冰冻切片病理诊断在甲状腺微小乳头状癌患者中的诊断价值及效能影响因素分析

田野

中国人民解放军陆军第七十三集团军医院病理科，厦门 361000

甲状腺微小乳头状癌多指肿瘤＜10 mm 的甲状腺癌，其发生多与遗传因素、放射性刺激、碘元素异常等有关[1]。多数甲状腺微小乳头状癌患者发病初期症状不明显，随访病程的延长，可引起颈部淋巴结肿大，增加临床治疗难度[2]。随着影像技术及甲状腺筛查方法的普及，导致甲状腺结节检出率及手术病例数不断增加[3]。因此，应加强甲状腺微小乳头状癌早期诊断。石蜡切片检查作为甲状腺微小乳头状癌诊断金标准，具有经济、稳定的制片方法和可长久保存等优点，但是该方法仅提示形态改变，且等待结果较长[4]。而冰冻切片病理检查具有准确、可靠及快速等优点，能根据标本快速作出诊断，适用于术中肿块性质的确定[5]。但该方法由于急于快速诊断，取材局限，导致制片质量难以达到常规石蜡切片的清晰度，且诊断效能影响因素较多[6]。本研究主要探讨甲状腺微小乳头状癌患者采用冰冻切片病理诊断的应用效果及效能可能的影响因素。

1 对象与方法

1.1 研究对象 选择2021 年5 月至2023 年8 月中国人民解放军陆军第七十三集团军医院收治的疑似甲状腺微小乳头状癌患者91 例，男32 例，女59 例，年龄42～74 岁，平均（58.38±6.62）岁；体重指数18.6～28.4 kg/m2，平均（22.31±3.16）kg/m2；临床表现：颈部肿块47 例，声音嘶哑29 例，吞咽困难31 例。患者知情同意并签署知情同意书，本研究符合《世界医学会赫尔辛基宣言》。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准 ①均为本院疑似甲状腺微小乳头状癌病例[7]。②均行手术治疗，且患者具有完整的石蜡切片检查结果。③术中采集标本，并完成冰冻切片病理检查。

1.2.2 排除标准 ①严重肝肾功能异常或术前行放化疗者。②其他部位恶性肿瘤或手术治疗失败者。

1.3 方法

1.3.1 术中冰冻切片病理检查 入组病例均接受手术治疗，术中行冰冻切片病理检查，具体方法如下。利用冰冻切片机，设定工作温度-20℃，选择手术过程中得到的甲状腺新鲜组织1～4 块，经快速冻处理后，制备4～5 μm 切片（2 张）。取上述切片组织，置于甲醛下固定1 min，苏木素染色2 min，并将其浸泡在碱水中20 s，待切片返蓝后再次完成伊红染色10～20 s，乙醇冲洗后自然烘干；中性树胶封片后显微镜下观察[8]。

1.3.2 石蜡切片检查 术中冰冻切片病理检查完毕后，术后对患者行石蜡切片检查，取相同部位组织，将其置于甲醛溶液中（10.0%）浸泡，梯度乙醇脱水后，置于二甲苯溶液中透明，浸蜡后包埋。取石蜡组织，制备4～5 μm 切片，并置于二甲苯中，经梯度乙醇冲洗后，完成苏木精-伊红染色，倒置显微镜下观察组织变化。。

1.4 观察指标 ①以石蜡切片检查为金标准，计算冰冻切片病理检查在甲状腺微小乳头状癌患者中的灵敏度（真阳/真阳+假阴性）、特异度（真阴/真阴性+假阳性）、阳性预测值（真阳/真阳性+假阴性）与阴性预测值（真阴/真阴+假阳）。②根据冰冻切片病理诊断与金标准是否符合分为符合组与非符合组，查阅患者一般资料，包括性别、年龄、肿瘤直径、甲状腺钙化、包膜侵犯及多病灶等，对上述可能的影响因素完成单因素及多因素Logistic 回归分析。

1.5 统计分析 采用SPSS 26.0 软件处理，计数资料行χ2检验，采用例数、率（n，%）表示，计量资料行t检验，采用表示，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 冰冻切片在甲状腺微小乳头状癌患者中的诊断效能 91 例疑似甲状腺微小乳头状癌患者金标准检查确诊36 例，确诊率为39.56%。冰冻切片病理检查阳性患者33 例，与金标准检查准确度为87.91%（80/91），诊断灵敏度为80.56%（29/36）、特异度为92.73%（51/55）、阳性预测值87.88%（29/33）、阴性预测值为87.93%（51/58）。见表1。

表1 冰冻切片在甲状腺微小乳头状癌患者中的诊断效能

2.2 甲状腺微小乳头状癌患者冰冻切片诊断效能影响单因素分析 结果表明，冰冻切片检查在甲状腺微小乳头状癌患者中的诊断效能与性别及年龄无统计差异（P＞0.05）；与肿瘤直径、甲状腺钙化、包膜侵犯及多病灶有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 甲状腺微小乳头状癌患者冰冻切片诊断效能影响单因素分析[例（%）]

2.3 甲状腺微小乳头状癌诊断效能多因素Logistic回归分析 多因素Logistic 回归结果表明，肿瘤直径、甲状腺钙化、包膜侵犯及多病灶是影响甲状腺微小乳头状癌患者冰冻切片诊断效能的独立危险因素（P＜0.05）。见表3。

表3 甲状腺微小乳头状癌诊断效能多因素分析

3 讨论

目前，甲状腺微小乳头状癌发病率呈持续上升趋势，由于患者临床表现隐匿、病灶微小等特点，术前难以明确诊断，导致临床误诊及漏诊率较高。甲状腺术中冷冻检查能确定结节的性质，亦可发现术中额外结节，以辅助临床诊疗。本研究中，91 例疑似甲状腺微小乳头状癌患者金标准检查确诊36 例，确诊率为39.56%。冰冻切片病理检查阳性患者33 例，与金标准检查准确度为87.91%（80/91），诊断灵敏度为80.56%（29/36）、特异度为92.73%（51/55）、阳性预测值87.88%（29/33）、阴性预测值为87.93%（51/58），从该结果看出，冰冻切片病理诊断在甲状腺微小乳头状癌患者中检出率较高，能获得的较高的诊断效能，能指导后续诊疗。分析原因：术中病理诊断是医师手术过程中能根据肉眼直视，结合手术方案要求病理医师会诊，诊断时无需特殊的设备和复杂技术，在普通病理科均可开展，能指导患者手术治疗方案的制订。Marina M等[9]研究表明，与石蜡切片检查比较，冰冻切片病理诊断制片时间更短，能获得确诊价值的细胞核特征。刘颖等研究表明[10]，冰冻切片是手术过程中采集组织标本，快速通过组织判断病灶的性质。但是，该检查方法由于缺乏脱水及时间等因素，容易造成乳头状结构不典型、切片中乳头状结构不清晰、细胞形态变化较大。

从上述结果看出，冰冻切片病理诊断在甲状腺微小乳头状癌患者中具有较高的诊断效能，但是其结果受到的影响因素较多。王亚军等[11]研究发现，冰冻切片诊断如何更好的与临床所见吻合，更多的取决于肉眼取材的仔细程度及病理诊断医师在光镜下对于疾病的认知度。本研究中，91 例患者冰冻切片诊断29 例甲状腺微小乳头状癌，单因素及多因素Logistic 回归结果表明，肿瘤直径、甲状腺钙化、包膜侵犯及多病灶是影响甲状腺微小乳头状癌患者冰冻切片诊断效能的独立危险因素（P＜0.05），从该结果看出，冰冻切片病理诊断在甲状腺微小乳头状癌患者中其效能受到多种因素的影响，且不同因素之间能相互联系。①肉眼取材的仔细程度。由于微小乳头状癌位于甲状腺被膜下，常呈星芒状向周围组织浸润性生长，部分患者被纤维组织包裹而呈局限性生长。因此，医师取材过程中应尽可能多剖面的仔细观察、触诊，选择颗粒感、灰白质硬病灶或结节制成切片。②取决于病例诊断医师在光镜下对疾病的认识。甲状腺微小乳头状癌特征性细胞核表现为核内假保涵体、核沟及毛玻璃样核等，且间质出现纤维组织玻璃样改变及砂砾体形成及间质钙化继发性改变。因此，冰冻切片病理诊断时应注意组织切片的选取，提高对甲状腺微小乳头状癌的认识，充分考虑肿瘤直径、病灶严重程度等，以指导手术治疗。但是，本研究中亦存在一定局限性，一方面限于研究时间纳入病例数较少，需大样本量验证；另一方面，数据分析时存在一定偏差，导致研究结果存在偏倚性，均需要进一步研究与探讨。

综上所述，冰冻切片病理诊断用于甲状腺微小乳头状癌患者中阳性率较高，可获得较高的准确性，但是其效能常受到包膜侵犯和肿瘤直径的影响，应采取干预措施降低二次手术率。