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肠道细菌鉴定中血清交叉凝集现象的探讨

2010-03-28张启友

实验与检验医学 2010年6期
关键词:琼脂交叉生化

张启友

(上海市徐汇区华泾社区卫生服务中心检验科,上海 200231)

由非志贺菌沙门菌引起的急性感染性腹泻,已引起了大家的关注,但与志贺菌存在相同抗原的细菌却鲜见报道。本文报道了在检测临床腹泻病原菌中发现了一株与志贺菌呈交叉凝集的阴沟肠杆菌,现将检测结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 菌株来源 临床从腹泻病人大便中分离检测到的一株疑似志贺菌。

1.2 检测用仪器、培养基、及试剂 ATB细菌生化鉴定仪;SS琼脂、TSI培养基、葡萄糖培养基均由杭州天和微生物试剂公司生产;志贺诊断血清、沙门氏诊断血清均由成都生物制品研究所生产;细菌鉴定板条由生物梅里埃公司生产,药敏纸片由杭州微生物试剂有限公司生产;上述培养基试剂均在有效期内用。

1.3 方法 划线接种于SS琼脂培养,挑取可疑菌落转种于TSI琼脂及葡萄糖半固体培养后,进行进一步生化试验、血清学凝集试验及药物敏感试验。

2 结果

2.1 生物学特性 在SS琼脂平板上经培养后,菌落形态呈中等大小、圆形、半透明、表面湿润光滑;在TSI琼脂斜面呈红色、底层黄色、不产气、H2S阴性;在葡萄糖半固体黄色、不产气、有动力;革兰染色镜检:革兰阴性小杆菌、无芽胞、无荚膜。

2.2 生化特性 API鉴定结果:ID32E V2.0;ODC-ADHLDC+URE-LARL-GAT+5KG-LIP-RP+BGLU-MAN+MAL+IND?BNAG-BGAL+GLU+SAC-LARA+DARL-aglu-aGAL+tre-RHA–INO-ADO-PLE-BGUR+CELSOR-aMAL-MNT-AspA-鉴定结果:阴沟肠杆菌,鉴定率id%=99.9%,符合率T=0.69不符合试验数=1。

2.3 血清学凝集试验 生理盐水对照:–,志贺四种多价血清:+,福氏多价血清+,福氏血清2型+,痢疾志贺血清3-7型:+,痢疾志贺氏 8-12型:+,宋内血清:+,沙门 A-F多价血清-。

3 讨论

表1 具有交叉抗原的相关细菌

3.1 志贺菌属是由符合肠杆菌科定义的无动力的细菌组成[1],其检验应严格按照国标中规定的生化鉴定试验,否则易得出错误的检验结果。该菌与志贺相近,革兰染色阴性杆菌,在鉴别培养基上菌落形态也相近,和志贺多种血清发生凝集,说明该株菌和志贺菌属有相关抗原。但ID32E生化鉴定结果为阴沟肠杆菌,分解葡萄糖,有动力,即可排除志贺菌属。而肠杆菌科细菌间存在很多血清交叉反应[2],为此,在临床检测病原菌时,不但诊断血清凝集试验相符,而且生化反应也要符合才可作出正确诊断。

在日常鉴定肠道细菌感染中,不仅肠杆菌会和志贺氏菌会产生交叉抗原,其他一些肠道菌也会相互之间存在交叉抗原。由于肠道菌的一些特殊菌株或者是交叉抗原的存在,导致会产生一些不正确的鉴定结果,有许多需要注意的问题。

不少细菌虽然在选择性培养基上会出现和目标菌株相似的形态,但不是目标菌,如一些肠杆菌科的细菌在SS平板上的生长形态和志贺菌,沙门菌极为相似,在KIA上也出现相似的结果,而且血清凝集试验还会出现多种或单一血清凝集现象,如果不做生化鉴定,仅靠形态和血清凝集就很容易出现误报的情况。

本人根据国内多人的报道对会产生误报情况的肠道细菌进行了归纳:见表1。

仅从个人归纳的这些报道即可看出,肠道菌的血清交叉凝集现象是比较多见的,所以在日常鉴定中一定要注意,在日常工作中对于肠道病原菌的报告一定要认真仔细,要严格按照鉴定程序进行,不可省略步骤,或者做先入为主的经验性判定,生化反应是鉴定肠道细菌不可缺少的步骤,血清鉴定结论必须有生化结果支持,而不能只通过形态和血清凝集试验形成结论。对于可疑的凝集情况,当生化结果和血清凝集都不能确定结果,甚至要通过PCR确定细菌种类。

[1]徐建国等译.临床微生物学手册[M].北京:科学出版社,2005:656.

[2]李新文,金健潮,曹春远,等.与痢疾志贺菌8型交叉凝集的029:KEIEC的分离鉴定[J].疾病监测,2003,18(9):338-339.

[3]郭维植,程法稷,林成水,等.能与大肠杆菌O157(H7)抗血清交叉凝集的5种细菌的分离和鉴定[J].海峡预防医学杂志,2000,16(4):4-6.

[4]顿玉慧,刘飞兰,徐建设,等.一株与沙门菌F群交叉凝集的阴沟肠杆菌[J].中国卫生检验杂志,2007,17(8):1492-1493.

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