羊副结核病的诊断及防控

2024-03-25陈琼琰傅雯婕

畜禽业 2024年1期

陈琼琰,傅雯婕

1.甘肃省定西市安定区畜牧兽医局称钩驿畜牧兽医站,甘肃安定 743000 2.甘肃省定西市安定区畜牧兽医局,甘肃安定 743000

0 引言

羊副结核病的致病原是副结核分枝杆菌,这种细菌是一种革兰氏阳性杆菌,具有较强的耐酸性,是禽型分枝杆菌复合体的成员之一,属于禽分枝杆菌副结核亚种。该病多呈现隐性感染,潜伏期长,传播迅速,呈全球性分布,是一种危害动物健康的重大疫病,同时也是导致羊养殖效益低的重要原因之一。目前,羊副结核病尚无特效治疗药物,一旦发生该病,需要将患病羊直接淘汰,并加强羊群净化,才能减少后续的养殖损失。

1 病原学

羊副结核病的致病原是副结核分枝杆菌,这种杆菌的形态以杆状、棒状为主,没有荚膜、芽孢以及鞭毛,所以无法自主运动。副结核分枝杆菌是一种需氧菌,适宜培养温度为37 ℃,适宜培养pH为6.7～7.1。在副结核分枝杆菌的细胞壁中,含有类脂成分,所以较难被染色。禽型分枝杆菌的菌落表面并不光滑,整体呈颗粒状、比较粗糙,菌落的颜色为乳酪色或黄色。禽型分枝杆菌可通过抗酸染色,染色结果为红色。

禽型分枝杆菌有着较强的外界适应能力,即使没有宿主存在,自身也可以在自然界中长期存活,最长存活时间可达1年之久。禽型分枝杆菌对高温环境较敏感,在60 ℃条件下,禽型分枝杆菌只能存活约30 min。禽型分枝杆菌初代培养的难度较高,这是因为体外培养缺少这种细菌生长需要的草分枝杆菌素,所以在实际培养时,需要注意添加这种草分枝杆菌素,才能成功培养。与其他杆菌相比,禽型分枝杆菌的生长速度较慢,完成1次禽型分枝杆菌培养至少需要6周[1]。禽型分枝杆菌对哺乳动物尤其是反刍动物有着较强的易感性,例如牛、羊都较容易感染禽型分枝杆菌,患上副结核病。与牛感染禽型分枝杆菌相比,羊在感染禽型分枝杆菌后,潜伏期更长,且早期较多羊均为隐性感染,不易察觉,较容易被误诊或者忽略,这进一步增加了羊副结核病的防控难度。

2 流行特点

副结核病较容易感染牛、羊,与成年羊相比,羔羊有着更强的易感性。患病羊以及隐性感染羊是主要的感染源。羊在患上副结核病后,在排出的粪便中,通常会包含大量的致病菌,这些致病菌还会污染羊饲养工具、饲料、水源等,造成更大范围的传播,所以粪口传播以及接触性传播是羊副结核病的主要传播途径。副结核病的病原主要通过消化道侵入羊的肠道绒毛膜以及肠系膜淋巴结,引起羊肠道炎症,不仅如此,病原菌也会入侵血液,然后从乳汁中排出,因此,若母羊患有副结核病,那么羔羊以及腹中的胎儿也会患有副结核病。副结核病流行没有明显的季节性,一年四季均会出现。但春季、秋季较为常见,整体呈散发性流行。从生产实践来看,副结核病传播相对较慢,所以整体呈散发性、地方性流行。尤其是在羊交易较为频繁的地区,更容易流行传播。

3 症状表现

羊副结核病有着较长的潜伏期以及隐性感染期,潜伏期能够达到数年,且在隐性感染期间,羊没有明显的症状表现,这会进一步增加了羊副结核病的诊断难度。羊发病后精神萎靡、食欲减退,如果是母羊,可发现其泌乳量明显减少且被毛粗乱失去光泽。随着病情的发展,羊症状表现会越来越重,并开始出现腹泻症状,排出水样性粪便,在粪便中,可发现有一些泡沫与黏液。在羊副结核病进入后期,腹泻症状表现越来越严重,且腹泻的次数不断增加,在羊的颌下、腹部下方,可发现有水肿情况。由于羊经常腹泻,导致身体虚弱,活动意愿下降,经常卧地不起。肛门、尾部以及身体容易沾染粪便,造成严重的污染。伴随着腹泻,羊食欲基本废绝,身体快速消瘦,抵抗力低下,很容易继发感染其他疾病,使病羊的死亡率增加。羊副结核病的发病过程从初期到末期,历经较长时间,表现出慢性消耗性的症状特点,最终病羊会因为身体衰竭或继发感染其他疾病死亡。

4 病理剖检

观察病死羊可见,羊身体消瘦、体毛凌乱,肉眼观察羊的各个组织器官,没有明显的病变表现。通过对病死羊进行剖检可见羊小肠内部有明显的皱褶,褶皱的形态类似脑回样,内部有明显的充血现象,羊的肠道黏膜增厚,颜色变成异常的灰白色或黄绿色。剖检羊的回肠、空肠等处,也发现了上述病变情况,但整体的病变程度没有小肠部位的病变程度严重。羊的肠系膜淋巴结肿胀明显,整体呈浆液性浸润。总之,羊副结核病的特征性病理变化主要集中在肠道,主要表现为脂肪萎缩、慢性增生性肠炎和肠系膜淋巴结增生性炎。

5 诊断

5.1 皮肤变态反应

皮肤变态反应作为一种副结核病诊断方法,主要是利用迟发性皮肤变态反应原理,本质上是一种细胞免疫检测诊断手段。在具体进行检测诊断时,需要采用副结核菌素注入羊颈部左侧中上1/3处的皮内,注入量为0.1 mL,且副结核菌素经过了提纯[2]。最后进行观察分析,查看注射皮肤部位是否出现了局部炎症反应以及皮厚差,如果出现了炎症反应,皮厚差在3 mm以上,说明患病羊为阳性。这种皮肤变态反应检测诊断方法只适合早期感染羊副结核病以及处于隐性感染羊副结核病的诊断。如果羊在患有副结核菌病后,已经过了潜伏期,处于发病阶段,采用这种检测诊断方法,羊的皮肤变态反应可能会消失,从而造成误判,并且皮肤变态反应诊断方法的特异性、敏感性均较低,较难辨别是自然感染还是免疫因素所导致。

此外,在自然环境中,羊副结核病的副结核分枝杆菌病原可能与其他分枝杆菌存在共同的抗原,所以较容易出现非特异性反应,且在实际应用时,还需要对羊进行保定处理,实际操作难度也较大,费时费力,检测结果具有一定不确定性,所以并不适于大规模检测,仅限于疑似病例、早期感染以及隐性感染病例诊断应用。

5.2 细菌学诊断

在采用细菌学诊断方法时,可通过对样本进行处理,然后直接采用显微镜进行检查,分析样本中的病原菌是否符合副结核分枝杆菌的特点。这种检测诊断方法较适合羊副结核病亚临床期以及发病时期。在镜检时,选择患病羊的粪便作为检测样本,然后进行抗酸染色,在光学显微镜下,如果样本中确实存在副结核分枝杆菌,那么细菌经抗酸染色后,颜色为红色,细菌的形态为短杆状或球杆状。这种细菌学诊断检测方法实际操作并不复杂,需要的仪器设备装置数量少,检测成本低,可以在短时间内快速得出结果。但这种检测诊断方法敏感性低,且无菌条件很难控制,容易受到其他抗酸菌的干扰,会在一定程度上影响检测诊断结果的准确性,所以并不适合大规模批量检测诊断应用。

除了通过染色镜检观察外,还可采用细菌分离培养方法进行检测诊断,通过获取羊粪便样本进行细菌分离培养。这种检测诊断方法特异性较高,但敏感性不稳定,较容易受细菌脱落程度的影响。并且通过上文叙述可知,副结核分枝杆菌是一种典型的慢性生长菌,初代培养不仅需要耗费大量的时间,而且分离十分困难,需要满足体外培养草分枝杆菌素的要求,整体的技术要求高、实验周期长。因此,在实际应用中,在没有特殊要求的情况下,不建议采用细菌分离培养的方式诊断羊副结核病。

5.3 酶联免疫吸附试验

在采用酶联免疫吸附试验诊断检测羊副结核病的过程中,最为常用的方法是酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。通过该诊断检测方法,可检测出病羊血液、血清以及乳液中的副结核分枝杆菌抗体。该检测诊断方法的实际操作十分简单,检测速度快,检测条件要求不高,灵敏性、特异性强,因此适合大规模血清学检测诊断或者流行病学调查。

5.4 分子生物学诊断

目前由于副结核分枝杆菌基因组中的IS900片段具有菌种特异性,所以可利用IS900片段,开展分子生物学检测。例如可应用PCR技术检测出副结核分枝杆菌的特异性基因,可实现副结核分枝杆菌亚型分型,并采用PCR检测诊断技术,同样有着十分高的特异性和敏感性,实际检测的效率高,检测结果不受外部条件的干扰,实际检测结果比较可靠,所以适合大规模羊副结核病检测诊断[3]。

6 防控措施

目前,羊副结核病并没有有效的药物治疗方法,所以在防控的过程中,一旦发现阳性个体,需要及时淘汰。病死羊应集中进行焚烧或深埋,做好无害化处理工作。此外,在实际进行羊副结核病防控时,还应采取以下措施。

6.1 隔离与消毒

在发现疑似患有羊副结核病的羊后,一方面,应加强诊断检测,尽快确诊;另一方面,还需要及时隔离饲养。在确诊疑似病例后,须及时淘汰处理病羊。同时针对发现患病羊的羊舍,做好全面的消杀处理。首先,应将羊舍内的粪尿彻底打扫干净,将粪尿统一运往外部进行高温发酵处理;然后,对整个羊舍进行清水喷洒,全面清洁;最后,采用消毒液进行喷洒消毒,药液用量为1 L/m2。针对墙壁、羊舍饲养工具等,可采用3%氢氧化钠喷洒和刷洗,再用清水冲洗干净,待干燥后,用0.5%过氧乙酸喷洒消毒。此外,可采用10%漂白粉、3%来苏儿、5%热草木灰等作为消毒剂,不同消毒剂交替使用,可更好地保证消毒清洁效果[4]。

6.2 自繁自养

由于羊副结核病带来的危害较严重,所以养殖户应遵循自繁自养原则,可杜绝外来疫病的传入。如果条件不允许,需要从外部引入种羊,一方面,不能从羊副结核病流行的地区引入种羊;另一方面,在引入种羊后,还需要加强隔离检疫,隔离时期不少于1月,须在确保无疾病问题后才能混群饲养。

6.3 饲养与管理

在羊饲养过程中,应提供优质全价饲料,精饲料与粗饲料应合理搭配,保障饮水清洁,不提供发霉饲料。在合理饲喂的基础上,还应在饲料中配给骨粉、矿物质和微量元素(铁、铜、硒),确保羊营养摄入均衡全面[5]。在后续管理方面,应注重营造良好的养殖环境,要求圈舍通风干燥、饲养密度合理。加强对羊应激因素的预防,例如注意关注外部天气变化,加强保暖通风,加强羊舍栏舍防护,避免犬类动物闯入,减少不良应激因素。通过采取上述管理措施,确保羊只具备良好的营养状态,避免造成应激,进一步增强羊只免疫力,从而有效避免羊副结核病发生。