北京和宁夏地区2家医院临床分离气单胞菌属的临床分布和耐药性分析

摘要：目的 了解北京和宁夏地区2家医院（解放军总医院第五医学中心和宁夏医科大学总医院）临床分离气单胞菌属的分布特点及耐药性，为临床治疗和防控气单胞菌属感染提供参考。方法 回顾性分析2013—2022年间2家医院临床分离气单胞菌属感染患者的年龄、性别、菌种分布、标本类型分布和耐药率等，使用Whonet5.6软件和Graphpad Prism 8软件进行统计分析。结果 10年间2家医院分离气单胞菌属细菌共541株，分别为198株和343株，感染患者均是男性多于女性，年龄多为50岁以上的中老年人。2家医院检出的气单胞菌属中均以嗜水气单胞菌为主，其次为豚鼠气单胞菌、维隆气单胞菌温和亚种，其他检出的菌种包括维隆气单胞菌维隆亚种、杀鲑气单胞菌和斑点气单胞菌。541株气单胞菌的标本来源主要为胆汁和血液，分别占31.98%和19.78%，其他标本类型包括痰液、引流液、分泌物等。2家医院气分离单胞菌属的标本类型有统计学差异，解放军总医院第五医学中心前五位的标本类型为血液、粪便、腹水、胆汁和引流液，宁夏医科大学总医院的标本类型主要为胆汁、痰液、分泌物、引流液、血液。气单胞菌属对碳青霉烯类、氨基糖苷类、喹诺酮类抗菌药物的耐药率均较低，3种气单胞菌均未检测到阿米卡星耐药的菌株。豚鼠气单胞菌对头孢类及单环类抗菌药物的耐药率在宁夏医科大学总医院明显高于解放军总医院第五医学中心。结论 2家医院检出的气单胞菌属的菌种组成类似，但在临床分布及耐药性间均存在差异性，每个医院都需要监测本地区气单胞菌的流行情况及耐药性，为气单胞菌的诊疗提供参考。

关键词：气单胞菌属；菌种分布；临床分布；耐药性

中图分类号：R978 文献标志码：A

Distribution characteristics and antimicrobial resistance of Aeromonas genus in two hospitals in Beijing and Ningxia

Tao Jia1，2， Chen Suming3， Wang Wen1，2， Li Gang1，2， Wang Huan3， Wang Liang1，2， Ma Tingting1，2，

Qu Fen3， Jia Wei1，2， and Wang Liru1，2

（1 Center of Medical Laboratory， General Hospital of Ningxia Medical University， Yinchuan 750004; 2" Ningxia Key Laboratory of Clinical and Pathogenic Microbiology， General Hospital of Ningxia Medical University， Yinchuan 750004; 3 Clinical Laboratory， Fifth Medical Center of Chinese PLA General Hospital，Beijing 100039）

Abstract Objective To analyze the clinical distributions and drug resistance characteristics of clinical Aeromonas isolates in two hospitals in Beijing and Ningxia， the Fifth Medical Center of Chinese PLA General Hospital and General Hospital of Ningxia Medical University， and provide references for clinical treatment， prevention and control of Aeromonas infection. Methods A retrospective analysis method was used to analyze the age， gender， bacterial species distribution， specimen type distribution， and antibiotic resistance rate of Aeromonas species in two hospitals from January 2013 to December 2022. Whonet5.6 and GraphPad Prism 8 software were used to analyze the data. Results Over the past decade， a total of 541 strains with 198 and 343 Aeromonas strains were isolated from the two hospitals in Beijing and Ningxia， respectively. The patients were more likely to be male than female and tended to be older than 50. Similarly， A. hydrophila was the most common species， followed by A. caviae and A. veronii biovar sobria in two hospitals. Other detected strains include A. veronii subspecies， A. salmoicida， and A. punctata. The specimens of 541 strains of Aeromonas mainly come from bile and blood， accounting for 31.98% and 19.78%， respectively. Other specimen types include sputum， shunt fluid， secretions， etc. There is a statistical difference in the types of specimens of the genus Aeromonas isolated from two hospitals. The five top specimens were blood， feces， abdominal fluid， bile， and shunt fluid for the Fifth Medical Center of Chinese PLA General Hospital， and bile， sputum， secretion， shunt fluid， and blood for the General Hospital of Ningxia Medical University. Aeromonas strains in this study showed high susceptibility rates to carbapenems， aminoglycosides and quinolones. None of the Aeromonas isolates were found to be resistant to amikacin. The resistance rate of A. caviae to cephalosporins and monocyclic antibiotics was significantly higher in the General Hospital of Ningxia Medical University than in the Fifth Medical Center of Chinese PLA General Hospital. Conclusion The strain composition of Aeromonas strains detected in the two hospitals was similar， but there was a significant difference in clinical distribution and drug resistance. It is necessary to monitor the prevalence of Aeromonas species and drug resistance for Aeromonas infection diagnosis and treatment.

Key words Aeromonas strains; Species distribution; Clinical distribution; Resistance rate

气单胞菌属属于γ-变形菌纲（Gamma-Proteo-bacteria）、气单胞菌目（Aeromonadales）、气单胞菌科（Aeromonadaceae），是一类革兰阴性短杆状兼性厌氧菌，绝大多数有极端单边毛，广泛分布于自然界中，尤其是水源中，包括地下水、河流、湖泊、海水等[1-2]。气单胞菌主要引起海产品感染，是人类的条件致病菌，可引起人类肠道内和肠道外疾病，如腹泻、急性胃肠炎、食物中毒、肺炎、伤口感染、蜂窝织炎、腹膜炎、坏死性筋膜炎和败血症等[3]。随着气单胞菌的感染病例的增加和抗生素的广泛使用，气单胞菌属的耐药情况也日益严重。近些年，气单胞菌引起的感染越来越多，不同地区分离的气单胞菌属细菌在菌种分布、标本来源、耐药性有一定的差别。了解不同地区气单胞菌属感染的流行特征对临床诊疗及预防控制有重要意义。本研究对北京与宁夏地区2家三甲医院临床分离气单胞菌属细菌的流行特征和药敏情况进行比较分析，旨在为气单胞菌感染的诊疗及防控提供一定的理论依据。

1 材料与方法

1.1 菌株来源

采用回顾性分析方法，选择2013年1月—2022年12月共10年间解放军总医院第五医学中心（下称医院一）和宁夏医科大学总医院（下称医院二）临床患者标本中分离的气单胞菌属（剔除同一患者重复菌株），统计2家医院气单胞菌属的临床分布及耐药率。

1.2 细菌分离及鉴定

细菌培养按第4版《全国临床检验操作规程》，细菌鉴定采用Vitek 2 Compact系统（法国Bio-Merieux）或VITEK MS质谱仪（法国Bio-Merieux）辅以生化试验鉴定到种。

1.3 药敏试验

采用琼脂纸片扩散法（K-B法）或Vitek 2 Compact细菌鉴定仪进行药敏试验，敏感性判定参照美国临床实验室标准化研究所（CLSI M45）标准。质控菌株为：大肠埃希菌（ATCC25922） 、大肠埃希菌（ATCC 35218）、金黄色葡萄球菌（ATCC25923）、铜绿假单胞菌（ATCC27853），药敏纸片购自英国Oxoid公司。

1.4 统计学方法

使用Whonet 5.6软件对患者性别、年龄、菌种分布、标本类型分布及菌株对抗菌药物的耐药率进行统计，计数资料采用株数或构成比表示，使用GraphPad Prism 8软件进行数据分析，两组间比较采用Fisher's精确检验或χ2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 患者年龄与性别分布

2013—2022年间，本研究中2家医院共检查气单胞菌属541株（剔除重复后），男性患者（70.24%）多于女性患者（29.76%）。医院一临床分离气单胞菌属为198株，来自198例患者，其中男性154例（77.78%），女性44例（22.22%）；中位年龄为53岁（1～88岁）。医院二临床分离气单胞菌属为343株（剔除重复后），来自343例患者，其中男性226例（65.89%），女性117例（34.11%）；中位年龄为65岁（0～96岁）。2家医院的患者年龄主要集中在50岁以上。2家医院的患者性别和年龄分布均存在统计学差异，见表1。

2.2 气单胞菌属菌种构成

541株气单胞菌属中排名前3位的菌种为嗜水气单胞菌（227株）、豚鼠气单胞菌（148株）、维隆气单胞菌温和亚种（103株），分别占41.96%、27.36%和19.04%。2家医院检出的气单胞菌属中均以嗜水气单胞菌为主，分别为76株（38.38%）和151株（44.02%），其次为豚鼠气单胞菌、维隆气单胞菌温和亚种，分别为64株（32.32%）和84株（24.49%），44株（22.22%）和59株（17.20%），其他检出的菌种包括维隆气单胞菌维隆亚种、杀鲑气单胞菌和斑点气单胞菌。医院二分离的杀鲑气单胞菌（P=0.02）和斑点气单胞菌（Plt;0.0001）的构成比明显高于医院一，而维隆气单胞菌维隆亚种（P=0.04）明显低于医院一，差异有统计学意义，见表2。

2.3 气单胞菌属标本类型分布

541株气单胞菌分离自不同标本类型，主要为胆汁和血液，分别占31.98%和19.78%，其他标本类型包括痰液、引流液、分泌物、粪便、腹水等。2家医院临床分离气单胞菌属的标本类型有所不同，医院一前五位的标本类型为78份血液、37份粪便、31份腹水、29份胆汁、9份引流液，分别占39.39%、18.69%、15.66%、14.65%、4.55%。其他标本类型有胸水、痰液、尿液等。医院二的标本来源以胆汁为主，共144份占41.98%，其次为45份痰液、38份分泌物、31份引流液、29份血液，分别占13.12%、11.08%、9.04%、8.45%。大多数标本类型的构成比在2家医院间均具有统计学差异（P＜ 0.05），见表3。

2.4 气单胞菌属对常用抗菌药物的耐药率比较

对排名前3位的气单胞菌进行耐药率统计，结果显示嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌、维隆气单胞菌温和亚种对氨基糖氨类的耐药率较低，对庆大霉素和妥布霉素的耐药率为2.5%～7.5%和9.3%～11.4%，没发现对阿米卡星耐药的菌株。β-内酰胺类药物中，3种菌对头孢类药物的耐药率为2.6%～37.8%，对亚胺培南的耐药率相类似（6.1%～6.9%），对美罗培南的耐药率差别较大，嗜水气单胞菌为13.5%，豚鼠气单胞菌为4.3%，未出现对美罗培南耐药的维隆气单胞菌温和亚种。3种菌对喹诺酮类药物（环丙沙星和左氧氟沙星）的耐药率为2.8%～15.7%。进一步对2家医院3种气单胞菌的耐药率进行比较，结果显示医院一检出嗜水气单胞菌对亚胺培南（P=0.0454）的耐药率高于医院二，而头孢呋辛（P=0.0292）的耐药率低于医院二，差异有统计学意义。医院一豚鼠气单胞菌对头孢呋辛（P=0.0063）、头孢他啶（P=0.0047）、头孢曲松（P=0.0071）、头孢吡肟（P=0.0119）和氨曲南（P=0.0242）的耐药率低于医院二。医院一维隆气单胞菌温和亚种对头孢他啶（P=0.0079）和氨曲南（P=0.0438）的耐药率低于医院二，差异具有统计学意义，见表4～6。

3 讨论

气单胞菌是我国水产养殖产业中细菌性传染病的重要病原体之一，可引起水产动物多种疾病，大部分对气单胞菌耐药性和毒力基因的研究主要集中在水产动物中。近年来，气单胞菌引起人体感染性疾病的报道逐渐增多，感染人体的气单胞菌主要有嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌、维隆气单胞菌温和生物型，并且随着抗生素的广泛使用，气单胞菌属的耐药率也逐渐增高。本研究回顾性分析了北京地区和宁夏地区2家医院临床分离气单胞菌的临床分布及耐药特征。

2家医院的感染患者男性均多于女性，与国内外报道一致，但是不同医院报道的比例差别也较大，傅美芹等[4]报道男性患者占68.3%，与本研究中医院二（65.89%）相近，但低于医院一的77.78%，而Kaki等[5]报道的嗜水气单胞菌感染患者男性比例为91.7%。气单胞菌属感染的患者主要为大于50岁的中老年人，但患者比例最高的年龄段，不同研究略有不同，本研究中医院一患者最多的年龄段位为51～60岁，而医院二为61～70岁。这可能由于老年人群免疫力降低，常伴有基础疾病而更容易感染。一项研究显示80%以上的患者有基础疾病，主要为肿瘤和慢性病[6]。另一项研究也显示气单胞菌属引起菌血症的患者中大于50%为65岁以上的老年人，并且大多数患者有基础疾病，例如肿瘤、肝硬化、糖尿病、或使用免疫抑制剂等[7]。这提示，临床诊疗过程中遇到此类患者应高度警惕气单胞菌属感染。

本研究中，2家医院检出的气单胞菌主要为嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌和维隆气单胞菌温和亚种，与国内外研究报道一致[8-10]。本研究中检出的其他菌种有维隆气单胞菌维隆亚种、杀鲑气单胞菌和斑点气单胞菌，这3种菌在医院二检出的数量高于医院一，这可能由于医院二纳入研究的菌株数更多，故检出的菌种也更丰富。

对菌株来源的标本类型进行分析发现，2家医院的标本类型存在较大差异，医院一最常见的标本类型为血液，占39.39%，其次是粪便，而医院二最多的标本是胆汁，占41.98%，其次是痰液和分泌物。方海英等[11]报道浙江地区肠道外分离气单胞菌的标本来源最多的也是血液标本，与医院一类似，其次是痰液和胆汁；而重庆地区的一项研究显示肠道外分离气单胞菌主要来源于手术伤口分泌物，占30.4%，其次是胆汁和尿液[12]。这可能与不同医院，收治的患者类型不同有关，因此，不同医院都需要监测本医院细菌的流行特征。气单胞菌感染人类以肠道内感染为主，通常表现为腹泻，国内研究显示腹泻病原菌的分布中，沿海地区气单胞菌占15.42%，内陆地区占4.2%[13]。本研究中宁夏地区的菌株没有肠道来源的，虽然宁夏属于内陆地区，气单胞菌引起肠道感染的比例较低，但在腹泻患者诊断时仍需关注气单胞菌的感染。

对嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌和维隆气单胞菌温和亚种的耐药率进行统计分析，3种菌对抗菌药物的耐药率在2家医院间总体耐药趋势类似，气单胞菌对抗菌药物的耐药率较低。进一步对2家医院3种菌的耐药率进行比较发现，医院二的菌种耐药率更高，氨基糖苷类、喹诺酮类、复方磺胺甲恶唑的耐药率在2家医院的菌种中没有差异，但头孢类和单环类药物的耐药率在医院二高于医院一，尤其是豚鼠气单胞菌，对头孢吡肟、头孢曲松、头孢他啶和氨曲南的耐药率均高于医院一，差异有统计学意义。这可能是因为医院二在患者经验性治疗时使用头孢类药物较多造成的。2家医院的3种菌种菌出现了碳青霉烯类耐药的菌株， Xu等[14]

报道血流感染分离的气单胞菌对碳青霉烯类的耐药率高达70%，远高于本研究报道，这提示虽然本研究中耐药率还较低，但依然需要引起注意，警惕碳青霉烯类耐药率的增加。Sakurai等[15]报道的一项多中心研究中，不同菌种对碳青霉烯类的耐药率不同，豚鼠气单胞菌对亚胺培南的非敏感率为1%，与本研究类似，而嗜水气单胞菌和温和气单胞菌对亚胺培南的非敏感率在50%以上。CphA是最初分离自嗜水气单胞菌的一类金属β-内酰胺酶，由cphA基因编码，能水解碳青霉烯类抗生素，常被认为是引起气单胞菌对碳青霉烯类耐药的机制[16]。cphA基因在气单胞菌属的不同菌种间存在特异性，在嗜水气单胞菌、维隆气单胞菌维隆亚种、简氏气单胞菌和杀鲑气单胞菌中都检测到，但豚鼠气单胞菌中未检测到[17]。Sinclair

等[18]对100株耐碳青霉烯类气单胞菌株检测cphA基因，77%菌株携带cphA基因，其中90%的嗜水气单胞菌、100%的维隆气单胞菌维隆亚种携带cphA基因，但没有发现携带cphA基因的豚鼠气单胞菌。

综上所述，不同地区临床分离气单胞菌属细菌在临床分布及耐药性等方面都存在差异，各地区需持续监测气单胞菌属的流行特征及耐药性，为气单胞菌感染的诊疗及预防控制提供参考。

参 考 文 献

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