说说艾滋病病毒的检测

■胡亮 常东（复旦大学附属浦东医院检验科）

艾滋病是一种病死率很高的传染病，是由人类免疫缺陷病毒（HIV）感染引起的。报告显示，全球目前有3900 万例艾滋病病毒感染者，其中2980 万例正在接受抗逆转录病毒治疗；2022 年新发感染130 万例，63 万人死于艾滋病相关疾病。

艾滋病全称是“AIDS（获得性免疫缺陷综合征）”。从这个名称中我们可以知道艾滋病的3 个重要特征。一是“获得性”，即非原发的，其传播途径主要为黏膜传播，其次是血液和母婴传播。二是该病会导致严重的“免疫缺陷”，人体免疫系统最主要的功能是识别和清除“敌人”，而艾滋病病毒会破坏人体的免疫系统，让人体丧失抵御“敌人”的能力。三是出现“综合征”的表现，因为感染后机体免疫力低下，各种病原体趁虚而入，导致各种感染，也容易发生肿瘤。

AIDS 的诊断需要通过实验室检测结果，结合临床表现并参考流行病学资料进行综合分析。HIV 检测试剂可以根据检测物的不同大致分为：测抗体的试剂、测抗原的试剂和测核酸的试剂。有时也会根据检测试剂的使用特点进行分类，如HIV 抗体快速检测试剂、自测试剂、抗体筛查试剂、抗体诊断试剂和抗体确证试剂等。根据检测的方法和实验室的级别不同，还可以分为初筛试验和确证试验。我们可以用血液、尿液、口腔黏膜渗出液等检测是否有HIV 病毒的感染。

提及HIV 的检测，不得不提一个重要的概念就是“窗口期（window period）”。临床中，有些患者存在高危行为，但检测结果是阴性。这是因为有窗口期的存在，此时仍不能排除HIV 感染的可能。根据我国卫生行业标准《WS 293-2019 艾滋病和艾滋病病毒感染诊断》，窗口期是指从HIV 感染人体到感染者血清中的HIV 抗体、抗原或核酸等感染标志物能被检测出之前的时期。现有诊断技术检测HIV 抗体、抗原和核酸的窗口期分别为感染后的3 周、2 周和1 周左右。

HIV 抗体检测

HIV 抗体一旦产生就终身携带。抗体可以理解为人体免疫系统针对这个病毒生产的“武器”，主要作用就是消灭病毒。用于HIV 抗体检测的主要是一种叫作“酶联免疫吸附试验”的方法，它是利用抗原能够与相应的抗体结合这一免疫学基本原理实现的。这种实验方法经历了一代、二代和三代的发展，敏感性和特异性逐代提高，窗口期也逐代缩短，从约3 个月缩短到约3 周。但要特别注意的是，HIV 感染后到抗体产生前的窗口期抗体检测为阴性。另外，HIV 抗体检测不能诊断小于18 个月龄新生儿的感染。

HIV 检测“窗口期”示意图

HIV 抗体检测的应用场景主要有3 个方面。一是实验室诊断，为了确定个体HIV 感染状况，包括临床检测、自愿咨询检测、根据需要进行的检测等。二是血液筛查，是为了防止通过输血传播HIV 病毒。三是监测HIV 感染率及其变化趋势，包括各类高危人群、重点人群和一般人群。

如果HIV 抗体筛查结果提示有反应性，需要进一步做补充试验，通常采用HIV 抗体确证试验，阳性即可诊断为HIV 感染。补充试验一般在疾控中心进行。医院的检验科一般为初筛实验室，只出具HIV 阴性报告，不出具HIV 阳性报告。

HIV 抗原和抗体同时检测

我们可以简单地把抗原理解为病毒本身的一部分，血液里的抗原比抗体出现的时间要早。HIV 抗原和抗体同时检测，即第四代“酶联免疫吸附试验”，窗口期比单纯抗体检测缩短了约1 周。当然，现在很多实验室用化学发光法检测HIV 的抗原和抗体，其敏感性和特异性更好。

HIV 抗原和抗体同时检测的优势主要体现在以下几个方面。一是缩短了窗口期，感染后14—30 天，感染者的血液具有很强的传染性，抗原检测通常是阳性的，但抗体可能为阴性。二是保证了用血安全，检测出只有抗原阳性但是抗体阴性的窗口期样本是非常有意义的。三是能够用于判断AIDS 感染的分期，HIV 感染者的抗原阳性而抗体阴性，说明是急性期或者是发病期，抗原阴性而抗体阳性，说明是潜伏期。

与抗体检测一样，如果HIV 抗原抗体筛查结果提示有反应性，需要进一步做补充试验，通常采用HIV抗体确证试验。对于抗原有反应但抗体阴性或不确定的，需要进一步做HIV 核酸检测或2—4 周后再次进行检测。

HIV 核酸检测

核酸通常指的就是脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。HIV 的核酸物质是RNA，检测主要包括HIV-RNA 定量（有具体的数值）和定性（只能判断阴性或阳性）检测。核酸检测可用于HIV 感染诊断、血液筛查、病程评估及抗病毒治疗效果监测等。

对于HIV 抗体阴性或不确定，而又有流行病学史，或有艾滋病相关临床表现的人，可通过HIV 核酸定量检测进行诊断，核酸检测可以使窗口期缩短到1 周左右。但是核酸检测结果阴性也不能排除HIV 感染，因为就算是很早能够检测的核酸也存在窗口期。

HIV 核酸检测在某些方面有其独特的优势。比如，对于初筛试验有反应但抗体确证试验不确定，或阴性的疑似AIDS 晚期患者，需通过核酸、临床病史和CD4+T 淋巴细胞计数结果综合判断。核酸检测还可用于采供血机构进行血液筛查。对献血者及采供血机构的血浆进行核酸检测，可及时发现窗口期感染，降低输血感染HIV的风险。对于HIV 感染母亲所生小于18 个月龄的婴儿，不同时间的两次HIV 核酸检测均为阳性即可诊断。

总之，我们要明确一点，HIV 的检测有“窗口期”，哪怕是最早能检出HIV 病毒的核酸检测方法也有1 周的窗口期。而目前我国医疗卫生机构最常用的AIDS 筛查试剂是HIV 抗原抗体和抗体检测试剂，所以建议发生高危行为后至少2 周后再检测。如果在窗口期内检测，HIV 检测结果阴性也不能排除感染的可能，需要再次检测，检测间隔时间一般为2—4 周。99.99%以上的人在发生末次高危行为3 个月后检测还是阴性，就可以排除HIV 感染。如果还是不放心，可以在6 个月或1 年后再次进行检测。若暴露于HIV 高感染风险中，需要24 小时内（最迟不超过72 小时）接受HIV 暴露后预防（PEP）措施，以降低感染风险。