基于网络药理学及分子对接探讨润肝养心方治疗心脏神经症的分子机制

许琳洁，史大卓，马晓娟，黄弘博，张莹

摘要 目的：基于网络药理学和分子对接方法探讨润肝养心方治疗心脏神经症（CN）的物质基础和作用机制。方法：通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）、有机小分子生物活性数据库（PubChem）、Swiss Target Prediction数据库检索并筛选出润肝养心方（麦冬、酸枣仁、柏子仁、炒白芍、当归、五味子、茯苓、炙甘草）的药物活性成分及作用靶点，利用基因名片数据库（GeneCard）、在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）、DisGeNET数据库筛选CN疾病靶点，将药物和疾病靶点两者取交集后获得的共有靶点导入STRING数据库获得蛋白互作关系，应用Cytoscape 3.8.2软件构建蛋白质相互作用（PPI）网络；采用R语言ClusterProfiler程序包（3.18.0）对关键靶点进行基因本体（GO）和京都基因和基因组百科全书（KEGG）富集分析，并利用Cytoscape 3.8.2构建关键靶点-功能-通路图及关键靶点中药药理调控网络；采用AutoDock Tools 1.5.6进行分子对接研究。结果：润肝养心方筛选得到活性成分146个、作用靶点245个、CN及润肝养心方共有靶点如白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）等38个。KEGG富集分析关键靶点主要被富集在神经活性配体-受体相互作用、晚期糖基化终末产物（AGE）-糖基化终末产物受体（RAGE）信号通路、脂质与动脉粥样硬化等信号通路，涉及对异源刺激的反应、管径调节、血管直径维持等生物过程。分子对接验证显示关键靶点与槲皮素、芍药苷、山柰酚的结合活性较好。结论：润肝养心方中主要活性成分可能通过调节IL-1β、IL-6、TNF等关键靶点基因及神经活性配体-受体相互作用、AGE-RAGE信号通路、脂质与动脉粥样硬化等多通路以发挥抗炎、调节神经递质水平等作用治疗CN。

关键词心脏神经症；润肝养心方；网络药理学；分子对接

doi：10.12102/j.issn.1672-1349.2024.04.004

Molecular Mechanism of Rungan Yangxin Recipe in the Treatment of Cardiac Neurosis  Based on Network Pharmacology and Molecular Docking

XU Linjie， SHI Dazhuo， MA Xiaojuan， HUANG Hongbo， ZHANG Ying

Graduate School of Beijing University of Chinese Medicine， Beijing 100029， China; National Clinical Research Center for Chinese Medicine Cardiology， Xiyuan Hospital， China Academy of Chinese Medical Sciences， Beijing 100091， China

Corresponding AuthorZHANG Ying， E-mail： echo993272@sina.com

AbstractObjective：To explore the material foundation and mechanism of Rungan Yangxin Recipe for the treatment of cardiac neurosis（CN） based on network pharmacology and molecular docking method.Methods：Traditional Chinese medicine（TCM） system pharmacology database（TCMSP），PubChem and Swiss Target prediction databases were used to search and screen the active components and action targets of Rungan Yangxin Recipe（ophiopogon japonicus，wild jujube kernel，cypress kernel，fried white peony，angelica sinensis，schisandra chinensis，poria cocos，roasted licorice）.CN disease targets were screened using GeneCard database（GeneCard），Online Human Mendelian Genetic Database（OMIM） and DisGeNET database.The common targets were obtained after the intersection of drug，and disease targets were imported into STRING database to obtain the protein interaction relationship，and the protein interaction（PPI） network was constructed by Cytoscape 3.8.2 software.The gene ontology（GO） and the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG） were enriched and analyzed for key targets using the R ClusterProfiler package（3.18.0）.The key target-function-pathway diagram and the key target pharmacology regulatory network of TCM were constructed by  Cytoscape 3.8.2.Molecular docking was studied using AutoDock Tools 1.5.6.Results：A total of 146 active ingredients and 245 targets were obtained from Rungan Yangxin Recipe.CN and Rungan Yangxin Recipe shared 38 targets such as interleukin（IL）-1β，IL-6，tumor necrosis factor（TNF），etc.The key targets of KEGG enrichment analysis were mainly enriched in neuroactive ligand-receptor interaction，advanced glycation end products（AGE）-receptor for advanced glycation end products（RAGE） signaling pathways，lipid and atherosclerosis signaling pathways，involving biological processes such as response to xenobiotic stimulus，tube diameter regulation，and vessel diameter maintenance.Molecular docking test showed that the key target showed better binding activity with quercetin，paeoniflorin and kaempferol.Conclusion：The main active components of Rungan Yangxin Recipe may play anti-inflammatory and neurotransmitter role for treating cardiac neurosis by regulating key target genes such as IL-1β，IL-6，TNF，neuroactive ligand-receptor interaction，AGE-RAGE signaling pathway，lipid and atherosclerosis and other pathways.

Keywords cardiac neurosis; Rungan Yangxin Recipe; network pharmacology; molecular docking

心脏神经症（cardiac neurosis，CN）又称神经性循环系统功能障碍或焦虑性神经症，是典型的循环系统心身疾病［1］。临床表现以病人主观感受到的心血管和神经系统功能异常症状为主，且伴有明显的焦虑、抑郁等相关症状。由于缺乏实验室证据，临床上CN一般会在有症状、体征较少且无器质性心血管疾病病人中诊断［2］。本病好发于20～50岁中青年，女性多于男性。据相关文献报道，CN临床患病率高达25%～35%［3］，且发病率在全球呈逐年上升趋势［4］。随着人们生活方式的改变及社会竞争的日益激烈，医学模式逐渐向生物-心理-社会医学模式转型，各种心理因素如焦虑、抑郁在循环系统疾病的发生发展及转归中日益受到重视。病人因CN所承受的心理负担及精神痛苦，严重时可影响正常工作和生活，长期发展将进一步加重心血管器质性疾病［5］。

由于CN的发病与精神、神经-内分泌、循环及神经递质受体基因表达等均有密切联系，且目前对其发病机制、临床特征和治疗方法认识尚不完善，因此，现代医学仅以心理治疗辅助药物对症治疗（如镇静剂、β-受体阻滞剂、维生素及抗焦虑抑郁剂等），但尚无疗效明确药物，整体效果欠佳，不能很好地预防和控制CN的发生发展。中医学虽没有心脏神经症的病名，但根据其临床特征可按“惊悸”“胸痹心痛”“郁证”“脏燥”等进行诊断和辨证论治［6］。通过本课题组长期临床实践发现，自拟润肝养心方（药物组成：麦冬、酸枣仁、柏子仁、炒白芍、当归、五味子、茯苓、炙甘草）治疗CN的整体有效率达86.48%，能明显改善病人胸闷、心慌、气短、焦虑等症状［7］，作用安全且耐受性高，可有效改善症状或恢复其社会功能。但目前润肝养心方治疗CN的具体作用靶点尚不明确。

网络药理学的诞生和发展为探究中药成分的药理机制、复方干预疾病的分子机制提供了新思路［8］。通过构建成分-靶点-通路-疾病网络，从系统和整体角度探求中药治疗疾病的物质基础和分子机制，这在很大程度上与中医的整体观念相契合［9］。故本研究通过网络药理学对润肝养心方治疗CN的靶点进行预测，初步探究其作用机制，以期对其治疗CN的分子机制进行全面剖析，为本方在临床的应用提供科学依据。

1资料与方法

1.1药物活性成分筛选及靶点预测

通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP，https：//old.tcmsp-e.com/index.php）、TCM-ID数据库（http：//bidd.group/TCMID/index.html）分别对麦冬、酸枣仁、柏子仁、白芍、当归、五味子、茯苓、炙甘草的活性成分进行检索，结合文献挖掘，获得此复方的成分信息。同时，以口服生物利用度（oral bioavailability，OB）≥30%及药物相似性（drug-likeness，DL）≥0.18为过滤条件［10］，筛选出此8味中药的活性成分。将筛选得到的化合物分别输入至TCMSP、有机小分子生物活性数据库（PubChem，https：//pubchem.Ncbi.nih.gov/search/），前者预测出化合物的潜在蛋白靶点，后者获得化合物的简化分子线性输入规范（SMILES表达式）。将获取的SMILES表达式输入到Swiss Target Prediction数据库（http：//www.Swisstargetprediction.ch/），限定物种为人（homo sapiens），筛选出可能性（probability）＞0.8的靶点。类似的利用STITCH数据库（http：//stitch.embl.de/），通过SMILES表达式预测出相似性评分（tanimoto score）＞0.9的潜在靶点。整合上述预测出的蛋白靶点，利用UniProt（http：//www.uniprot.org/）数据库，设定属性为人，将靶点转化为基因官方名称（official gene symbol）。

1.2疾病潜在靶点筛选

使用基因名片数据库（GeneCard，https：//www.genecards.org/）、在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM，https：// www.omim.org/）和DisGeNET（https：//www.disgenet.org/）数据库预测关键词“cardiac neurosis”的相关疾病靶点，其中GeneCards数据库筛选条件为相关性分数（relevance score）≥20。再根据文献挖掘补充未预测到的活性成分的已知靶点，整理并剔除重复靶点，将疾病靶点与中药成分潜在靶点取交集，获得润肝养心方治疗CN的作用靶点。

1.3交集靶点的蛋白质相互作用（protein-protein interaction，PPI）网络构建

PPI是指从生物化学、信号转导和遗传网络的角度研究化合物和疾病相关蛋白质分子之间的相关性。通过应用Excel 2016软件，筛选出润肝养心方及CN的共有靶点，运用R语言Venn Diagram包（1.6.20）绘制韦恩图。将交集关键靶点导入STRING（https：//string-db.org）软件［11］中，选择物种为“智人”，设置靶点关联的置信度为0.40（confidence＝0.40）。然后，采用Cytoscape（3.8.2）软件对PPI网络图进行美化，并根据节点大小和颜色深度反映其连接度大小［12］。

1.4交集靶点基因的基因本体（gene ontology，GO）和京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析

GO系统包含生物学过程（biological process，BP）、分子功能（molecular functions，MF）、细胞组分（cellular components，CC）3个部分。对关键靶点做GO功能注释和KEGG通路，挖掘各基因所代表的生物学意义。使用R语言Cluster Profiler包（3.18.0）对关键靶点进行基于GO及KEGG的富集分析（P＜0.05），并使用enrich plot包（1.10.2）绘制条形图及气泡图对富集结果进行可视化。

1.5交集靶点-功能-通路调控网络

1.5.1交集靶点-功能调控网络

将GO富集结果BP、CC和MF按P值从小到大排序，分别取前20个条目及其对应的关键靶点展示，构建交集靶点-功能调控网络图，并使用Cytoscape 3.8.2进行可视化。

1.5.2交集靶点-通路调控网络

将KEGG通路富集结果按P值从小到大排序，取前50位的通路及其对应的靶点，构建交集靶点-通路调控网络图，并使用Cytoscape 3.8.2进行可视化。

1.6交集靶点中药药理调控网络

通过提取交集靶点对应活性成分，构建中药药理调控网络，并使用Cytoscape 3.8.2进行可视化。

1.7核心靶点分子对接

从PDB（https：//www.rcsb.org/）数据库得到靶点蛋白的三维晶体结构，并且去除其原本带有的小分子及水分子，通过AutoDock Tools（1.5.6）完成蛋白质加氢、计算电荷。从TCMSP数据库下载活性成分三维结构，并且使用AutoDock Tools对小分子进行电荷平衡、可旋转的键检查。后根据受体活性中心选择对接盒子的范围。最后，使用AutoDock vina计算受体、配体对接，选择输出结果中结合自由能最低的结构（结合亲和力最高）。最后利用PyMol 2.4.1软件进行可视化及美化。

2结果

2.1润肝养心方活性成分筛选及靶点预测

通过查阅TCMSP、TCM-ID数据库及检索文献，查找出润肝养心方8味中药活性成分数量：酸枣仁33个，柏子仁28个，白芍85个，当归125个，五味子39个，茯苓34个，甘草280个，由于麦冬未收录在TCMSP数据库中，因此，在TCM-ID数据库中获得麦冬活性成分14个。并按照设定的阈值（OB≥30%，DL≥0.18），在TCMSP数据库中筛选复方的活性成分，剔除重复后共得到146个活性成分，OB值排名前30位的化合物见表1。并根据TCMSP、PubChem、Swiss Target Prediction、STITCH数据库得到117个（29个成分无作用靶点）活性成分作用的245个药物潜在靶点。

2.2CN潜在靶点预测

通过GeneCards、OMIM和DisGeNET数据库预测关键词“cardiac neurosis”的相关疾病靶点，共预测得到244个靶点。将上述获得的药物靶点与疾病靶点取交集，最终得到润肝养心方治疗CN的共用靶点38个，并通过R1.6.20绘制Venn图。结果见图1。

2.3交集靶点的PPI网络构建

通过STRING数据库对38个交集靶点进行PPI网络构建，共得到38个蛋白互作关系，包括38个节点、215条边，见图2。使用节点的连接度（Degree）识别交集靶点基因，其中，白细胞介素（IL）1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）在网络中处于重要位置。详见图2。

2.4交集靶点GO功能富集和KEGG通路富集分析

使用Cluster Profiler中默认背景基因集，共富集到1 089条GO过程（P＜0.05 & count＞2），其中BP 937个，CC 107个，MF 45个，润肝养心方干预CN涉及对异源刺激的反应、管径的调节、血管直径维持等生物学过程。KEGG富集到90条通路（P＜0.05 & count＞2），关键通路包括神经活性配体-受体相互作用、晚期糖基化终末产物（AGE）-糖基化终末产物受体（RAGE）信号通路、脂质与动脉粥样硬化等。详见图3、图4。

2.5交集靶点-功能-通路调控网络

2.5.1交集靶点-功能调控网络图

共包含60个GO条目、37个交集靶点、388个关系对。详见图5。

2.5.2交集靶点-通路调控网络图

共包含50条KEGG通路、36个交集靶点、296个关系对。详见图6。

2.6交集靶点中药药理调控网络

共包含润肝养心方8味中药、药物活性成分95个、交集靶点38个、249个关系对。详见图7。

2.7分子对接结果

挑选PPI网络中连接度最高的3个靶点IL-1β、TNF、IL-6为核心靶点与活性成分槲皮素（quercetin）、芍药苷（paeoniflorin）、山柰酚（kaempferol）进行分子对接。从PDB下载以上3个靶点对应的晶体结构，选择IL-1β对应的晶体结构PDB ID为5R8Q，IL-6对应的为1ALU，TNF对应的为5UUI。一般认为对接结合能越低，配体与受体结合的构象越稳定［13］，结合能＜0提示配体与受体可自发结合［14］，本研究选择20次对接结合能最低的构象绘制。IL-1β、TNF、IL-6与活性成分槲皮素、芍药苷、山柰酚的分子对接模式见图8。图中绿色环状模型为活性分子，活性分子附近的青色棍棒结构是与其有氢键相互作用的氨基酸残基，黄色虚线为活性分子和氨基酸残基之间形成的氢键。

3讨论

CN是心血管系统疾病的一种特殊类型，发病机制复杂且尚未完全阐明，但目前认为焦虑等精神心理因素在CN发病中起重要作用［15］。本病因焦虑、抑郁等精神心理因素、外界环境刺激、机体极度疲劳、压力过大等引起交感神经、迷走神经功能紊乱，进而导致心脏自主神经功能紊乱而诱发，但无器质性病变。病人神经类型可分为抑郁、焦虑、忧愁型［16］。因此，CN病人在出现心慌、气短、心前区疼痛、胸闷、心率增快等心血管临床症状的同时，还伴有明显的焦虑、抑郁相关表现，且症状轻重与情绪波动关系密切。有研究认为，CN在伴有焦虑和抑郁障碍时，症状的发作与去甲肾上腺素（NE）和5-羟色胺（5-HT）等中枢神经递质功能障碍紧密相关［17］。

中医学对CN 的认识可归属于“胸痹”“惊悸”“郁证”等范畴［6］，认为其病位在心，与肝、脾、肾密切相关。《素问·灵兰秘典论》曰：“心主身之血脉”“心者，君主之官也，神明出焉”“心主血，精神之所舍也”，心之血脉不通则发为胸闷、胸痛、心悸，心主神明失司则出现忧愁、焦虑，肝主疏泄，调畅情志，心、肝二脏与精神情志病变关系密切。本病或由先天禀赋薄弱、久病、心劳过度等内因造成气血阴阳亏虚，或由情志失调等外因引发，尤与情绪关系密切，《黄帝内经》云：“余知百病生于气也，怒则气上……惊则气乱，思则气结”。本病病机为心失所主、肝失疏泄，或肝郁脾虚、心肝阴虚、肝肾阴虚。各种外界影响导致情绪不畅，肝失疏泄，肝气郁结，发为胸闷、气短、焦虑、抑郁；或过劳体虚，气血亏损，心耗过度，心血失调，出现心悸、失眠、乏力；“肝木克脾土”，肝郁乘脾，脾失健运，运化失调，气血无以生化，气血两虚，心神失养，则心神不宁，心悸、失眠；后期精血渐耗，穷必及肾，出现心肝阴虚、肝肾阴虚之证。因此，治疗应以疏肝健脾、养心安神为法。近10年来，本课题组通过对CN的中医证候规律及有效药物进行相关研究分析，自拟润肝养心方治疗CN，整体有效率达86.48%［7］。本方在改善病人心悸、乏力、气短、胸闷、胸痛等临床症状的同时，对焦虑、抑郁相关精神症状疗效亦佳，且安全、病人耐受性高。全方润肝敛阴、养心宁神。方中酸枣仁味酸甘，入心、脾、肝、胆四经，功效润肝宁心安神；柏子仁归心、肾、大肠经，养心安神兼顾敛汗护阴，两药合用，能滋润肝阴之不足、颐养心神之不安。麦冬滋阴清热；当归、炒白芍补血润燥；五味子敛心气、安心神；茯苓、炙甘草补益心脾。

本研究通过网络药理学，借助多种生物信息学数据库及Cytoscape软件等构建了润肝养心方治疗CN的成分-靶点-通路-疾病网络及PPI网络，并对核心靶点进行了分子对接，共筛选得到润肝养心方药物活性成分146个、作用靶点245个，本方通过IL-1β、IL-6、TNF等38个共有靶点与CN相互作用。IL-1β、IL-6及TNF为机体重要的炎性因子，诱导炎症反应［18］。随着对炎性因子与CN关系的不断研究，认为亚临床炎症反应与自主神经功能紊乱关系紧密，其机制可能与自主神经系统可有效调节炎症反应、释放神经递质激活淋巴网状内皮细胞及炎症细胞有关［19］。IL-6、IL-1β具有调节免疫、参与机体信号传递等作用，TNF-α能反映机体非特异性炎症反应，目前已被证实在心脑血管疾病的发生发展中发挥重要作用，还可通过影响神经递质系统，参与抑郁的发生发展［20］。临床研究显示，CN病人体内TNF-α水平较健康对照组明显增高（P＜0.05），存在异常增高的炎性反应及内皮功能受损［21］。申永辉等［22］研究发现，抑郁症病人经选择性5-羟色胺再摄取抑制剂（selective serotonin reuptake inhibitors，SSRI）类药物治疗后，血清炎性细胞因子水平明显下降（P＜0.05），抑郁症状显著改善。因此，炎症反应能够加速自主神经病变的发生发展，在CN的发病中作用亦不可小觑，可以推测，润肝养心方有效治疗CN可能与通过IL-1β、IL-6、TNF等靶标抑制炎性因子和炎性介质的产生从而发挥抗炎作用相关。5-HT转运体（5-HTT）编码基因SLC6A4在多种精神心理疾病的发生发展中作用较大［23-25］，SLC6A4编码细胞膜上的5-HTT，5-HTT将突触间隙的5-HT回吸收突触前膜，降低突触间隙5-HT浓度，参与调控神经元间兴奋的传递。5-羟色胺能神经元广泛分布于下丘脑、垂体、肾上腺等人脑与社会情感压力感知、维持、控制相关的区域［26］，与情绪调控、精神心理密切相关［27］。5-羟色胺能突触与5-HT密切相关，中枢神经系统5-HT含量及功能异常会导致抑郁、焦虑等精神类疾病。Wankerl等［28］研究发现，五羟色胺转运体基因（5-HTTLPR）、早期逆境相应的SLC6A4表达改变通过影响5-HT系统来传达不同的疾病易感性。多巴胺（DA）是一类使机体产生愉悦感的神经递质，在中枢神经系统疾病的治疗中起重要作用，通过多巴胺受体调节如奖赏、成瘾、记忆、新陈代谢和激素分泌等多种生理过程。多巴胺受体D1（DRD1）是多巴胺受体两个亚家族之D1类受体的一种，可增强神经元兴奋性，参与个体快感的维持［29］。DRD1和多巴胺受体D5（DRD5）通过激活Gs/Golf和刺激环磷酸腺苷（CAMP）的产生，调节中枢神经系统奖赏、运动和认知，并在外周组织发挥有益的作用，包括抑制炎症反应和维持心血管和肾脏的动态平衡。神经受体假说认为，抑郁症与DRD1等多巴胺受体异常表达密切相关［30］，而CN的抑郁相关表现可能也与DRD1有关。根据本研究结果，可以推测润肝养心方活性成分治疗CN有可能通过SLC6A4、DRD1等靶点调节机体神经递质的分泌，改善病人焦虑、抑郁等相关临床症状。

本研究通过GO及KEGG富集分析共得到润肝养心方治疗CN的神经活性配体-受体相互作用、AGE-RAGE信号通路脂质与动脉粥样硬化等信号通路，涉及对异源刺激的反应、管径调节、血管直径维持等生物过程。润肝养心方治疗CN主要作用于5-羟色胺受体2A（HTR2A）、5-羟色胺受体3A（HTR3A）、去甲肾上腺素转运蛋白基因SLC6A2、钠依赖型多巴胺转运蛋白基因SLC6A3、5-HT转运蛋白基因SLC6A4、DRD1、IL-6、IL-1β等关键靶点，通过神经活性配体-受体相互作用通路、AGE-RAGE信号通路对神经递质水平和炎症反应进行调节。神经活性配体-受体相互作用信号通路的受体有4类，分别为A类（视紫红质样）、B类（分泌素样）、C类（亲代谢性谷氨酸盐/外激素）和离子通道/其他受体，当出现焦虑时会导致A类受体表达下调［31］。实验研究显示，小鼠SLC6A2基因敲除后，缺乏去甲肾上腺素转运体，可导致抗应激行为［32］；另有研究表明，SLC6A2、SLC6A3等基因的交互作用可能与中国汉族人群抑郁的发病相关［33］。AGE-RAGE信号通路在细胞的生长、增殖、凋亡和迁移等方面发挥重要作用［34］，此通路的激活可通过调节炎性因子的产生，诱导炎症和氧化应激反应［35］。越来越多研究表明，炎症、氧化应激反应还可导致神经细胞损伤，是抑郁症、焦虑症发病机制中的关键环节［36-37］。因此，润肝养心方可能通过调节神经活性配体-受体相互作用、AGE-RAGE 信号通路达到治疗CN的目的。

通过分子对接验证显示，润肝养心方及CN共有关键靶点IL-6、IL-1β、TNF与槲皮素、芍药苷、山柰酚的结合活性较好。槲皮素是黄酮类化合物六大亚类之一，广泛存在于黄芪、川芎等多种中药中，通过保护机体神经和血管［38］，降低心血管疾病发病率和死亡率，具有抗氧化、抗凋亡、降脂、抗炎、免疫调节及保护心肌缺血-再灌注损伤等功能［39-41］；芍药苷是芍药中的主要活性成分之一，是一种双向抗炎免疫调节药，可降低慢性束缚应激肝郁脾虚证焦虑模型大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α水平，有效改善焦虑、抑郁［42-44］，还具有解痉镇痛、解热、抗凝血、调节血脂、改善神经突触可塑性损伤等作用［45］。山柰酚为白芍主要活性成分，亦具有抗炎［46］、抗氧化［47］、抗癌［48］、抗骨质疏松［49］等作用。另外，槲皮素、山柰酚均可抑制单胺氧化酶活性［50］，可增加脑内去甲状腺素（NE）、5-HT、多巴胺等单胺类神经递质水平而发挥抗抑郁作用。因此，可以推测润肝养心方可能主要通过槲皮素、山柰酚、芍药苷等活性成分治疗CN，并同时改善焦虑、抑郁等相关症状。

4小结

本研究通过网络药理学和分子对接方法，初步得到润肝养心方通过干预IL-1β、IL-6、TNF等多靶点及神经活性配体-受体相互作用、AGE-RAGE信号通路等多通路，发挥抗炎、调节神经递质水平等作用治疗CN，同时还可改善CN病人显著的焦虑、抑郁等临床症状。本研究为临床应用润肝养心方治疗CN提供了理论依据，但限于网络药理学和分子对接的局限性，今后尚需进一步实验验证。

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（收稿日期：2022-10-21）

（本文编辑邹丽）