五味消渴方对2型糖尿病患者肠道菌群及炎症因子的影响

单亮亮 姚芳 叶渊渊 方水林

[摘要] 目的 探討五味消渴方对2型糖尿病患者肠道菌群及炎症因子的影响。方法 选取嘉兴市中医医院住院治疗的2型糖尿病气阴两虚证患者92例，随机分为治疗组和对照组46例。对照组采用基础治疗+二甲双胍，治疗组在对照组基础上联用五味消渴方，观察对比两组临床疗效、肠道菌群和炎症因子水平变化。结果 两组患者分配均衡，基线状况良好，可比性强。治疗后，治疗组和对照组的总有效率分别为91.30%、78.26%，治疗组优于对照组（P<0.05）；治疗后，治疗组患者的拟杆菌、乳杆菌以及双岐杆菌群数量均高于对照组（P<0.05）；肠球菌、肠杆菌以及酵母菌群数量均低于对照组（P<0.05）；治疗后，治疗组肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、C反应蛋白水平降低均较对照组更明显（P<0.05）。结论 五味消渴方有助于改善患者的临床症状，调节肠道菌群，降低炎症因子水平，且具有较好的安全性。

[关键词] 2型糖尿病；五味消渴方；肠道菌群；炎症因子

[中图分类号] R255.4    [文献标识码] A     [DOI] 10.3969/j.issn.1673-9701.2024.05.016

Effects of Wuwei Xiaoke Fang on intestinal flora and inflammatory factors in type 2 diabetes mellitus patients

SHAN Liangliang， YAO Fang， YE Yuanyuan， FANG Shuilin

Department of Endocrine， Jiaxing Hospital of Traditional Chinese Medicine， Jiaxing 314000， Zhejiang， China

[Abstract] Objective To explore the effect of Wuwei Xiaoke Formula on intestinal flora and inflammatory factors in patients with type 2 diabetes mellitus. Methods A total of 92 cases of type 2 diabetes patients with Qi-Yin deficiency syndrome were selected and randomly divided into treatment group （n=46） and control group （n=46）. The control group was treated with basic treatment + metformin， and the treatment group was treated with Wuwei Xiaoke formula on the basis of the control group. The clinical efficacy， intestinal flora and inflammatory factor levels of the two groups were observed and compared. Results The two groups of patients were evenly distributed， with good baseline status and strong comparability. After treatment， the total effective rate of 91.30% in the treatment group was higher than that of 78.26% in the control group （P<0.05）. After treatment， the number of Bacteroides， Lactobacillus and bifidobacterium groups in treatment group was higher than that in control group （P<0.05）. The numbers of enterococcus， enterobacter and yeast were lower than those in control group （P<0.05）. After treatment， the levels of tumor necrosis factor-α（TNF-α）， interleukin-6 （IL-6） and C-reactive protein （CRP） in the treatment group were decreased more significantly than those in the control group （P<0.05）. Conclusion Wuwei Xiaoke formula is helpful to improve the clinical symptoms of type 2 diabetes patients， regulate the disorder of intestinal flora in patients， reduce the level of inflammatory factors， and has good safety.

[Key words] Type 2 diabetes mellitus; Wuwei Xiaoke Fang; Intestinal flora; Inflammatory factor

2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）及其并发症严重威胁患者的生命和生活质量，给患者个人、家庭乃至社会造成严重的经济负担[1]，据糖尿病联盟（International Diabetes Federation，IDF）一项调查研究显示，2021年全球20～79岁人群中糖尿病患者人数已达5.366亿人，如何有效防治2型糖尿病仍是全球学者关注的热点[2]。研究表明，肠道菌群与糖尿病的发生、发展有着密切的联系，其不仅调控机体的脂肪与能量代谢，一旦失调会引发全身性的低度慢性炎症反应，从而导致胰岛素抵抗[3-4]。2型糖尿病患者血糖升高可能与肠道菌群结构发生改变有关，双歧杆菌等有益菌群的比例减少与血糖水平升高相关性大[5]。五味消渴方在前期临床应用中被证实有较好的降血糖及改善临床症状的作用[6]，五味消渴方作为复方中药，其作用机制尚未阐明，但发现其组成药物的药理活性成分及提取物有改变肠道菌群的作用。本研究观察五味消渴方对2型糖尿病患者肠道菌群及炎症因子的影响，初步探讨五味消渴方的作用机制，以期为糖尿病的治疗研究提供新思路。

1  资料与方法

1.1  一般资料

本研究以降糖治疗有效率作为评价指标进行计算样本量，基于前期临床研究结果，中西医结合治疗有效率为94%，西药治疗有效率为70%，选择α=0.05水平，检验效能为0.9，考虑不超过15%的脱落率，确定病例总数为46对共92例。選取2021年6月至2022年9月在嘉兴市中医医院内分泌科收治的T2DM患者92例，随机分为对照组和治疗组各46例。对照组男25例，女21例，年龄40～72岁，平均年龄（57.11±8.47）岁，病程3～10年，平均病程（6.51±1.47）年；治疗组男23例，女23例，年龄36～69岁，平均年龄（56.52±8.76）岁，病程2～11年，平均病程（6.33±1.39）年。两组的性别、年龄、病程等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。本研究已经通过了嘉兴市中医医院医学伦理委员会审核批准（伦理审批号：2018KY0412）。

1.2  诊断标准

西医诊断标准参照《中国2型糖尿病防治指南（2020年版）》[7]：典型糖尿病“三多一少”症状，+随机血糖≥11.1mmol/L；或+空腹血糖（fasting blood glucose，FPG）≥7.0 mmol/L；或+糖耐量试验（oral glucose tolerance test，OGTT）2h血糖≥11.1mmol/L；或+糖化血红蛋白（hemoglobin，HbA1c）≥6.5%。如糖尿病症状不典型者，需非同日再次复查确定[8]。

气阴两虚证辨证标准参照《中药新药临床研究指导原则》[9]，主症为咽干口燥，倦怠乏力；次症为多食易饥，口渴喜饮，气短懒言，五心烦热，心悸失眠，溲赤便秘；舌脉：舌红少津液，苔薄或花剥，脉细数无力，或细而弦。

1.3  纳入与排除标准

纳入标准：①符合以上诊断及辨证标准；②年龄25～75岁；③治疗前1个月内未使用抗生素和微生态制剂；④项目充分知情并签署同意书者。

排除标准：①近1个月内曾患糖尿病急性并发症，如高渗性昏迷、酮症酸中毒等；②合并有心脑血管、肝、肾及造血系统等严重疾病患者；③过敏体质或对本药过敏者；④处于妊娠或哺乳期者；⑤精神障碍者；⑥随访脱落及未遵医嘱用药者。

1.4  治疗方法

对照组：给予基础治疗（糖尿病宣教、饮食及运动指导），监测空腹血糖及餐后血糖，同时服用二甲双胍片（上海信谊天平药业有限公司），推荐剂量0.5g/次，2～3次/d，根据血糖监测情况调整剂量。治疗组：在对照组基础上加服五味消渴方。基本组成：熟地15g，石斛10g，人参10g，黄连6g，干姜3g，乌梅10g，绞股蓝10g，地龙6g，僵蚕6g，甘草6g，以上中药饮片均来源嘉兴东方国药饮片股份有限公司，经嘉兴市中医医院陆树萍主任中药师鉴定，符合2020年版《中华人民共和国药典》[10]相关规定。由嘉兴市中医医院中药制剂室制备，加水1000ml煎至200ml，每日1剂，早晚分服，两组均持续治疗8周。

1.5  观察指标

（1）治疗前后观察两组基本情况：患者咽干口燥、倦怠乏力、多食易饥、口渴喜饮、气短懒言等症状，按无、轻、中、重度进行评分，主症计为0、2、4、6分，次症计为0、1、2、3分。（2）检测两组患者血清炎性因子水平：采用ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）：使用西门子IMMULITE1000（德国西门子股份有限公司）检测；白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）：使用罗氏cobas8000 e602（瑞士罗氏公司）检测及C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）：使用罗氏cobas8000 c702（瑞士罗氏公司）检测。（3）检测两组患者肠道菌群变化：菌群包括厌氧菌和需氧菌，分别为拟杆菌、双岐杆菌、乳杆菌；肠球菌、酵母菌、肠杆菌。治疗前后取两组患者新鲜粪便1g，利用振荡器进行充分匀浆，并采用生理盐水进行稀释，随后于培养基中对菌种进行定性和定量检测[11]：（4）不良事件和安全性评价：治疗前后检查心电图、肝功能及肾功能。随访观察并记录患者的不良事件，并进行判定和处理。

1.6  疗效标准

疗效标准参照《中药新药临床研究指导原则（试行）》[9]进行制定。显效：中医临床症状、体征得到显著改善，疗效指数≥70%，；有效：中医临床症状、体征有所好转，疗效指数在30%～70%；无效：中医临床症状、体征未改善甚至加重，疗效指数<30%。分值计算采用尼莫地平法：[（治疗前积分-治疗后积分）÷治疗前积分]×100%。

1.7  统计学方法

使用EpiData3.0软件建立数据库，整理后采用SPSS22.0统计学软件对数据进行处理分析，计量资料符合正态分布的用均数±标准差（）表示，计数资料采用χ2检验，治疗前后采用配对样本t检验，两组比较采用两独立样本t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1  临床疗效比较

治疗后，治疗组的总有效率为91.30%（42/46），明显高于对照组的78.26%（36/46），差异有统计学意义（χ2=7.854，P=0.049），见表1。

2.2  肠道菌群变化比较

与治疗前相比，治疗后治疗组的拟杆菌、乳杆菌、双岐杆菌群数量均明显上升，肠球菌、肠杆菌、酵母菌群数量均明显下降，差异具有统计学意义（P<0.05）；治疗后与对照组比较，治疗组的拟杆菌、乳杆菌、双岐杆菌群数量均明显上升，肠球菌、肠杆菌、酵母菌群数量均明显下降，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

2.3  血清炎症因子水平比较

与治疗前比较，治疗后治疗组患者TNF-α、IL-6、CRP水平均明顯下降，差异有统计学意义（P<0.05）；治疗后与对照组比较，治疗组患者TNF-α、IL-6、CRP水平下降更加明显，差异有统计学意义（P<0.05），见表3。

2.4  不良事件和安全性评价

治疗期间，对照组出现2例腹胀，1例腹泻，随后均自行好转，观察组出现3例腹泻，1例腹痛，1例呕吐，随后均自行恢复，两组患者的不良反应均为轻症，给予对症处理后继续按照要求进行治疗研究。肝肾功能、心电图等安全性指标均未发现异常。

3  讨论

T2DM是由于胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能障碍导致血液中葡萄糖水平增高的代谢性疾病，不良的饮食习惯是其主要病因，饮食与肠道环境关系密切。研究表明，2型糖尿病患者存在肠道菌群失调，肠道菌群与人体是互利共生的关系，研究发现在血糖升高状态下，有益菌群数量相对减少，而使用降糖药物后，肠道菌群内益生菌比例增加，血糖也随之降低，调整肠道菌群结构，增加益生菌比例已成为治疗2型糖尿病的新药物干预靶点[12-14]。目前现代医学多采用双胍类、α-葡萄糖苷酶抑制剂等用于治疗T2DM，但症状改善并不明显，且随着病程的不断进展对外源性的依赖逐渐增强，同时出现心脑血管疾病、严重肝肾功能受损等并发症[15]。

T2DM属中医学“消渴”范畴，病位为肺、胃、肾，病机主要在于阴津亏损，燥热偏盛，而以阴虚为本，燥热为标，消渴病病程长，久病可致机体寒热错杂、阴阳失调，治则当以寒热调平、调合阴阳。冯文林等[16]基于《内经》“甘入脾”理论指导下研究发现健脾中药的多糖成分能促进肠道有益菌群的生长，恢复肠道稳态；经方葛根芩连汤、大黄牡丹汤、二神丸、四君子汤等均被证实有调节肠道菌群的作用；中药提取物如小檗碱，能有效恢复肠道菌群稳态，改善糖代谢紊乱。可见，早在1700年前我国传统医学便对当下热门的肠道微生物研究领域有所涉猎，且在后世医家不断实践中有所发扬。五味消渴方是吾师治疗消渴病的验方，基于《内经》五行、五脏及五味结合脏腑补泻理论产生，由熟地黄，石斛，人参，黄连，干姜，乌梅，绞股蓝，僵蚕，地龙，甘草，共十味药物组成。以熟地、石斛为君，合而滋阴清热，养血生津，以人参、乌梅、绞股蓝、黄连、干姜为臣，“辛开苦降”与“苦酸制甜”并用，合而养阴增液，健脾化运，地龙、僵蚕为佐，合而通络除痹、化痰散结，甘草为使，清热缓急，调和诸药。全方劲力紧凑、合而并举以达“津液生而不枯，气血利而不涩”之效[17-20]。现代药理学证明，本方组成药物中的地黄叶总苷、乌梅均能够增加肠道菌群双歧杆菌属比例，石斛水提物、黄连提取物、人参提取物等能够促进益生菌增殖，以调节肠道菌群，白僵菌素及蚯蚓抗菌肽能够抑制肠杆菌等菌群生长[21-27]。

肠道慢性低度炎症是T2DM的一个重要发病危险因素，长期食用高脂高糖食物引起肠道菌群相互作用，导致菌群的失调，使黏膜下层被肠道中的致病菌侵入，炎症细胞活化，从而诱导T2DM发生、发展。TNF-α在胰岛素抵抗的发生中发挥着重要作用，其能够减少胰岛素的分泌作用，同时令ILP丝氨酸残基磷酸化，进而使胰岛素作用受损，发生IR。IL-6能增强脂肪组织中的胰岛素作用，炎性因子和抗炎因子分别通过多种机制不断影响胰岛素靶组织的敏感性，IL-6还可使胰岛β细胞受损，刺激干细胞过度产生CRP，干扰糖脂代谢，参与IR，影响T2DM的发生发展[28-31]。

本研究采用五味消渴方联合二甲双胍治疗2型糖尿病，治疗组的总有效率明显高于对照组（P<0.05），提示联用五味消渴方可明显提高疾病的治疗效果；在肠道菌群调节方面，本研究纳入了具有代表性的厌氧菌和需氧菌各3种，治疗组的厌氧菌（拟杆菌、双岐杆菌、乳杆菌）数量明显高于对照组（P<0.05），需氧菌（肠球菌、酵母菌、肠杆菌）数量明显低于对照组（P<0.05），提示联用五味消渴方可调节患者肠道厌氧菌及需氧菌比例，纠正紊乱；在炎症因子水平方面，治疗后治疗组患者的TNF-α、IL-6、CRP水平明显低于对照组，提示联用五味消渴方可有效抑制机体慢性低度炎症。结合前期研究结果，五味消渴方治疗能够有效降低血糖，提高胰岛素敏感性，其作用机制可能是通过调节T2DM患者的血糖，调节肠道菌群平衡，从而抑制炎症反应，促进抗炎因子生成，达到防止肠道慢性炎症，改善胰腺病理损伤，改善糖代谢紊乱，起到有效防治T2DM的作用[6]。

综上，五味消渴方治疗可缓解2型糖尿病患者临床症状，调节肠道菌群紊乱，降低炎症因子水平，且具有较好的安全性，值得研究推广。

利益冲突：所有作者均声明不存在利益冲突。

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（收稿日期：2023–04–18）

（修回日期：2023–11–15）