常见的风湿性疾病患者血中黏膜相关上皮趋化性细胞因子水平的变化及意义

张艳莉，蒋莉，张晓莉，郭韵，孙玥，张燕，王晓非

（中国医科大学 附属盛京医院风湿免疫科，沈阳 110004）

常见的风湿性疾病患者血中黏膜相关上皮趋化性细胞因子水平的变化及意义

张艳莉，蒋莉，张晓莉，郭韵，孙玥，张燕，王晓非

（中国医科大学 附属盛京医院风湿免疫科，沈阳 110004）

目的 通过检测几种常见的风湿性疾病患者血中黏膜相关上皮趋化性细胞因子（CCL28）的水平变化，探讨其水平变化在风湿性疾病中的作用及其与临床相关指标的关系。方法 采用酶联免疫吸附试验对系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、干燥综合征、强直性脊柱炎患者及健康对照者血中的CCL28进行测定。结果 风湿性疾病患者血中的CCL28明显高于健康对照者；风湿性疾病患者血中CCL28的水平变化与各种疾病活动性指标明显相关。结论 CCL28可能参与了风湿性疾病的发病过程，且在一定程度上反映疾病的严重程度，阻断CCL28及其受体的相互作用，可能成为风湿性疾病治疗的有效方法之一。

风湿性疾病；黏膜相关上皮趋化性细胞因子；自身免疫性疾病

风湿性疾病发病机制的研究一直是一个重要的课题，T、B淋巴细胞及相关细胞因子的作用日益成为该研究的重要目标之一。近年来趋化因子及其受体在自身免疫病中的作用逐渐受到人们的重视，而黏膜相关上皮趋化性细胞因子（mucosa-associated epithelial chemokine，MEC/CCL28）是新近发现的趋化性细胞因子家族CC类中的成员之一。有研究表明，在黏膜免疫及某些肿瘤的免疫中CCL28发挥着重要作用［1］，因而推测其可能在风湿性疾病的发病中起到一定的作用。本研究检测了几种常见的风湿性疾病患者及正常人血清中CCL28水平的变化，同时分析了风湿性疾病患者中CCL28与相关临床指标的关系，从而探讨其在风湿性疾病发病过程中的作用。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选择于2009年7月至2010年2月在中国医科大学附属盛京医院风湿免疫科住院的未经治疗的风湿性疾病患者66例，其中系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）22例，符合 1997年美国风湿病学会修订的SLE诊断标准；类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）18例，符合 1987年美国风湿病学会分类标准；干燥综合征（Sjgren’s syndrome，SS）16例，符合2002年SS国际分类诊断标准；强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）10例，符合1984年修订的纽约标准；男11例，女55例，平均年龄（43±17）岁。全部患者入院前4周均未应用糖皮质激素及免疫抑制剂，并排除其他免疫性疾病及感染性疾病。选择健康对照者15例，为来自我院体检中心的健康体检者，其中男3例，女12例，平均年龄（46±17）岁。两组在年龄及性别构成上无统计学差异。

1.2 方法

清晨空腹采血3ml，离心后取上清，置PC管中-20℃保存，全部标本一次性检测。CCL28的测定采用酶联免疫吸附试验，试剂盒由美国RayBiotech公司提供，操作严格按照试剂盒说明书的要求进行操作。各种风湿性疾病活动指标的检测由我院检验科协助完成，异常判定均参考同期该项检查的正常值。同时收集整理患者其他临床资料。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 各组风湿性疾病患者及健康对照者血中CCL28水平

SLE、RA、SS、AS患者及健康对照者血中CCL28水平分别为（342.44±107.36）ng/ml、（423.22±156.22）ng/ml、（402.98±243.19）ng/ml、（314.09±99.28）ng/ml、（222.83±69.77）ng/ml，各组风湿性疾病患者与健康对照者比较差异均有统计学意义（P<0.05）。

2.2 各组风湿性疾病患者血中CCL28水平及相关指标的相关性分析

SLE组CCL28水平与C3呈明显负相关（r=-0.505，P<0.05），与 IgG、SLEDAI评分呈明显正相关（r=0.425，P<0.05；r=0.703，P<0.01），与红细胞沉降率、IgA、γ球蛋白、类风湿因子无明显相关。RA组CCL28水平与红细胞沉降率、类风湿因子呈明显正相关 （r=0.518，P<0.05；r=0.475，P<0.05），与IgG、IgA、γ球蛋白无明显相关。SS组CCL28水平与IgA、γ球蛋白呈显著正相关（r=0.63，P<0.01；r=0.725，P<0.01），与红细胞沉降率、IgG、类风湿因子无明显相关。AS组CCL28水平与红细胞沉降率、IgA水平呈明显正相关（r=0.79，P<0.01；r=0.622，P<0.05），与IgG、γ球蛋白、类风湿因子无明显相关。

3 讨论

MEC/CCL28是2000年研究人员发现的一种新的趋化性细胞因子，按照新提出的趋化性细胞因子配体，将其定名为CCL28［2］。其受体为CCR10和CCR3［3］，CCL28通过结合CCR10吸引皮肤淋巴细胞抗原阳性的记忆T细胞和IgA抗体分泌细胞［4］；通过结合CCR3吸引人外周血中的嗜酸性粒细胞［5］。CCL28与相应受体结合后，可介导血循环中的CD4+T细胞、CD8+T细胞、IgA抗体分泌细胞等免疫活性细胞归巢迁徙至相关组织［1］，因而推测其可能参与了风湿性疾病的发病过程，但在国内风湿性疾病研究中报告甚少。

本研究以患有不同类型风湿性疾病的患者作为研究对象，发现在几种常见的风湿性疾病患者血中CCL28水平明显升高，并且分别与各疾病活动指标相关，证明CCL28在风湿性疾病中具有重要作用。SLE为多系统、多脏器受累的自身免疫性疾病，患者体内T、B淋巴细胞数量及功能异常，导致多种自身抗体形成，相应细胞因子释放增加［6］，进一步引起免疫细胞功能紊乱。已有研究表明CCL28可吸引血液循环中的CD4+T细胞［2］，进而导致T细胞的功能异常以致新抗原不断出现，使自身免疫持续存在，CCL28可能通过上述机制参与SLE的发病。本研究证明SLE患者体内CCL28增加，并与反映SLE病情活动的指标C3、IgG、SLEDAI评分具有相关性，这表明了CCL28在SLE的发病中具有一定的作用，且与疾病的严重程度相关。RA是以关节滑膜炎为主要特征的慢性进行性的自身免疫性疾病，在RA慢性滑膜炎的发生过程中，大量炎性细胞从外周血迁移、聚集在关节滑膜组织，从而造成滑膜组织破坏，趋化因子在炎性细胞迁移、浸润过程中则起了重要作用。有研究发现RA患者的外周血及滑膜液中均可表达CCR3［7］，CCL28可通过与其受体CCR3结合参与RA的滑膜破坏。在检测中我们发现RA患者血中CCL28水平明显高于健康对照者，并与该组患者病情活动指标红细胞沉降率、类风湿因子的变化相关。因此认为CCL28在关节滑膜损伤中具有重要意义，且在一定程度上反映了疾病的严重程度。SS是一种主要累及外分泌腺体的慢性炎性自身免疫病，其典型病理特征是外分泌腺如唇腺、泪腺导管周围淋巴细胞为主的单个核细胞浸润灶。研究表明，浸润的单个核细胞多为CD4+T淋巴细胞，尤其以CD4+的激活的记忆型T淋巴细胞为主［8］，SS患者唇腺浸润的淋巴细胞表达趋化因子，提示移行而来的淋巴细胞被激活并表达趋化因子，从而起到促进病情发展的作用［9］。本研究检测结果同样证明了SS患者体内高CCL28水平的存在，且与IgA、γ球蛋白的变化密切相关，因而推测其可能参与了本病的发病且与黏膜受损有关。AS是以累及脊柱和骶髂关节为特征的慢性炎症性风湿性疾病。近年来研究发现TNF-α及CD4+T细胞在AS发病机制中起重要作用［10，11］，TNF-α 并不是单独在风湿性疾病中发挥作用，而是与其他细胞因子/趋化因子一起共同组成一个复杂的免疫网络，通过网络中分子的相互作用，在AS等风湿性疾病的发病机制中起关键作用。CCL28可能通过上述机制参与发病，本研究证明了AS患者血中CCL28增加并与患者血中红细胞沉降率、IgA呈正相关关系，提示疾病活动期患者体内淋巴细胞激活后免疫应答反应的存在，从而促进了关节炎的发生。

风湿性疾病患者的发病多与淋巴细胞活化有关，活化后的T细胞可以分泌大量致炎性细胞因子造成组织损伤，同时又激活B淋巴细胞产生大量抗体。而趋化性细胞因子及受体相互作用可能是风湿性疾病发病的一个重要环节，因而阻断这一环节就有可能控制病情发展，为风湿性疾病的治疗寻找新的途径。

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（编辑 陈 姜，英文编辑 陈 姜）

Serum Level of Mucosa-associated Epithelial Chemokine in Patients with Common Types of Rheumatic Diseases

ZHANGYan-li，JIANGLi，ZHANGXiao-li，GUOYun，SUNYue，ZHANGYan，WANGXiao-fei
（Department of Rheumatism and Immunology，Shengjing Hospital，China Medical University，Shenyang 110004，China）

ObjectiveTo investigate the serum level of mucosa-associated epithelial chemokine （MEC/CCL28） in common types of rheumatic diseases，and to explore its relationship with clinical features.MethodsThe serum level of CCL28was determined by ELISAin patients with rheumatic diseases including systematic lupus erythematosus，rheumatoid arthritis，Sjgren’s syndrome，and ankylosing spondylitis，and normal controls.ResultsThe serum level of CCL28was significantly higher in patients with rheumatic diseases than in normal controls.In patients with rheumatic diseases，the serum level of CCL28was obviously correlated with disease activity index.ConclusionCCL28may be involved in the pathogenesis of rheumatic diseases and reflect the degree of the diseases to a certain extent.Thus，blocking the interaction between CCL28and its receptor may be one of the available therapies for rheumatic diseases.

rheumatic disease；mucosa-associated epithelial chemokine；autoimmune disease

R593.2

A

0258-4646（2010）11-0950-03

张艳莉（1983-），女，硕士研究生.

王晓非，E-mail：cpd1986@sina.com

2010-05-19