组比较:#P<0.05vs.blank group:*P<0.05;vs.model group:#P<0.05
组别空白组模型组布渣叶水提物高剂量组布渣叶水提物中剂量组布渣叶水提物低剂量组剂量/g·kg n--23.411.75.851313101013 T-Bil/umol·L-1 1.17±0.2658.58±49.36*9.61±23.41#12.62±24.24#1.38±1.38#D-Bil/μmol·L-1 0.12±0.0643.41±37.09*6.69±17.34#9.00±18.76#0.11±0.04#ALP/IU·L-1 204.9±40.1670.1±648.68*240.6±209.6#229.4±129.3#209.2±65.5#AST/IU·L-1 313.3±145.11321.4±706.6*438.1±523.4#567.9±574.4#291.4±115.1#ALT/IU·L-1 40.6±8.5640.2±461.6*175.1±340.4#133.6±176.6#64.6±59.3#
布渣叶为岭南习用草药,盛产于我国南方,特别是两广地区,资源极其丰富。本品味酸,性平,无毒,民间常采叶晒干泡水当茶饮,有清热解毒、消食积及解渴开胃的功效,常用于治疗感冒、咽喉痛、食滞腹胀、黄疸、蜈蚣咬伤等。布渣叶也是著名成药“广东凉茶”、“甘和茶”、“六和茶”、“十味溪黄草颗粒”、“王老吉”和“仙草爽凉茶”等的主要组成药物之一,其清热退黄作用广为认可。为更好印证其临床效果,本研究采用酵母致大鼠发热的影响实验和ANIT致黄疸型小鼠血清学指标变化实验,观察布渣叶水提物解热、退黄药理作用。
解热实验是用20%酵母液sc大鼠,通过机体生成及释放内致热原,最终导致体温调节中枢的体温调节点上移,从而使机体产热加强、散热降低、体温升高。在解热实验的预实验中发现,大鼠sc酵母混悬液后,体温是先降后升,约在4 h后出现较明显的体温升高现象,于9 h后体温曲线平缓并呈回落趋势,故笔者选取4~9 h作为观察大鼠体温变化的时间段。研究表明,布渣叶有比较好的解热作用,并能促使干酵母致大鼠体温波段变化维持在正常水平。
布渣叶水提物对ANIT所致黄疸模型小鼠血清中T-Bil与D-Bil的含量有非常明显的降低作用,同时能显著抑制ALP、AST和ALT的活性,说明布渣叶水提物的退黄与改善肝功能作用非常明显。
本研究初步证实,布渣叶水提物具有较好的解热和非常明显的退黄作用,但其有关作用机制有待进一步研究。笔者下一步将对其水提物的不同极性溶剂萃取分离部位作进一步药效学研究,以便找出药理活性明显的有效部位,从而可望获得活性更强的有效成分。
[1]广东省食品药品监督管理局.广东省中药材标准[S].广州:广东科学技术出版社,2004:66.
[2]曾聪彦,吴惠妃,郭展荣.布渣叶化学成分定性鉴别的实验研究[J].世界中西医结合杂志,2009,4(3):175.
[3]曾聪彦,梅全喜.布渣叶的药用历史及现代研究概述[J].中国药房,2008,19(增刊):25.
[4]田素英,曾聪彦,梅全喜,等.布渣叶的化学成分、药理作用与临床研究进展[J].亚太传统医药,2009,5(1):134.
[5]陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,1993:296.
[6]王永新.退黄合剂对药物诱发急性肝损伤小鼠保肝退黄作用的研究[J].中国实验方剂学杂志,2001,7(4):38.