水产品中常用兽药残留危害及检测方法

杨淑芬

（邵阳市畜牧水产事务中心，湖南 邵阳 422000）

随着人们生活水平的提高，其对食品的关注点从“吃得饱”变成了“吃得安全”。水产品因富含蛋白质、脂肪酸、维生素和矿物质等营养物质，逐渐成为人们喜爱的优质食品。近年来，随着我国水产养殖业的高质量发展，水产养殖品种日益丰富、养殖结构逐渐合理，为养殖业和农村经济发展提供了重要支撑。在养殖业发展的同时，动物性食品安全问题也日益突出，水体中污染物累积以及兽药的不合理使用，导致养殖环境和水产品质量安全问题成为社会公众关注的热点和焦点之一。

1 水产品生产常用兽药

1.1 孔雀石绿

孔雀石绿是一种人工合成的三苯甲烷类抗菌药物，可以有效杀灭水中的真菌、细菌和寄生虫，对寄生虫病、水霉病和小瓜虫病等具有良好的治疗效果。因其成本低廉、抗菌效果好、能提高水产品的存活率，在水产养殖业中被广泛使用[1]。

1.2 硝基呋喃类药物

硝基呋喃类药物是一种广谱抗生素，可以有效抵御革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌以及原虫的侵害[2]，具有较高的抗菌活性、良好的药物稳定性、可靠的治疗效果以及较低的药物消耗量，在养殖业中被用来防控各种动物疾病[3]。

1.3 氯霉素

氯霉素是一种人工合成的抗生素药物，对杀灭革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌具有较好的效果，还能抑制细菌生长，具有成本低、抗菌效果好等优点，可以有效预防和治疗水产养殖中的疾病。此外，氯霉素还具有抗病毒和抗寄生虫的功效，可以全面提高水产养殖效益[4]。

1.4 地西泮

地西泮，是一种苯二氮卓类药物，又叫安定，具有镇定、催眠、抗惊厥、抗癫痫等作用，运输中使用地西泮可以降低水产品新陈代谢，提高水产品鲜活度[5]。

1.5 氟喹诺酮

氟喹诺酮是一类人工合成的广谱抗菌药物，能够有效抑制革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及支原体、衣原体和螺旋体，具有抗菌活性强、代谢活性高、价格低廉等特点，在水产养殖中用来预防和治疗各种动物疾病[6]。

2 兽药残留的危害

2.1 危害人体健康

在水产养殖过程中，养殖户为追求经济效益和治疗效果，滥用和不按休眠期使用药物现象存在，导致水产品中出现兽药残留超标的情况。人们长期摄入带有某些特定兽药残留的食品，会严重危害身体健康，例如不同程度的毒副作用、产生耐药性、肠道菌群失调、免疫系统紊乱等[7]。

2.2 破坏生态环境

不规范超标使用兽药会导致动物体内药物残留，动物排泄物中存在相应的药物残留，会影响附近的水源、土壤和空气，导致生态环境失调。水体中的药物残留会产生抗性菌株，使水体中微生物数量增加，药物残留也在食物链中聚集，最终影响人体健康。

2.3 影响产业发展

养殖户不规范使用兽药会制约水产养殖业的发展，长期使用抗生素药物也使得水产动物免疫力降低，产生耐药性。兽药残留会降低水产品品质，导致市场销售水产品的数量减少、效益降低，同时影响出口量，阻碍水产养殖业的可持续健康发展。

3 兽药残留的原因

3.1 使用不合理

目前从事水产养殖业的主体是农民，大多缺乏专业知识，使用兽药仅凭个人经验，没有专业的兽医进行诊断，对兽药残留的危害认识不足，法律意识淡薄[8]。我国水产品中药物残留超标事件常有发生，一些养殖户为了追求更高的经济效益，滥用和超剂量使用兽药，也有无良企业在饲料中添加禁用药品，导致水产动物体内药物残留超标。

3.2 水质污染导致药物残留

水质对水产养殖至关重要，有些养殖场靠近工业园区，工业生产中“三废”的不合理排放导致许多有害物质进入养殖水源中，造成水体中重金属、药物残留超标，养殖水质污染间接导致水产品药物残留。

4 水产品中兽药残留的检测方法及应用

4.1 胶体金免疫层析法

胶体金免疫层析法（GIGA）是一种抗体和抗原在检测线（T线）和质控线（C线）产生特异性反应，从而在胶体金反应部位沉淀显色的快速检测方法。李倩等[9]采用胶体金免疫层析法对带鱼中氯霉素进行快速检测，结果表明，通过优化前处理方法可以检出与液相色谱-质谱法结果一致的阳性样品，检出限达0.1 μg/kg。丘韶麟等[10]对农贸市场的水产品采用胶体金免疫层析法进行快速检测，其中孔雀石绿阳性检出率高于1.5%，氯霉素、硝基呋喃类代谢物阳性检出率均高于1.0%。宋安华等[11]对农贸市场在售水产品建立胶体金免疫法，对问题较突出的水产品进行兽药残留快速检测，其中孔雀石绿总体不合格检出率为3.69%，氯霉素总体不合格检出率为1.67%，硝基呋喃类代谢物不合格检出率为0.94%。该方法适用于大批量样品快速筛查和市场抽查检测，操作简单易学、耗时短、成本较低且灵敏度高，目前广泛应用于动物兽药残留的快速筛查[12-13]。

4.2 酶联免疫吸附法

酶联免疫吸附法（ELISA）是在免疫学反应的基础上，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合的一种敏感性很高的实验技术。在检测过程中根据酶标孔中颜色的变化及OD值对样品进行定性或定量检测[14]。该方法可用于大批量初筛，具备检测效率高、成本低、灵敏度较高和特异性好等优点[15]。何万义等[16]采用酶联免疫吸附法测定水产品中孔雀石绿药物残留，结果显示，在0～4.05 μg/L的6个标准浓度范围内，线性相关系数达0.998以上，样品加标回收率为88.6%～106.6%，样品和样品加标的相对标准偏差（RSD）小于10%。区兑鹏等[17]对水产品中硝基呋喃类代谢物、氯霉素及氟苯尼考6种药物残留进行快速检测，结果表明，6种药物线性系数均大于0.995，样品加标回收率为60%～144%，相对标准偏差（RSD）均在0～7.5%之间。林品言等[18]应用酶联免疫吸附法对水产品中磺胺类药物残留进行检测，结果显示，在0.5～40.5 μg/L范围内，相关系数达0.998以上，三种添加浓度（0.5 μg/kg、1.0 μg/kg、1.5μg/kg）平均回收率为87.5%～104.2%，相对标准偏差（RSD）小于4.32%。影响酶联免疫法检测的因素较多，实验中容易出现假阳性结果。因此，目前酶联免疫吸附法只能进行样品初筛，阳性样品必须采用高效液相色谱法或液相色谱-串联质谱法进行复核，才能得到更精准的检测结果。

4.3 高效液相色谱法

高效液相色谱法（HPLC）是检测水产品中药物残留最常见的一种方法。随着技术的进步，高效液相色谱仪已经成为各实验室的必备仪器，特别是在市县级检测机构，结合紫外检测器，能够准确地检测处水产品中的兽药残留。葛宝坤等[19]采用高效液相色谱-紫外法（HPLC-UV）检测鱼和虾中呋喃它定、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃唑酮药物残留量，在5～100 μg/kg范围内线性关系良好，检出限分别为5 μg/kg、2 μg/kg、3 μg/kg和2 μg/kg。王媛等[20]研究发现，将水产品进行衍生前处理后，经高效液相-紫外检测器测定，在5.0～500 μg/L质量浓度范围内存在良好的线性关系，定量限均能达到1.0 μg/kg。王明辉等[21]采用高效液相色谱法同时测定贝类中的多西环素和金霉素，研究表明在200～5 000 ng/mL范围内，线性关系良好，相关系数均大于0.99。液相色谱法发展虽比较成熟，但是该方法对样品前处理要求较高，灵敏度和分离度较低，还需要配合液相色谱-串联质谱法进行验证。

4.4 高效液相色谱-串联质谱法

随着技术的进步，高效液相色谱-质谱法（HPLC-MS/MS）已被广泛应用于测定水产品中的兽药残留，并被认为是测定水产品中药物残留含量的有效手段。对比高效液相色谱，质谱的检测器较紫外检测器在准确定性、定量、检测速度、检测限等方面更具优势。吴刚[22]通过液相色谱-串联质谱法测定水产品中AOZ、AHD和SEM药物残留量，结果表明，测定的3种硝基呋喃类代谢物的检出限均为0.2 μg/kg，在10～200 ng/mL范围内线性关系较好。朱欣欣等[23]采用高效液相色谱-串联质谱法对水产品中孔雀石绿和地西泮残留量进行检测，结果表明孔雀石绿、地西泮在0.5～20.0 ng/mL范围内，线性关系好，回收率为82.1%～96.1%，检测低限为0.5 ng/mL，精密度为2.9%～7.8%。杨丽等[24]等采用超高效液相色谱-串联质谱法测定鱼肉中呋喃它酮（AMOZ）、呋喃西林（SEM）、呋喃妥因（AHD）和呋喃唑酮（AOZ）4种硝基呋喃类代谢物残留量，研究发现，硝基呋喃代谢物在0.5～50.0 ng/mL范围内线性关系良好，相关系数大于0.996，检出限均为0.5 μg/kg，3种不同浓度添加水平（0.5 μg/kg、1.5 μg/kg、5.0 μg/kg）的回收率在70%～120%，符合国家标准测定要求。刘少颖等[25]利用超高效液相-串联质谱法测定淡水鱼中喹诺酮类和氯霉素残留含量，结果表明，在0.1～200 ng/mL浓度内线性系数均大于0.99，定量限为0.02～0.49 μg/kg，回收率为67.7%～116.1%，相对标准偏差为2.64%～19.93%，检出限为0.01～0.15 μg/kg。从多个学者的研究结果中可以明显看出，HPLC-MS/MS较HPLC得到了技术上的突破，能满足更低的检测限，线性范围宽，更适用于水产品中各种兽药残留的检测分析。

5 结语

水产品的质量安全关键在养殖环节，如果在养殖过程中不能严格按规定使用兽药，不重视兽药残留潜在的危害性，水产品的质量安全就得不到有效保障。兽药残留不仅会影响水产品质量，而且对人类的健康和生态环境也会造成极大威胁。因此，要加强水产品兽药残留检测，减少兽药残留超标水产品流入市场，以保证消费者买得放心，为水产养殖业的长期健康发展保驾护航。