不同生长年限甘草不同药用部位质量研究

摘要［目的］探究新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市不同药用部位和生长年限的甘草中甘草苷和甘草酸含量差异，为有效控制其质量提供依据。［方法］以《中国药典》（2020年版）规定的甘草中有效成分甘草苷和甘草酸为检测标准，采用高效液相色谱法测定并比较新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市甘草药材不同药用部位和生长年限中甘草苷和甘草酸含量，以化学成分角度来探讨中药的质量。［结果］甘草各药用部位甘草苷和甘草酸含量从高到低依次为侧根gt;主根gt;全根gt;浮根gt;须根gt;芦头；侧根、主根和全根中甘草苷含量符合《中国药典》（2020年版）的规定（≥0.50%）；侧根中甘草酸含量符合《中国药典》（2020年版）的规定（≥2.0%）；3年生甘草药材质量最佳。［结论］传统加工方式中直接除去的须根，可作为提取甘草苷的原材料。该研究可为甘草的采收、加工、规格等级划分提供参考依据。

关键词甘草；质量研究；药用部位；生长年限；甘草苷；甘草酸

中图分类号R282"文献标识码A

文章编号0517-6611（2025）02-0183-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2025.02.036

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

StudyontheQualityofDifferentMedicinalPartsofGlycyrrhizauralensiswithDifferentGrowthYears

WANGYong-fu"FANWei-bingMAEn-yao2etal

（1.GansuGuangyaoBaiyunshanTraditionalChineseMedicineTechnologyCo.，Ltd.，Dingxi，Gansu743000;2.GuangdongHanchaoTraditionalChineseMedicineTechnologyCo.，Ltd.，Guangzhou，Guangdong510000）

Abstract［Objective］ToexplorethecontentsofliquiritinandglycyrrhizicacidindifferentmedicinalpartsandgrowthyearsofGlycyrrhizauralensisinKorla，BayingolMongoliaAutonomousPrefecture，Xinjiang，soastoprovidebasisforeffectivequalitycontrol.［Method］TakingtheactivecomponentsliquiritinandglycyrrhizicacidinGlycyrrhizauralensisstipulatedinthe2020editionofPharmacopoeiaofthePeople’sRepublicofChinaasthedetectionstandard，thecontentsofliquiritinandglycyrrhizicacidindifferentmedicinalpartsandgrowthyearsofGlycyrrhizauralensisinKorla，BayingolMongoliaAutonomousPrefectureofXinjiangweredeterminedandcomparedbyHPLC，andthequalityoftraditionalChinesemedicinewasdiscussedfromthepointofviewofchemicalcomposition.［Result］Theorderofthecontentofliquiritinandglycyrrhizicacidinvariousmedicinalpartsoflicoricewaslateralrootgt;mainrootgt;wholerootgt;floatingrootgt;fibrousrootgt;reedhead;thecontentsofliquiritininlateralroot，mainrootandwholerootmettherequirementsoftheChinesePharmacopoeia（2020edition）（≥0.50%）;thecontentofglycyrrhizicacidinlateralrootsmettherequirementsoftheChinesePharmacopoeia（2020edition）（≥2.0%）;three-year-oldGlycyrrhizauralensishadthebestquality.［Conclusion］Thefibrousrootdirectlyremovedinthetraditionalprocessingmethodcanbeusedastherawmaterialfortheextractionofliquiritin.Thisstudycanprovidereferencefortheharvesting，processingandgradingoflicorice.

KeywordsGlycyrrhizauralensis;Qualitystudy;Medicinalparts;Growthyears;Liquiritin;Glycyrrhizicacid

甘草是豆科植物甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch.）、光果甘草（Glycyrrhiza glabra L.）或胀果甘草（Glycyrrhiza inflata Bat.）的根茎和干燥根^［1］，其主要成分包含甘草酸和甘草苷，具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药等功效^［2-5］，主要生长地在我国新疆、甘肃、内蒙古、宁夏等地^［6］，其药用来源有野生和栽培之分，生长环境的差异对甘草药材的质量具有一定影响^［7］。

从20世纪80年代开始，库尔勒市（85°11′45″～86°30′04″E、41°14′12″～42°16′02″N）开始了甘草人工栽培技术的种植，地理气候条件和生物资源均具有多样性和特殊性，有着丰富的中药民族药资源，是新疆重要的中药材生产基地，该地区光热资源丰富、昼夜温差大，有利于甘草的生长，在同等肥料及管理模式作用下，甘草的产量普遍较高，适宜甘草种植^［8］。笔者以甘草主产区内新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市栽培甘草为材料，比较分析不同生长年限（1年生、2年生和3年生）及不同药用部位（侧根、主根、全根、浮根、须根、芦头）有效成分的差异性，为栽培甘草的采收、加工、规格等级划分提供参考依据。

1材料与方法

1.1试验材料

1.1.1仪器。LC-40D液相色谱仪（株式会社岛津制作所）；PL-S40T超声波清洗器（东莞康士洁超声波科技有限公司）；PTY-105/124L十万分之一电子天平（华志电子科技有限公司）；PTY-224/323L万分之一电子分析天平（华志电子科技有限公司）；Direct-PureUPUV10纯水仪（上海乐枫生物科技有限公司）。

1.1.2试剂。甘草苷对照品（含量95.2%，批号111610-202209）、甘草酸铵对照品（含量94.4%，批号110731-202122），均购自中国食品药品检定研究院。乙腈，色谱纯，天津市康科德科技有限公司；乙醇，分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司；磷酸，分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司。

1.1.3试材。甘草采自新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市普慧乡共8批样品，其中1年生2批、2年生3批、3年生3批，均为人工育苗移栽，秋季采收，经甘肃农业大学陈垣教授鉴定为胀果甘草（GlycyrrhizauralensisFisch.）的干燥根，产地采收后，经自然干燥方式干燥，8批样品分别取其侧根、主根、全根、浮根、须根、芦头6个药用部位进行研究。

1.2甘草中甘草苷、甘草酸含量测定

1.2.1 色谱条件。ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱（规格250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相A为乙腈，B为0～0.05%磷酸溶液，梯度洗脱详见表1；柱温30 ℃；检测波长237 nm；流速1.0 mL/min；进样量10 μL^［3］。

1.2.2 混合对照品溶液制备。精确称取0.2 mg甘草苷对照品与20 mg甘草酸铵对照品，以50 mL 70%乙醇溶解制成混合对照品溶液（甘草苷浓度0.042 10 mg/mL、甘草酸铵浓度0.373 50 mg/mL）备用^{［ 9］}。

1.2.3 供试品溶液制备。取过3号筛的甘草粉末约0.2 g，精密称定后置具塞锥形瓶，加入70%乙醇100 mL后密封，称重，超声（功率250 W，频率40 kHz）30 min，冷却后再次称重，用70%乙醇补齐减重，摇匀过滤得续滤液^［2］。

1.2.4方法学考察。

1.2.4.1系统适应性试验。利用高效液相色谱仪自动进样器精密吸取混合对照品和供试品溶液各10μL测定，记录图谱，考察系统适应性。

1.2.4.2 线性关系考察。准确称取对照品甘草苷2 mg、甘草酸铵20 mg，加入70%乙醇定容至50 mL，浓度分别为0.042 10、0.373 50 mg/mL，作为对照品溶液。精密量取甘草苷、甘草酸铵对照品溶液1.0、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、5.0 mL置于5 mL容量瓶，以70%乙醇定容得系列浓度混合对照品溶液，按照“1.2.1”色谱条件测定。以对照品溶液浓度（mg/mL）为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，计算线性回归方程^［9］。

1.2.4.3 仪器精密度试验。精密吸取混合对照品溶液10 μL，按照“1.2.1”色谱条件重复进样5次，计算甘草酸铵、甘草苷峰面积的RSD^［3］。

1.2.4.4重复性试验。取同一批供试品溶液连续进样5次，按照“1.2.1”色谱条件测定，计算甘草苷、甘草酸的含量及其RSD。

1.2.4.5 稳定性试验。取同一供试品溶液，分别于0、2、4、8、12、16、20、24 h按照“1.2.1”色谱条件进行测定，计算甘草苷、甘草酸的含量及其RSD^［1］。

1.2.4.6 加样回收率试验。取同一批9份甘草粉末精密称定0.2 g，分别加入浓度为0.011 788、0.016 840、0.021 050 mg/mL的甘草苷对照品溶液和浓度为0.085 905、0.126 990、0.171 810 mg/mL 的甘草酸铵对照品溶液各5 mL，按照“1.2.3”方法制备供试品溶液，3个样品为一组，每个浓度3份，按照“1.2.1”色谱条件测定，计算平均回收率和RSD^［9］。

1.2.5不同生长年限甘草中甘草苷、甘草酸含量比较。取1年生、2年生、3年生不同年限的甘草粉末，按“1.2.3”方法制备供试品溶液，按“1.2.1”色谱条件测定，计算不同生长年限甘草中甘草苷、甘草酸的含量。

1.2.6 不同药用部位甘草中甘草苷、甘草酸含量比较。取侧根、主根、全根、浮根、须根、芦头6个不同药用部位的甘草粉末，按“1.2.3”法制备供试品溶液，按“1.2.1”色谱条件测定，计算各药用部位甘草中甘草酸、甘草苷的含量^［1］。

2结果与分析

2.1方法学考察

2.1.1 系统适应性试验。由图1可见，对照品和供试品各自的色谱峰形良好（拖尾因子在0.95～1.05），分离度均大于1.5，理论塔板数均大于5 000^［3］。

2.1.2线性关系考察。按“1.2.4.2”方法操作，以对照品溶液浓度（mg/mL）为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线（图2），计算得出甘草苷、甘草酸铵的线性回归方程分别为Y=5×107X-22593（R2=0.9956）、Y=1×107X-38570（R2=0.9961），表明甘草苷和甘草酸铵分别在0.00842～0.04210和0.07624～0.38120mg/mL与峰面积有良好的线性关系。

2.1.3 仪器精密度试验。按“1.2.4.3”方法操作，计算得出甘草苷、甘草酸铵峰面积的RSD分别为0.131 1%、0.024 0%，表明该仪器精密度良好^［9］。

2.1.4 重复性试验。按“1.2.4.4”方法操作，计算得出甘草苷、甘草酸含量的RSD分别为0.612 4%、0.299 0%，表明该方法重复性良好^［9］。

2.1.5稳定性试验。按“1.2.4.5”方法操作，计算得出甘草苷、甘草酸含量的RSD分别为0.9820%、0.5514%，由此可见该方法稳定性良好。

2.1.6加样回收率试验。从表2～3可以看出，甘草苷和甘草酸的平均回收率分别为100.47%、100.59%，RSD分别为0.87%、1.59%，表明该方法可靠、准确。

2.2 不同生长年限甘草中甘草苷、甘草酸含量比较 按照“1.2.5”方法操作，计算不同生长年限甘草中甘草苷、甘草酸的含量，发现3年生含量最高，2年生次之，1年生最低。从图3和图4可以看出，甘草生长年限不同，其有效成分甘草苷和甘草酸含量具有明显差异，人工栽培甘草中甘草苷和甘草酸的含量随生长期增长而升高，即1年生﹤2年生﹤3年生；1年生所有部位中甘草酸含量均低于《中国药典》（2020年版）的规定（≥2.0%），2年生和3年生主根和侧根中甘草酸含量均符合《中国药典》（2020年版）的规定^［3］；1年生甘草所有部位中甘草苷含量均低于《中国药典》（2020年版）的规定（≥0.50%），2年生甘草全根、主根、侧根中甘草苷含量均符合《中国药典》（2020年版）的规定，而3年生甘草全根、主根、侧根中甘草苷含量均超出《中国药典》（2020年版）规定的1.38～2.16倍，确定3年生甘草药材质量最佳^［9-11］。

2.3不同药用部位甘草中甘草苷、甘草酸含量比较按照“1.2.6”方法操作，计算不同药用部位甘草中甘草苷、甘草酸的含量，发现其含量从高到低依次为侧根gt;主根gt;全根gt;浮根gt;须根gt;芦头（图3和图4）。

按照干燥品计算，甘草各药用部位甘草苷和甘草酸含量差异明显，侧根中含量最高（甘草苷0.45%～1.34%，平均0.85%；甘草酸1.7%～2.7%，平均2.2%）；其次是主根（甘草苷0.37%～1.13%，平均0.75%；甘草酸1.5%～2.3%，平均1.9%）、全根（甘草苷0.36%～1.08%，平均0.72%；甘草酸1.4%～2.2%，平均1.8%）、须根（甘草苷0.21%～0.63%，平均0.42%；甘草酸1.4%～1.9%，平均1.7%），芦头中含量最低（甘草苷0.22%～0.58%，平均0.40%；甘草酸0.8%～1.8%，平均1.3%）。其中侧根、主根和全根中甘草苷平均含量均符合《中国药典》（2020年版）的规定（≥0.50%），而芦头中仅一批样品甘草苷含量（0.58%）符合《中国药典》（2020年版）的规定，其余均低于《中国药典》（2020年版）的规定，说明芦头不适合作为以甘草苷为有效成分的药用部位。

3结论与讨论

3.1不同药用部位甘草中甘草苷和甘草酸的含量该研究通过对甘草不同药用部位甘草苷和甘草酸含量的测定，发现甘草药材各药用部位含量差异明显，具体表现为侧根gt;主根gt;全根gt;浮根gt;须根gt;芦头。侧根中甘草苷和甘草酸含量最高，2年生、3年生甘草中须根和地上部位浮根含量也基本能够满足《中国药典》（2020年版）的要求。在传统的加工方式中，在产地直接将浮根和须根除去，如果只以甘草苷和甘草酸为考核指标，则应保留浮根和须根部分，以增加甘草的供应量，降低企业有效成分提取的原料成本。

3.2 采收时期对甘草苷和甘草酸含量的影响 来自巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市普慧乡的样品，分别采挖了1年生、2年生、3年生，该研究表明，随着生长年限的增加，甘草苷和甘草酸的含量随之增加，这与叶菊等^［12］的研究结果一致，3年生甘草侧根、主根、全根中甘草苷含量均高于2年生和1年生，2年生、3年生甘草侧根、主根、全根中甘草酸含量均高于1年生，但浮根中甘草苷和甘草酸含量低于2年生甘草含量，可以推断，3年生样品中甘草苷地上部分向地下部分的转移率更高，说明甘草采收时间以地上部分全部枯萎后进行采收为宜。

3.3药材品质的优良性此次所收集的甘草样本来源于新疆巴音郭楞蒙古自治州库尔勒市普慧乡，为甘草道地产区之一，按干燥品计算，2年生和3年生甘草药材全根中甘草苷和甘草酸含量均超出《中国药典》（2020年版）的规定（按照干燥品计算，甘草苷不得少于0.50%，甘草酸不得少于2.0%），验证了新疆所产道地甘草药材的高品质。

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