怀化市新生儿地中海贫血基因特征分析

[摘要]目的了解怀化市2020—2022年新生儿地中海贫血基因分型。方法对2020年1月至2022年12月怀化市进行地中海贫血筛查的46931名新生儿进行回顾性分析。结果初筛阳性4443例，召回2153例，地中海贫血基因确诊1536例。基因确诊α地中海贫血1077例（70.12%），β地中海贫血431例（28.06%），中间型α地中海贫血4例；临床表型以静止型α地中海贫血、轻型α地中海贫血和轻型β地中海贫血为主。结论怀化市新生儿地中海贫血以α地中海贫血为主，其中又以静止型、轻型多见。怀化市新生儿地中海贫血基因携带率高于全国平均水平，地区分布不均，地中海贫血防治工作形势较严峻。

[关键词]地中海贫血；筛查；基因；新生儿

[中图分类号]R725.5[文献标识码]A[DOI]10.3969/j.issn.1673-9701.2024.18.015

GeneticcharacteristicsofnewbornthalassemiainHuaihua

GUZhenxiang，FENGZonghui，XIAOGang

DepartmentofMedicalGenetics，HuaihuaMaternalandChildHealthHospital，Huaihua418000，Hunan，China

[Abstract]ObjectiveTounderstandthegenotypesofneonatalthalassemiainHuaihua Cityfrom2020to2022.MethodsAretrospectiveanalysiswasperformedon46931newbornsscreenedforthalassemiafromJanuary2020toDecember2022inHuaihuaCity.Results4443caseswerepositiveinpreliminaryscreening，2153caseswererecalled，and1536caseswereconfirmedwiththalassemiagene.Therewere1077cases（70.12%）ofα-thalassemiadiagnosedbygene.431（28.06%）casesofβ-thalassemia;Intermediateα-thalassemia（4cases）;Theclinicalphenotypesweremainlystaticα-thalassemia，mildα-thalassemiaandmildβ-thalassemia.ConclusionTheneonatalthalassemiinhuaihuacityismainlyα-thalassemia，andtheresttypeandmildtypearemorecommon.ThegenecarryingrateofnewbornthalassemiainHuaihuaCityishigherthanthenationalaveragelevel，theregionaldistributionisuneven，andthesituationofthalassemiapreventionandcontrolisserious.

[Keywords]Thalassemia;Screening;Gene;Newborn

地中海贫血又称海洋性贫血，是最常见的单基因遗传病，主要由珠蛋白基因的缺陷使一种或几种珠蛋白肽链合成不足或不能合成，导致血红蛋白（hemoglobin，Hb）的组成成分改变，红细胞稳定性变差、寿命缩短，出现不同程度的贫血[1]。地中海贫血是中国南方地区常见的遗传性血液病，具有明显的人群和地区分布差异，主要包括α地中海贫血和β地中海贫血[2]。地中海贫血目前无确切有效的治疗方法，干细胞移植需花费巨大的人力、财力，基因治疗目前处于临床研究阶段。出生前积极干预可降低重型地中海贫血的发生；对新生儿进行地中海贫血筛查并定期进行追踪和发育评估，可提高地中海贫血患儿智力和生长发育水平，此外还可指导婚配。怀化市地处湖南省西南部，与地中海贫血高发地区广西壮族自治区接壤，且为多民族聚居区，地中海贫血发生率位居湖南省前列。本研究对怀化市妇幼保健院新生儿疾病筛查中心2020—2022年新生儿地中海贫血筛查情况进行统计分析，以了解怀化市新生儿地中海贫血基因分布特征及临床表型。

1资料与方法

1.1研究对象

对怀化市妇幼保健院新生儿疾病筛查中心2020—2022年新生儿地中海贫血筛查情况进行统计分析。在新生儿家属知情同意下，对新生儿足底末梢血标本采用毛细管电泳法进行初筛检测。召回初筛阳性新生儿，家属知情同意下，采集血斑或静脉血进行基因确诊。本研究经怀化市妇幼保健院医学伦理委员会审批通过（伦理审批号：202323）。

1.2标本的采集和保存

初筛标本采集时间为新生儿出生后48～72h。采集足底末梢血，血斑直径>8mm，无污染、无渗透环，室温下自然晾干制成干血片密闭保存在2～8℃冰箱中。初筛阳性者召回进行基因检测，同样以血斑或抽静脉血2ml置于乙二胺四乙酸（ethylenediaminetetraaceticacid，EDTA）抗凝管中，2～8℃冰箱中保存。

1.3主要实验仪器及试剂

CAPILAYS2全自动毛细管电泳仪购自法国Sebia公司；缓冲液、溶血素、冲洗液、正常HbA2质控品等购自法国Sebia公司；聚合酶链式反应（polymerasechainreaction，PCR）扩增仪购自赛默飞世尔科技公司；α地中海贫血和β地中海贫血基因检测试剂盒购自深圳亚能生物技术有限公司；DNA快速提取试剂盒购自西安天隆科技有限公司。

1.4筛查结果判读

α地中海贫血阳性：Hb电泳中出现HbBarts带。β地中海贫血阳性：依据HbA值结合HbA2/HbA比值的综合分析法进行判读[当8.0＜HbA≤9.5时，HbA2>0（早产儿：当7.3＜HbA≤9.5时，HbA2>0）；当9.5＜HbA≤11.5时，HbA2/HbA≥0.008；当11.5＜HbA≤15.0时，HbA2/HbA≥0.015；当15.0＜HbA≤20.0时，HbA2/HbA≥0.02；当HbA>20时，HbA2/HbA≥0.025]。

1.5基因诊断

采用DNA快速提取试剂盒提取血斑或全血DNA，在PCR扩增仪上扩增。缺失型α地中海贫血基因用单管多重跨越断裂点聚合酶链扩增技术法检测（­­SEA，­ α3.7，­ α4.2），采用聚合酶链扩增-反向斑点杂交技术检测非缺失型α地中海贫血基因（ αCSα， αQSα， αWSα）和β地中海贫血基因（CD17、CD31、CD43、CD41-42、CD27-28、CD14-15、CD71-72、IVS-Ⅱ-654、IVS-Ⅰ-1、IVS-Ⅰ-5、-28、-29、-30、-32、Int、βE、CAP）。

2结果

2.1一般资料

怀化市2020—2022年新生儿活产99864人，地中海贫血筛查46931人，筛查率46.99%；筛查阳性4443人，筛查阳性率9.47%；召回2153人，基因确诊1536人，确诊阳性率3.27%；确诊α地中海贫血1077例（占70.12%），β地中海贫血431例（占28.06%），α合并β地中海贫血28例（占1.82%），见表1。

2.2α地中海贫血临床表型及基因型

确诊α地中海贫血1077例，包括基因突变携带者1073例（占99.63%），HbH病4例（占0.37%），分布在通道侗族自治县2例，麻阳苗族自治县和靖州苗族侗族自治县各1例；基因突变携带者包括静止型α地中海贫血686例（63.69%），轻型α地中海贫血385例（35.75%），其他型α地中海贫血2例（0.19%）。共检出14种α地中海贫血基因型，主要是-α3.7/αα（44.75%）、­­ SEA/αα（35.00%）、­ α4.2/αα（11.14%），见表2。

2.3β地中海贫血临床表型及基因型

确诊β地中海贫血431例，占28.06%，均为地中海贫血基因突变携带者，临床表型为轻型。检出10种β地中海贫血基因型，主要为CD41-42/βN（47.80%）、CD17/βN（25.06%）、IVS-Ⅱ-654/βN（12.30%），见表3。

2.4α合并β地中海贫血临床表型及基因型

确诊α合并β地中海贫血患儿28例，临床表型均为轻型地中海贫血。共检出10种基因型，主要为­ α3.7/αα合并CD41-42/βN（28.57%），­­ SEA/αα合并CD41-42/βN（25%），­ α3.7/αα合并CD17/βN（14.29%），­­ SEA/αα合并CD17/βN（10.71%），见表4。

3讨论

地中海贫血在我国主要以广西壮族自治区、广东省及海南省高发，北方地区少见。怀化市在湖南省属相对高发地区，3年新生儿地中海贫血基因确诊异常1536例，因只召回2153例，相较于4443例筛查阳性数，理论基因确诊阳性率约6.75%。2020—2021年湖南省出生缺陷协同防治重大科技项目地中海贫血专项调查显示怀化市地中海贫血基因携带率约为7.22%，与新生儿地中海贫血基因携带率大致相符[3]。通过制定出台地中海贫血防控实施方案，开展孕产妇及新生儿地中海贫血筛查，将防控关口前移。

怀化市确诊的新生儿地中海贫血以α地中海贫血（70.12%）为主，检出α地中海贫血基因型14种，主要为­α3.7/αα（44.75%）、­­SEA/αα（35.00%），与以往国内多数报道相似[4-7]。其次为β地中海贫血（28.06%），检出β地中海贫血基因型10种，主要为CD41-42/βN（47.80%）、CD17/βN（25.06%）；广西壮族自治区报道以CD41和CD42为主[5]；云南省以CD17为主[8]；福建省以IVS-Ⅱ-654为主[9]。α合并β地中海贫血（1.82%）主要以­α3.7/αα合并CD41-42/βN（占28.57%）、­­SEA/αα合并CD41-42/βN（25.00%）为主。另确诊中间型地中海贫血（HbH病）4例（0.26%），4例HbH病患者至2022年11月生长发育尚可，Hb维持在60～100g/L，尚未进行输血治疗。通过定期随访，指导家长做好患儿Hb及生长发育相关指标监测。根据需要开展输血和除铁治疗，积极提升患儿的生存质量。新生儿地中海贫血筛查对中间型地中海贫血可做到早筛查、早诊断、早治疗，以便让患儿的生活质量得到进一步提高[10-11]。

本研究未发现重型地中海贫血新生儿，防控成效的取得可能与加强婚检、孕检进行地中海贫血筛查，同型地中海贫血夫妇的产前诊断等防控措施有关。

本研究通过分析掌握怀化市地中海贫血的发生率、基因型，对制定出台相关防控方案具有指导作用。怀化市作为地中海贫血相对高发地区，做好新生儿地中海贫血筛查、建立地中海贫血防控长效机制、落实三级预防措施非常必要。通过宣传和普及地中海贫血防控知识、健全以新生儿家庭为主要对象的健康教育网络、强化重点地区的经费保障、强化筛查质量，对降低重型地中海贫血患儿出生率、提升中间型地中海贫血患儿生活质量、提高人口素质具有重要意义。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。

[参考文献]

• 王卫平，孙锟，常立文，等.儿科学[M].9版.北京：人民卫生出版社，2019.
• 杨阳，张杰.中国南方地区地中海贫血研究进展[J].中国实验血液学杂志，2017，25（1）：276–280.
• HUIX，QINL，HUADX，etal.Epidemiologicalsurveyofhemoglobinopathiesbasedonnext-generationsequencingplatforminHunanProvince，China[J].BiomedEnvironSci，2023，36（2）：127–134.
• 钟玉杭，叶立新，蔡小娟，等.东莞地区新生儿地中海贫血基因特征及变化趋势[J].中国当代儿科杂志，2020，22（5）：454–459.
• 李东明，何升.30417例儿童地中海贫血基因类型分析[J].中国当代儿科杂志，2021，23（8）：841–847.
• 邓向群，黄姿.惠州市惠城区学龄前儿童α-和β-地中海贫血的分子流行病学研究[J].中国现代药物应用，2019，13（7）：227–228.
• LAIK，HUANGG，SUL，etal.TheprevalenceofthalassemiainmainlandChina：Evidencefromepidemiologicalsurveys[J].SciRep，2017，7（1）：920.
• HUANGTL，ZHANGTY，SONGCY，etal.Genemutationspectrumofthalassemiaamongchildreninyunnanprovince[J].FrontPediatr，2020，8：159.
• YANGZ，ZHOUW，CUIQ，etal.GenespectrumanalysisofthalassemiaforpeopleresidinginnorthernChina[J].BMCMedGenet，2019，20（1）：86.
• 方建培，尹晓林，兰和魁，等.儿童非输血依赖型地中海贫血的诊治和管理专家共识[J].中国实用儿科杂志，2018，33（12）：929–934.
• 许吕宏，方建培.《重型β地中海贫血的诊断和治疗指南（2017年版）》解读[J].中国实用儿科杂志，2018，33（12）：940–943.

（收稿日期：2023–11–26）

（修回日期：2024–06–18）