马铃薯试管苗快繁方法改进试验

姚志刚 刘尚前

（河北北方学院农林科技学院，河北宣化，075131）

马铃薯试管苗快繁方法改进试验

姚志刚 刘尚前

（河北北方学院农林科技学院，河北宣化，075131）

以马铃薯品种大西洋、无花的试管苗为材料，将剪去根部和顶芽的多茎节切段，直接横放，接种于含有不同激素及配比的培养基中培养。研究结果表明，MS培养基附加1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L NAA，可使得每个腋芽快速萌发并生根、成苗，大大提高效率。

马铃薯 多茎节切段 不同激素 快速成苗

马铃薯是重要的粮食兼蔬菜作物，由于病毒感染而引起的退化导致其产量大幅度下降和品质变劣，曾一度成为世界性难题。利用马铃薯茎尖脱毒技术生产无病毒种薯，成为防治马铃薯退化的主要措施[1]。脱毒苗的继代扩繁是生产脱毒种薯的重要环节[2～3]，品种本身的特性、环境条件、培养基的成分、切繁方法[4]等因子影响马铃薯脱毒苗切繁数量和质量。常用的切繁方法是将带有一个叶片的单茎段接种于培养基中培养成苗，不仅切繁速度慢，而且腋芽暴露时间长、容易污染，效率低。本研究用价格低廉的罐头瓶和自来水，将剪去根部和顶芽的多茎节切段直接横放，接种于含有不同浓度激素及不同配比的培养基中培养，找到一种最适宜的培养基配方，使得每个腋芽快速萌发并生根、成苗，从而大大降低了成本，提高了效率，以期为工厂化生产优质、低成本的马铃薯试管苗提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

马铃薯品种大西洋、无花的试管苗，培养基、激素均购自市场。

1.2 试验方法

①培养基种类 A：MS；B：MS＋6-BA 0.5 mg/L＋NAA 0.5 mg/L；C：MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA 1.0 mg/L； D：MS＋6-BA 1.5 mg/L＋NAA 0.5 mg/L；E：MS＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 1.0 mg/L。

②剪切方法 为了保证试验的一致性，试验材料均采用含有5个叶片的试管苗作为基础苗，剪去根部和顶芽。分别按以下方式剪切：a.按照传统方法，即剪成单茎节切段，然后接种于培养基中。b.将此多茎节切段直接横放于培养基中。每个处理重复3次，每瓶5根苗。

③培养条件 自来水配置培养基，调节pH值为5.8，然后高压灭菌，培养室内温度为22～25℃，每天光照12 h，光照强度为2 500～3 000 lx。按照同样的方法继代扩繁2次，调查切繁后最早生根时间，以及切繁20 d以后平均每节的条数、每瓶萌发的腋芽数以及平均株高等，并进行两种切繁方法的效率比较。

2 结果与分析

2.1 不同剪切方式、不同培养基对马铃薯试管苗生长发育的影响

从试验结果（表1）可以看出，培养基中激素的种类和浓度不同，马铃薯试管苗的长势、长相不同。不加任何激素即MS培养基，马铃薯试管苗未萌发；加了激素的培养基，马铃薯试管苗株高较高，叶片数多，生根快、根的条数多，苗的长势较好；马铃薯腋芽的萌发与6-BA和NAA的浓度有关，随着二者浓度的增加，萌发的腋芽数也越多，但是浓度超过一定的界限，则萌发腋芽数目减少。试验结果表明，6-BA和NAA的浓度都为1.0 mg/L时，多茎段每个腋芽都能萌发，生根快、植株长得快、苗长势好。

表1 不同剪切方式不同培养基对马铃薯试管苗生长发育的影响

表2 不同剪切方式的剪切次数及成苗数

2.2 不同剪切方式效率比较

基础苗以5根计算，去掉根部和顶部茎芽，由表2可以看出，马铃薯多茎节切繁方法与传统方式相比具有许多优点，首先，剪切次数大大降低，马铃薯多茎节剪切次数是传统的1/3，而所扩繁的苗数相同，苗的长势也较好，在质量上优于传统方法，这样就大大缩短了接种时间，减少了用工，提高了工作效率。其次，传统剪切方法剪切时由于腋芽在操作台上暴露时间长，增加了人为污染的机会，而多茎节剪切方法省去了剪切腋芽这道工序，大大降低了污染的机会。另外，本试验用价格低廉的罐头瓶和自来水，也大大降低了成本。因此，利用多茎节剪切技术可以为规模化生产脱毒马铃薯提供廉价、健壮的试管苗，产生较好的经济效益。

3 小结与讨论

试管苗的继代扩繁是生产优质马铃薯脱毒苗的重要环节，而培养基的成分[5]是决定这一环节的重要因素，关于马铃薯使用激素对产量和质量的影响也有些报道[6～7]，本试验结果表明，MS培养基附加1.0 mg/L 6-BA和1.0 mg/L的NAA，可使每个腋芽快速萌发并生根、成苗，大大降低了成本，提高效率。

试验剪去了顶部腋芽，目的是去掉顶端优势，使茎段中的腋芽在激素的诱导下萌发并生根成苗，如果不剪去顶部腋芽，则多茎节切段腋芽萌发率下降，成苗率也下降。而剪去的顶部腋芽接种于培养基中，仍然能够成苗，这样既增加了成苗数，又防止了材料的浪费。

本试验是用2个品种的马铃薯试管苗进行的，多茎节剪切方法用于种薯生产后，是否影响种薯的产量和质量有待于进一步研究。

[1]刘卫平.马铃薯试管苗新的繁殖方法研究[J].中国马铃薯，2000，13（3）：141-142.

[2]祁彦丰，王萃莲，魏固宁，等.用三种不同水配制培养基对马铃薯脱毒试管苗的影响[J].中国马铃薯，2000，13（3）：173-174.

[3]温启录，杜金友，秦恩来.马铃薯脱毒苗切繁技术[J].马铃薯杂志，1998，11（3）：169-172.

[4]齐恩芳，仲乃琴，王一航.不同培养方式和成分对马铃薯脱毒试管苗生长的影响[J].中国马铃薯，2000（1）：18-19.

[5]林长玉，李东明，张志龙.不同生长素在马铃薯上应用效果的研究[J].中国马铃薯，2000，13（3）：137.

[6]郭洪云，宋新玲，陈滨波，等.NAA和2，4-D对脱毒马铃薯扦插苗生长及产量的影响[J].马铃薯杂志，1998，11（2）：74-76.

[7]林从发，魏泽平，罗仰奋，等.马铃薯脱毒试管苗繁育及脱毒种薯生产技术[J].中国马铃薯，2000，13（4）：225-226.

Primary Study on Rapid Reproduction Method of Tube Test Plantlets in Potato

YAO Zhigang,LIU Shangqian
(Department of Agronomy,Hebei North University,Xuanhua,Hebei 075131)

The stem segments of in vitro plantlet were taken as explants to propagate in vitro rapidly in potato variety,Atlantic and Wuhua.The experiments were done using different hormones and proportion of culture medium.The result showed that"MS medium supplemented with 1.0 mg/L 6-BA and 1.0 mg/L NAA"was optimum for them,every axillary buds could sprout rapidly in this medium.They could root easily.The efficiency were improved,the cost were decreased.

Potato;Stem segments;Different hormones;Rapidly propagation

10.3865/j.issn.1001-3547.2009.12.004

2006-2008年张家口市科技攻关项目“马铃薯脱毒种薯快繁体系优化及试管薯诱导技术研究”

姚志刚（1966-），男，副教授，在读硕士，现从事作物栽培与遗传育种工作与研究。电话：0313-8041600

2009-04-03