扶芳藤芳香类成分

廖矛川,杨颖达,杨光忠,梅之南

(中南民族大学药学院,武汉430074)

扶芳藤为卫矛科卫矛属植物爬行卫矛Euonym us fortunei(tu rcz.)hand.-M azz.冬青卫矛Euonym us japon icusL.或无柄卫矛Euonym us subsesilis Sp rague的干燥地上部分,主要分布于我国广西、贵州、云南等省及自治区.在广西,扶芳藤作为少数民族民间药材(又名:岩青藤、千斤藤、土杜仲、换骨筋等),具有益气血、补肝肾、舒筋活络等功效.用于治疗气血虚弱,腰肌劳损,风湿痹痛,跌打骨折,创伤出血,咯血,月经不调等症[1].至今为止,国内外关于扶芳藤化学成分的研究报道不多,现有的报道主要是从扶芳藤的茎叶中分离得到萜类、黄酮等成分[2-4].为阐明其药理作用的物质基础,为进一步开发利用传统民族药材提供理论依据,笔者对其化学成分进行了系统研究.从扶芳藤藤茎的氯仿提取物中得到5个化合物,利用系统溶剂提取法、正相和反相硅胶柱色谱法、制备HLPC法经进行分离和纯化,采用谱学技术(NM R谱,M S,UV等)进行结构鉴定.

1 仪器与材料

1.1 仪器

德国B rukerAM-400,AM-500型核磁共振波谱仪(TM S内标);VG A u to Spec-3000型质谱仪(E I-M S);美国D ionex公司U ltim ate-3000制备型高效液相色谱仪;三用紫外分析仪(ZF-6)上海嘉鹏科技有限公司.

1.2 试剂

薄层色谱GF254、柱色谱硅胶(200-300目),青岛海浪硅胶干燥剂厂;ODS柱硅胶(120 A,50 μm),日本 YM C公司;HPLC制备柱(Co sm o sil 5C18-M S-II柱,10mm×250mm×5μm).实验所用色谱纯为美国TED IA公司生产,其余试剂均为分析纯,由天津博迪有限公司生产.

实验所用扶芳藤产自广西壮族自治区,经中南民族大学药学院万定荣教授鉴定为卫矛科卫矛属植物爬行卫矛Euonym us fortunei(tu rcz.)hand.-M azz.的干燥地上部分,包括藤茎和茎叶.

2 方法与结果

2.1 提取与分离

取扶芳藤7.5 kg粉碎,用95%乙醇浸泡提取2次,75%乙醇提取1次,合并提取液,减压浓缩至无醇味.将乙醇提取物再依次用石油醚、氯仿加热回流提取,减压蒸干,得到石油醚、氯仿提取物.取氯仿提取物(149 g)进行硅胶柱色谱,以环己烷-乙酸乙酯系统进行梯度洗脱(95∶5-0∶1),TLC检测合并相同流分,经反复正相、反相硅胶柱层析及HPLC分离纯化,得到化合物1(15m g)、化合物2(22m g)、化合物3(17m g)、化合物4(16m g)、化合物5(97m g).

2.2 结构鉴定

化合物 1.白色粉末(甲醇);分子式为C6H 5NO3,E I-M Sm/z:123[M]+,105,78,51;1HNM R(CD 3OD,400M H z)δ:9.12(1H,s,H-2),8.72(1H,d,J=4.0 H z,H-4),8.40(1H,d,J=8.0 H z,H-6),7.58(1H,dd,J=8.0/4.5 H z,H-5);13C-NM R (CD 3OD,100 M H z)δ:175.5(—COOH),150.6(C-2),148.3(C-6),136.2(C-4),126.0(C-3),122.2(C-5).综合分析并结合文献[5-7],化台物1鉴定为:3-吡啶甲酸.

化合物2.无色针状晶体(甲醇);FeC l3试剂显兰色;UV(λmax,nm):223(4.09),271(3.85);1HNM R(CD 3OD,400M H z)δ:7.32(1H,b rs,H-2,6),3.88(3H,s,2个—CH3);13C-NM R(CD 3OD,125M H z) δ:170.1(—COOH),148.9(C-3,5),141.9(C-4),122.0(C-2),108.5(C-6),56.9(—OCH3),该波谱数据与文献[8-9]一致.综合以上数据确定化合物2为4-羟基3,5-二甲氧基苯甲酸(丁香酸).

化合物3.无色无定形粉末(甲醇).FeC13反应呈阳性,提示结构中含酚羟基.13C-NM R谱显示1个羧基碳(170.4),另有4个碳信号,应为苯环上发生了对称取代,有2组2个碳的化学环境相同,2个未取代的芳碳.1H-NM R谱中均δH＞7,进一步确认了为带有酚羟基的苯环,初步推断为3,4,5-三羟基苯甲酸(没食子酸),与文献[10,11]中报道的3,4,5-三羟基苯甲酸(没食子酸)波谱数据一致.

波谱数据:1H-NM R(CD 3OD,400 M H z)δ:7.06(2H,s,H-2,6);13C-NM R(CD 3OD,125M H z) δ:170.4(—COOH),146.4(C-3,5),139.6(C-4),122.(C-1),110.3(C-2,6).

化合物4.无色针状晶体(甲醇);FeC l3试剂显兰色;1H-NM R(CD 3OD,400M H z)δ:7.32(1H,s,H-2),7.31(1H,d,J=8.0,H-6),6.81(1H,d,J=7.6,H-5);13C-NM R(CD 3OD,100M H z)δ:170.2(—COOH),150.4(C-4),145.6(C-3),123.8(C-6),123.0(C-1),117.6(C-5),114.4(C-2).核磁共振数据与文献[12,13]报道的一致,确定化合物4为3,4-二羟基苯甲酸(原儿茶酸).

化合物5.无色针状晶体(甲醇).质谱给出分子量为418.13C-NM R结合DEPT谱显示δ:148.9(2个季碳),135.8,132.7共4个季碳,推出苯环的四取代模式.由于1H-NM R显示δ:6.55(2H,s)为2个孤立芳H信号,3.74(2×3H,s)为2个与苯环相连的—OCH3,从而推断有3,5-二甲氧基,4-羟基片段.此外,DEPT谱显示1个—CH2和3个—CH信号.将推断出的片段综合与分子量比较,提示该化合物为一对称结构,初步推断为双四氢呋喃木脂素结构.其中2个芳基的空间结构通过计算偶合常数H-7,7′:4.61(d,J=4.1),H-9e,9e′:4.16(dd,J=8.9/6.5),H-9a,9a′:3.77(dd,J=9.1/4.1),和文献[14]比较推出该对称芳基为反式二横键的结构,见图1.综上,该化合物的波谱数据与文献[15]一致,确定为丁香脂素.

波谱数据:E I-M Sm/z:418[M]+;1H-NM R(CD 3OD,500M H z) δ:6.55(2H,s,H-2,6,2′,6′),4.61(1H,d,J=4.1,H-7,7′),4.16(1H,dd,J=8.9/6.5,H-9e,9e′),3.77(1H,dd,J=9.1/4.1,H-9a,9a′,),3.74(2×3 H,s,3,5,3′,5′—OCH3),3.03(1H,m,H-8,8′);13C-NM R(CD 3OD,125M H z)δ:148.9(C-3,5,3′,5′),135.8(C-4,4′),132.7(C-1,1′),104.2(C-2,2′),87.3(C-7,7′),72.0(C-9,9′),56.5(—OCH3),55.2(C-8,8′).

3 结语

图1 化合物5结构式Fig.1 Chem ical structu re of com pound 5

通过对扶芳藤的系统分离,得到了5个芳香族酸酚性化合物,分别鉴定为:(1)3-吡啶甲酸,(2)4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酸/丁香酸,(3)3,4,5-三羟基苯甲酸/没食子酸,(4)3,4-二羟基苯甲酸/原儿茶酸,(5)丁香脂素.其中化合物1—3为首次从该植物中分离得到,该类化合物的发现为进一步研究该药物奠定了一定基础.

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