妊娠晚期阴道微生态改变与GBS感染的关系探究

【摘要】 目的：探讨妊娠晚期阴道微生态改变与B族链球菌（GBS）感染的关系。方法：选取2022年1月—2023年1月九江市妇幼保健院收治的疑似GBS感染的妊娠晚期孕妇80例，将生殖道GBS检测阳性的妊娠晚期孕妇40例纳入阳性组，另将生殖道GBS检测阴性的妊娠晚期孕妇40例纳入阴性组。比较两组患者阴道微生态指标（功能学指标、阴道菌群密集度、阴道菌群多样性、阴道清洁度、Nugent评分），采用多因素logistic回归分析妊娠晚期GBS感染与阴道微生态改变的相关性。结果：单因素分析结果显示，阳性组过氧化氢（H2O2）、白细胞酯酶（LE）、唾液酸苷酶（SNA）、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）阳性率均高于阴性组，pH值、阴道清洁度、阴道菌群密集度、阴道菌群多样性异常率及BV诊断率均高于阴性组（P<0.05）。多因素logistic回归分析结果显示，低H2O2、高LE、高pH值、阴道清洁度异常、高Nugent评分是GBS感染的独立危险因素（P<0.05）。结论：阴道微生态改变与GBS感染密切相关，临床应重视对妊娠晚期孕妇H2O2、LE、pH值、阴道清洁度及Nugent评分的评估，以便对GBS感染进行早期诊断和干预。

【关键词】 妊娠晚期 阴道微生态 B族链球菌

Relationship Exploration between Vaginal Microecology Changes and GBS Infection in Late Pregnancy/TONG Lu， WEN Xiao， DUAN Jiaqing. //Medical Innovation of China， 2024， 21（27）： -135

[Abstract] Objective： To explore the relationship between vaginal microecology changes and group B streptococcus （GBS） infection in late pregnancy. Method： A total of 80 gravidas in late pregnancy with suspected GBS infection admitted to Jiujiang Maternal and Child Health Hospital from January 2022 to January 2023 were selected， 40 gravidas in late pregnancy with positive of genital tract GBS detection were included in the positive group， and 40 gravidas in late pregnancy with negative genital tract GBS detection were included in the negative group. Vaginal microecology indicators （functional indicators， vaginal flora density， vaginal flora diversity， vaginal clearing degree， Nugent score） were compared between the two groups. Multivariate logistic regression was used to analyze the relationship between GBS infection and vaginal microecology changes in late pregnancy. Result： Univariate analysis showed that the positive rates of hydrogen peroxide （H2O2）， leukocyte esterase （LE）， sialidases （SNA） and N-acetyl-β-glucosaminidase （NAG） in the positive group were higher than those in the negative group， and the abnormal rate of pH value， vaginal clearing degree， vaginal flora density， vaginal flora diversity and BV diagnostic rate were higher than those in the negative group （P<0.05）. Multivariate logistic regression analysis showed that low H2O2， high LE， high pH value， abnormal vaginal clearing degree and high Nugent score were independent risk factors for GBS infection （P<0.05）. Conclusion： Vaginal microecology changes are closely related to GBS infection. Clinical evaluation of H2O2， LE， pH， vaginal clearing degree and Nugent score of gravidas in late pregnancy should be emphasized for early diagnosis and intervention of GBS infection.

[Key words] Late pregnancy Vaginal microecology Group B streptococcus

First-author's address： Department of Laboratory， Jiujiang Maternal and Child Health Hospital， Jiujiang 332000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2024.27.030

正常情况下阴道微生态环境呈弱酸性动态平衡状态，各种微生物之间相互影响、制约，以维持微生态平衡。但当出现机体免疫功能低下等情况时，阴道酸性环境容易被破坏，易出现菌群失调[1]。B族链球菌（GBS）广泛存在于人体泌尿生殖系统中，孕妇作为特殊群体，阴道黏膜形态发生改变，且普遍存在免疫力低下、内分泌失调等问题，致使GBS感染发生率普遍较高[2]。相关统计学研究表明我国每年孕产妇GBS定植率可达14.52%[3]。此外，GBS感染具有带菌量大、易传播等特点，易发生上行传染，导致产褥期感染、阴道出血、早产等发生率增加，威胁孕产妇生命和安全[4]。再者，该菌垂直传播率高达50%，易传播给胎儿或新生儿，增加新生儿胎膜早破、新生儿肺炎等疾病发生风险，使胎儿或新生儿死亡风险增加[5]。目前，已有研究表明妊娠晚期GBS感染的发生、发展与阴道微生态系统功能失衡之间存在一定联系[6]。本研究对妊娠晚期阴道微生态改变与孕妇GBS感染的关系展开研究，旨在为临床GBS感染的预防、控制及管理提供参考，现详述如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将2022年1月—2023年1月九江市妇幼保健院收治的80例疑似GBS感染孕妇作为研究对象。（1）纳入标准：①单胎妊娠；②无羊水过多、妊娠期糖尿病等妊娠合并症或妊娠并发症；③意识、认知正常；④年龄20～35岁；⑤孕28～40周；⑥无生殖器官畸形；⑦有尿路感染，头晕头痛，恶心呕吐，发热，腰痛等疑似GBS感染症状。（2）排除标准：①合并其他阴道病原菌感染；②近1个月内服用过阿莫西林等抗菌药物或进行过阴道局部用药；③临床资料不完整；④GBS感染复发；⑤早产。根据生殖道GBS检测结果将GBS阳性的40例妊娠晚期孕妇纳入阳性组，另将GBS阴性的40例妊娠晚期孕妇纳入阴性组。本研究经本院医学伦理委员会批准，且患者及家属均知情同意本研究。

1.2 方法

1.2.1 GBS检查 取膀胱截石位，使用无菌棉试纸获取孕妇子宫颈分泌物标本，使用实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）分析仪（杭州安誉科技有限公司，AGS4800）采用实时荧光定量PCR法检测GBS，试剂盒购自江苏硕世生物科技股份有限公司。

1.2.2 功能学指标 取膀胱截石位，在孕妇阴道低位1/3处取分泌物，使用阴道炎多项检测试剂盒（江苏硕世生物科技股份有限公司，50人份/盒）采用干化学酶法对过氧化氢（H2O2）、白细胞酯酶（LE）、唾液酸苷酶（SNA）、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶（NAG）及pH值进行检测。H2O2<2 μmol/L为阳性，LE≥9 U/L为阳性，SNA≥7 U/L为阳性，NAG≥

0.1 U/mL为阳性，pH值≥4.6视为异常。

1.2.3 阴道清洁度 将阴道分泌物置于高倍显微镜（江西凤凰光学科技有限公司，XSP-30）下观察，根据杆菌、球菌、上皮细胞及白细胞数量将阴道清洁度分为Ⅰ～Ⅳ度，其中Ⅰ、Ⅱ度为阴道清洁度正常，Ⅲ、Ⅳ度为阴道清洁度异常[7]。

1.2.4 阴道菌群密集度 于高倍油镜（奥林巴斯株式会社，SZX16）下观察阴道分泌物标本，根据每高倍视野下细菌数划分等级，其中Ⅱ级（10～99个）、Ⅲ级（≥100个）为正常，Ⅰ级（1～9个）、Ⅳ级（细菌聚集成团/密集覆盖黏膜上皮细胞）为异常[8]。

1.2.5 阴道菌群多样性 于高倍油镜下观察阴道分泌物标本细菌种类，根据辨别的细菌种类划分，Ⅱ级（4～6种）、Ⅲ级（7～9种）为正常，Ⅰ级（1～3种）、Ⅳ级（≥10种）为异常[9]。

1.2.6 Nugent评分 包括乳杆菌（0～4分）、加德纳菌及类杆菌（0～4分）、染色不定的弯曲杆菌（1～

2分）3项，总分1～10分，Nugent评分≤3分为正常、4分≤Nugent评分≤6分为中间型[疑似细菌性阴道病（BV）]，7分≤Nugent评分≤10分为BV[10]。

1.3 统计学处理

采用SPSS 22.0分析数据。计数资料用率（%）表示，组间行字2检验；计量资料以（x±s）表示，组间行t检验；采用多因素logistic回归分析妊娠晚期孕妇GBS感染影响因素。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组基线资料比较

阳性组孕周28～40周，平均（36.85±1.96）周；

年龄22～34岁，平均（28.17±5.35）岁；孕次1～5次，平均（2.36±0.65）次；产次1～3次，平均（1.51±0.32）次。阴性组孕周28～40周，平均（37.04±1.72）周；年龄21～35岁，平均（28.83±6.12）岁；孕次1～4次，平均（2.18±0.53）次；产次1～3次，平均（1.47±0.27）次。两组基线资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 妊娠晚期GBS感染单因素分析

单因素分析结果显示：阳性组H2O2、LE、SNA、NAG阳性率均高于阴性组，pH值、阴道清洁度、阴道菌群密集度、阴道菌群多样性异常率及BV诊断率均高于阴性组（P<0.05），见表1。

2.3 妊娠晚期GBS感染多因素分析

以GBS为应变量（阳性=1，阴性=0），以H2O2（阳性=1，阴性=0）、LE（阳性=1，阴性=0）、SNA（阳性=1，阴性=0）、NAG（阳性=1，阴性=0）、pH值（异常=1，正常=0）、阴道清洁度（异常=1，正常=0）、阴道菌群密集度（异常=1，正常=0）、阴道菌群多样性（异常=1，正常=0）、Nugent评分（BV=1，正常、疑似=0）为自变量进行赋值。logistic多因素回归分析结果显示：低H2O2、高LE、高pH值、阴道清洁度异常及高Nugent评分是妊娠晚期GBS感染的独立危险因素（P<0.05），见表2。

3 讨论

阴道微生态系统由阴道微生物群、免疫系统等组成，对维持阴道的正常酸性环境、预防病原菌过度繁殖有积极意义[11]。GBS寄生于女性生殖道，是女性阴道微生物群的重要组成部分，正常情况下与其他阴道菌群处于共生状态，具有一定防御和保护能力。但由于妊娠期妇女阴道分泌物和雌激素分泌增加，导致阴道酸性环境易被破坏，加快细菌滋生，造成菌群结构失衡，导致GBS感染风险增加[12]。研究表明部分妊娠晚期GBS感染患者虽无典型临床表现，但GBS易通过阴道上行感染至子宫腔，破坏孕妇胎膜屏障，引发早产、胎膜早破，威胁母婴生命[13]。因此，早期发现GBS感染对提高母婴健康状况有积极意义。目前临床尚缺乏统一的GBS筛查方法，虽然可以通过预防性使用抗生素来降低GBS感染发病率，但该方法易增加细菌对抗生素的耐药性和新生儿败血症发生风险[14]。国外已有研究表明阴道菌群失调与GBS感染有一定相关性，但我国对二者关系仍处于研究阶段[15]。

本研究对阴道功能学指标展开研究，结果发现阳性组H2O2、LE阳性率及pH值异常率均高于GBS阴性组，且多因素logistic回归分析结果显示低H2O2、高LE及高pH值是造成GBS感染的独立危险因素。分析原因，乳酸杆菌为阴道微生态系统的优势菌，在正常阴道菌群中高达50%～80%，不仅具有干扰、抑制致病菌生长黏附、提高机体免疫调节功能的作用，还能够将糖原分解为乳酸，调节阴道pH值，此外，其还能抑制多种条件致病菌生长，故阴道菌群缺乏乳酸杆菌的女性更有可能GBS感染[16]。阴道分泌物H2O2浓度与乳酸杆菌数量和功能密切相关，正常女性阴道菌群中约96%的乳酸杆菌具有生产H2O2的能力，H2O2浓度降低表明乳酸杆菌数量减少、功能减退，其抗菌作用也随之减弱，GBS感染发生率上升[17]。此外，张萍萍等[18]研究表明GBS感染患者pH值异常率明显高于GBS阴性患者，本研究结果与之一致。分析原因在于，当阴道pH值上升时，乳酸杆菌生长、繁殖受限，阴道防御机制遭到破坏，GBS黏附数量增加，GBS感染风险也随之增加。LE存在于中性粒细胞，是机体炎症反应的重要指标，阴道分泌物LE阳性常提示患者存在阴道炎症。黄亚军等[19]研究表明GBS感染组LE水平高于非感染组，本研究结果与之一致。分析原因在于，当阴道发生炎症反应时，GBS能够通过蛋白酶水解和细胞吞噬作用侵袭机体，导致GBS感染。此外，受炎症反应影响，机体免疫应答机制受到影响，患者自身抵抗和清除有害细菌的能力减弱，导致GBS感染风险增加。

本研究阳性组阴道清洁度异常率高于阴性组，且阴道清洁度异常是导致GBS感染发生的独立危险因素，这与董卫国等[20]研究结果相似。分析原因，阴道清洁度反映阴道菌群环境，良好的清洁度能够维持阴道生态环境稳定。当阴道清洁度下降时，优势菌群发生改变，阴道白细胞数量增多，GBS、气单胞菌等在阴道内大量繁殖导致菌群失调，且这些微生物使阴道分泌物生化成分发生改变，产生的氨类、有机酸及酶类等物质导致阴道pH值升高，并造成局部炎症反应加重，为GBS感染创造条件。Nugent评分是反映加德纳菌等细菌的重要指标[21]。本研究阳性组BV诊断率明显高于GBS阴性组，提示Nugent评分升高，GBS感染风险增加。Gilbert等[22]对加德纳菌与妊娠妇女GBS定植的关系展开研究，结果发现同时接种GBS和加德纳菌的妊娠小鼠GBS感染风险是未接种加德纳菌的10倍。此外，曹清芸等[23]研究表明Nugent评分与GBS感染呈正相关，考虑与BV导致患者阴道内环境失调有关，但目前其作用机制相关研究较少，仍需进一步证实。

综上所述，阴道微生态改变与GBS感染密切相关，H2O2降低、LE升高、pH值升高、阴道清洁度异常、Nugent评分升高，GBS感染风险也随之增加。

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（收稿日期：2024-02-19） （本文编辑：陈韵）