西岗人参抗衰老作用研究
2009-04-25,,,,*
,, ,, *
(1.吉林省华康药业股份有限公司,吉林 敦化 133700;2.吉林省中医药科学院 中药研究所,吉林 长春 130021)
近年来,随着研究的深入,人参中微量元素锗的作用愈来愈受到人们的重视。日本学者浅井彦首先报道了人参根中含有比其他任何草药都多的微量元素锗。其后,卫永第[1]采用火药源质谱法对吉林产野山人参和园参根中含锗量进行了测定,证实野山人参中的锗含量较园参高出2~5倍。本文报告其抗衰老作用。
1 材料和方法
1.1 受试药品 西岗人参,系《响宇》牌吉林白山西岗人参(简称西岗人参,下同)采用吉林大学等加工技术精制而成,富含人参有效成份(人参皂苷、人参多糖、挥发油、多肽、无机元素等)及有机锗-132。
1.2 动物 昆明种雄性幼年小鼠,体重13~15g。成年小鼠,体重18~22g。雌雄兼用,以上动物均由吉林省中医药科学院动物饲养室提供。
1.3 试剂 苄胺盐酸盐为日本东京化成工业株式会社产品;超氧化物歧化酶为Sigma产品;5-羟色胺肌酐硫酸盐为日本和光纯药工业株式会社产品;盐酸多巴胺,重酒石酸去甲肾上腺素均为Sigma产品,其它试剂均为国产分析纯。
1.4 方法 单胺氧化酶-B(MAO-B)的制备和测定按王氏法[2]。超氧化物歧化酶SOD活性和脂褐质含量按文献[3-4]测定。丙二醛则按Asakawa法[5-6]测定。蛋白质,RNA和DNA的分离提取按Rawland法[7],蛋白质测定按Lowry法[8],DNA按Burton法[9]测定,RNA含量测定按Schjeide法[10],脑内各种单胺类介质含量测定按文献[11-12]方法。
2 实验结果
2.1 西岗人参对雄性幼年小鼠生长的影响 雄性幼年小鼠48只,随机分为体重相近的4组,于14 d内每天第1组以蒸馏水灌胃1次,第2,3,4组分别以普通园参1 g/kg,西岗人参1,0.5 g/kg灌胃。给药体积均为10 mL/kg(下同)。末次给药后1 h,称量体重。结果对照组体重增长为(9.92±3.34)g;其余3组分别为(9.67±3.28)g,(9.75±2.96)g,(10.0±2.41)g。表明西岗人参和普通园参对幼年小鼠的体重增长无明显影响。
2.2 西岗人参对雄性幼年小鼠前列腺—贮精囊及睾丸重量的影响 将实验2.1中各组小鼠称重后,断头处死,摘取前列腺—贮精囊和睾丸,称重。结果对照组,普通园参和西岗人参2个剂量组前列腺—贮精囊重量分别为(16.3±5.05),(19.5±5.69),(25.1±7.95),(24.0±7.19)mg/10g体重;睾丸重量分别为(42.9±7.89),(48.0±12.12),(49.7±7.96),(48.5±8.40)rng/10 g体重。表明西岗人参对幼年雄性小鼠前列腺—贮精囊和睾丸重量均有明显增加作用。在1 g/kg剂量下,普通园参对小鼠前列腺—贮精囊和睾丸重量有增加的趋势,但无统计学差异。
2.3 西岗人参对小鼠肝脏蛋白质、RNA和DNA含量的影响 将实验2.1中各组小鼠断头处死后(取肝、脑和心脏组织,液氮固定,置于低温冰箱中备用)。取肝组织,测定蛋白质、RNA和DNA含量,见表1。
表1 对小鼠肝脏蛋白质、RNA、DNA含量的影响
由表1可见,在所用剂量下,西岗人参和普通园参对小鼠肝组织中蛋白质、RNA和DNA的含量均无明显影响。
2.4 西岗人参对小鼠肝和心脏组织中丙二醛和脂褐质含量的影响 取实验2.1中各组小鼠肝和心脏组织测丙二醛和脂褐质含量,见表2。
表2 对小鼠肝和心脏组织中丙二醛和脂褐质含量的影响
2.5 西岗人参对小鼠脑组织中单胺类神经介质的影响 取实验2.1中各组小鼠脑组织,按前述方法测定各种单胺类神经介质、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NA)和多巴胺(DA)。结果表明,西岗人参和普通园参对小鼠脑内5-HT和DA含量具有显著增加作用,但对NA含量却无明显影响,二者作用强度相近,见表3。
表3 对小鼠脑组织中单胺类神经介质的影响
2.6 西岗人参对小鼠肝和脑组织中超氧化物歧化酶和单胺氧化酶-B活性的影响 取实验2.1中小鼠肝和脑组织测定SOD和MAO-B活性,见表4。
3 讨论
目前,对于人参是否具有促性激素样作用,多数学者已给予了肯定的证明。且已证明人参有促性激素样作用的主要有效成分为人参皂甙[13]。其机制可能是人参通过某种神经—体液调节机制,使垂体前叶的促性激素释放增加,此推论主要依据垂体切除可以取消人参的促性激素样作用,本实验结果进一步证实了上述学者的研究,即西岗人参对雄性幼年小鼠前列腺—贮精囊和睾丸重量具有增加作用。
表4 对小鼠肝和脑组织中超氧化物歧化酶和单胺氧化酶-B活性的影响
本实验结果证明,西岗人参能抑制小鼠肝中丙二醛的生成,并对心脏组织中脂褐质生成有明显抑制作用。还观察到西岗人参可显著增强小鼠体内防御自由基(即清除自由基)酶系中的重要酶(超氧化物歧化酶)的活性。提示西岗人参可通过增强超氧化物歧化酶活性来减少丙二醛和脂褐质的生成,从而清除自由基对机体损伤,延缓衰老和疾病的发生[14]。
灵长类(包括人类)和啮齿类动物脑和肝组织中,MAO-B活性随年龄增长而升高[15]。西岗人参对小鼠脑组织MAO-B活性具有显著的抑制作用。提示西岗人参可能通过对脑内MAO-B活性的抑制作用达到延缓衰老的效果。现已证实,激素和神经递质共同作用于下丘脑的神经细胞,从而调节全身各器官的生理活动。同时,脑内单胺类递质分泌的多少与老年性疾病密切相关。西岗人参可否用于防治与脑内单胺类递质代谢水平有关的老年性疾病(如抑郁症和帕金森氏病),从本文结果看来,西岗人参可使小鼠脑内5-HT、DA含量明显增加,提示西岗人参可望用于防治上述老年性疾病。
[1]卫永第.采用火药源质谱对野山参和园参中锗含量的初步研究[J].人参研究,1991(1):45-47.
[2]王本祥.次黄嘌呤对单胺氧化酶抑制作用的研究[J].药学学报,1989,24(8):573-574.
[3]蓝开蔚.超氧化物歧化酶活性测定-Py-rogallol-NBT比色法与化学发光法的比较[J].生物化学与生物物理进展,1988,15(2):138-140.
[4]范盘生.三七总皂甙、人参果总皂甙对老年大鼠心脑组织脂褐质及血清过氧化脂质含量的影响[J].中国药理学与毒理学杂志,1988,2(4):257-259.
[5]Asakawa T.et al.Thiobarbituric acid test for detecting lipid peroxide[J].Lipid,1979,14(4):401-403.
[6]金淑莉,王 岩,陈晓光.鹿茸胶囊对青年及老年小鼠丙二醛含量的影响[J].吉林中医药,2003,23(8):13-14.
[7]Rowland GF.Stimultaneous measurement of RNA,DNA and protein synthesis in mouse tumot and reticuloendothelial tissue slices using glucose-6-3H as a common precursoy[J].Cancer Res,1969,29(1):391.
[8]LowryOH,el al.Protein measurement with the folin phenol reagent[J].JBiochem,1951,193:263-265.
[9]Burton KA.A study the condition and mechanism of the diphenytamine reaction for the colofimetric estimation of deoxyribonudeic acid[J].Anal Biochem,1956,62:315-318.
[10]Sehieide OA.Microestimation of RNA by the cupric on catalyed ordnol reaction[J].Anal Biochem,1969,27(31):473-475.
[11]徐淑云.药理实验方法学[M].2版.北京:人民卫生出版社,1991:1216.
[12]张 博,王 迪.黄芪六一保健茶抗衰老作用研究[J].长春中医药大学学报,2007,23(2):16.
[13]王本祥.人参的研究[M].天津:天津科学技术出版社,1985:142.
[14]杨丽华,马 春.中医衰老机理探析[J].吉林中医药,2008,28(12):21-22.
[15]张桂英,王宝贵,赵林伊,等.柞蚕蛹虫草对老龄大鼠单胺氧化酶活性和脂褐质及羟脯氨酸含量的影响[J].吉林大学学报:医学版,2004,30(5):527-529.