落新妇苷固体分散体的制备及理化鉴别

2010-01-30聂金媛徐孟文梁敏仪赖小平

中成药 2010年10期

何燕，聂金媛，徐孟文，梁敏仪，赖小平

(1.广州中医药大学，广东广州510006;2.广州医药工业研究院，广东广州510240)

落新妇苷(astilbin)是一种从传统中药土茯苓(Rhizoma Smilacis Glabrae)中提取的二氢黄酮类化合物，为土茯苓的有效成分之一［1］。具有抑制辅酶A还原酶，抑制醛糖还原酶，保护肝脏，镇痛，抗水肿［2］等多种生物学活性，并且具有选择性免疫抑制作用［3］。可以作为一种新的免疫抑制剂用于免疫相关疾病的治疗。但落新妇苷为水难溶性药物(溶解度为0.1 mg/mL，几乎不溶或不溶)，不易被机体吸收，在临床应用上受到了一定限制。固体分散体技术是近年来药剂学研究中的热点，不仅可以改善难溶性药物的溶出、提高药物的生物利用度，还改善物料性质和增加药物的稳定性［4-5］。本实验制备了落新妇苷固体分散体，并对其进行物相鉴别［6］。

1 材料与仪器

差示扫描量热仪(DSC 204，德国NETZSCH公司)，X射线衍射仪(D/max-3A，德国NETZSCH公司)，智能溶出试验仪(ZRS-4，天津无线电厂)，双光束紫外可见分光光度计(UV-1901，北京普析通用仪器有限责任公司)，图像分析系统(BX41电子显微镜，日本Olympus公司;DP71采集头，日本Olympus公司;IPP图像采集分析软件，Media Cybernetics公司)。

落新妇苷(自制，含量＞98%);聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30(ISP公司)，吐温80(化学纯，广州化学试剂厂 )，正辛醇(分析纯，广州化学试剂厂)。

2 实验方法

2.1 固体分散体的制备采用溶剂法，按质量比1∶1.5∶3精确称量落新妇苷和吐温80、PVPK30。先将落新妇苷和吐温80混合后，加入95%乙醇溶解，再与PVPK30乙醇溶液混合均匀，置于蒸发皿中，加热挥干溶剂，析出物于真空干燥器中干燥24 h，取出，研磨，过60目筛，制得落新妇苷与PVPK30固体分散体，置干燥器中保存备用。

2.2 溶解度实验取自制固体分散体适量于玻璃小瓶中，分别加入水，使之呈过饱和状态。温度保持(25±1)℃，搅拌约24 h使达溶解平衡，将饱和溶液用0.22 μm微孔滤膜过滤，取续滤液进行UV法测定，计算固体分散体中落新妇苷在水中的平衡溶解度。

2.3 表观油/水分配系数的测定采用正辛醇-水经典摇瓶法来测定落新妇苷及落新妇苷固体分散体的表观油水分配系数。取pH 2.2、4.5、6.8、7.4缓冲溶液5 mL与落新妇苷正辛醇贮备溶液5 mL混合，置于锥形瓶中。在(25±1)℃，150 r/min恒温振荡24 h，离心分离两相。取油相，当稀释2倍后，用紫外分光度法测定，计算的Cw。

2.4 溶出度试验按《中国药典》2005年版相关规定，采用溶出度测定法(中国药典2005版二部附录XD小杯法)。取适量SD样品，置小杯中，释放介质为蒸馏水，体积为100 mL，转速(100±2)r/min，水浴温度(37 ±1)℃，分别于15、30、45、60、90、120 min取样2 mL，过0.22 μm微孔滤膜，同时补充等体积同温新鲜介质，取续滤液UV法测定落新妇苷的含量，计算累积溶出率。

2.5 固体分散体的物相鉴别

2.5.1 显微镜法将原药粉末和落新妇苷固体分散体用甘油分散于载玻片上，盖上盖玻片后，置于显微镜下观察。

2.5.2 X-射线衍射取落新妇苷、吐温 80-PVPk30、物理混合物、固体分散体，进行X-射线衍射分析。工作条件:铜靶 Kα1，电压35 kV;电流 25 mA;发散、散射和接受狭缝分别为 1°、1°、0.3 mm;2θ范围:3°～60°;检测依据:转靶多晶体 X-射线衍射方法通则JY/T009-1996。

2.5.3 差示扫描量热法(DSC) 取落新妇苷、吐温80-PVPk30、物理混合物、固体分散体，进行DSC分析。工作条件:气氛为N2，20 mL/min;扫描程序，从室温以10℃/min升温至23℃，记录升温曲线。

3 结果与讨论

3.1 溶解度实验落新妇苷和固体分散体中落新妇苷的溶解度分别为0.198 mg/mL、6.28 mg/mL。结果显示固体分散体中落新妇苷的溶解度有显著提高。

3.2 表观油/水分配系数的测定见图1，可知固体分散体的油/水分配系数与落新妇苷相比有显著性差异，说明将落新妇苷制备成固体分散体后，即提高了药物的溶解度和溶出速度，同时又提高了药物分子的亲脂性，提示将落新妇苷制备成固体分散体可以促进药物的体内吸收。

图1 落新妇苷及落新妇苷固体分散体在不同pH溶液的表观油水分配系数图

3.3 溶出度试验见图2，结果显示落新妇苷原药1 h时累积溶出仍不到45%，而落新妇苷固体分散体1 h时的累积溶出可达86%，表明落新妇苷固体分散体的溶出速率比原药有显著性提高。

图2 固体分散体的累积溶出曲线图

3.4 固体分散体的物相鉴别

3.4.1 显微镜法结果显示原药材呈方状晶体，而固体分散体中的落新妇苷以微晶态存在，双折射现象较弱，见图3～4。

图3 落新妇苷显微镜图像(×400)

图4 固体分散体显微镜图像(×400)

3.4.2 X-射线衍射结果见图5～8，可见落新妇苷在7°～44°之间有多个强的结晶衍射峰，吐温80-PVPk30在11°和20°处有2个强的衍射峰;物理混合物的谱线中落新妇苷和吐温80-PVPk30的各特征峰均一定程度上减弱;而在固体分散体谱线中，落新妇苷在7°～22°之间特征峰明显减弱或部分消失，在23°～44°之间特征峰明显消失，说明落新妇苷在吐温80-PVPk30固体分散体中部分以分子状态分散，部分以微晶状态分散。

图5 落新妇苷的X-射线衍射图

图6 Tween 80-PVPk30的X-射线衍射图

图7 物理混合物的X-射线衍射图

图8 固体分散体的X-射线衍射图

图9 落新妇苷DSC曲线图

3.4.3 差示扫描量热法(DSC)DSC曲线图结果见图9～12。可知吐温80-PVPk30的DSC曲线显示在62.3℃有一个吸热峰，落新妇苷有2处特征吸热峰(119.0℃，179.3℃)，物理混合物有2处特征吸热峰(68.5℃，168.4℃)，固体分散体有三处特征吸热峰(68.9℃，153.6℃，186.9℃)。固体分散体的DSC曲线图中显示，药物原来的吸热峰已经完全消失，但在附近均有较弱的吸热峰生成，说明落新妇苷在吐温80-PVPk30固体分散体中药物结晶减少。