SMARCA4基因rs1122608位点多态性与新疆地区人群冠心病易感性的关系研究

2024-03-04热洋尼沙卡的高颖沙吉旦阿不都热衣木吕茂林

实用心脑肺血管病杂志 2024年2期

热洋尼沙·卡的，高颖，沙吉旦·阿不都热衣木，吕茂林

作者单位：830011 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市，新疆医科大学第一附属医院综合内三科

冠心病（coronary heart disease，CHD）是世界范围内的主要死亡原因，在中国，CHD每年导致70万人死亡［1］。CHD是一种脂代谢紊乱、冠状动脉内皮损伤、慢性炎症反应等多因素参与的复杂疾病，遗传因素和生活方式也与其进展有密切关系［2］。研究表明，CHD受环境和遗传易感性相互作用的影响［3］。因而积极筛查心血管疾病患者的遗传易感因素，有助于明确高危人群并及时予以有效防治措施。目前，全基因组关联研究（genome wide association study，GWAS）已经确定了许多与CHD相关的基因突变和染色体位点［4］。SMARCA4（也称BRG1）基因位于19p13.2的染色体区域，其蛋白质是SWI/SNF复合物的重要催化成分，可以通过改变染色质结构来调控多种基因的转录［5］。GWAS显示，SMARCA4基因第30个内含子上rs1122608位点的G等位基因可通过影响低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）水平而增加心肌梗死发生风险［6］。但也有研究显示，rs1122608位点与心血管疾病无明显相关性［7］。目前rs1122608位点与CHD的关系尚存在争议。基于此，本研究旨在分析SMARCA4基因rs1122608位点多态性与新疆地区人群CHD易感性的关系，以期为CHD危险因素评估、预防及治疗提供线索和思路。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2017—2019年就诊于新疆医科大学第一附属医院心脏中心的CHD患者959例为CHD组。纳入标准：（1）符合CHD的诊断标准，即冠状动脉造影（coronary angiography，CAG）检查显示左主干、左前降支（含主要对角支）、左回旋支（含主要边缘支）或右冠状动脉（含后降支、左心室后侧支）中至少1支血管狭窄≥50%［8］；（2）病历资料完整。排除标准：患有严重心力衰竭、肝肾功能不全、血液系统疾病、恶性肿瘤者。选取同期就诊于新疆医科大学第一附属医院心脏中心的非CHD患者924例为对照组，其中心脏神经官能症437例、高血压357例、肺动脉高压85例、心脏瓣膜病45例。纳入标准：（1）无CHD家族史；（2）心电图检查及超声心动图检查无明显异常；（3）其他实验室检查结果均无明显异常。排除标准同CHD组。本研究经新疆医科大学伦理委员会审核批准（K202309-08），所有患者签署知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 一般资料收集

收集患者一般资料，包括性别、年龄、BMI、吸烟情况、饮酒情况、有无高血压、有无糖尿病、有无血脂异常。

1.2.2 实验室检查指标

采集患者清晨空腹静脉血5 m l，送至新疆医科大学第一附属医院检验科，采用全自动生化分析仪（日本OLYMPUS，1000/2700型）检测三酰甘油（triacylglycerol，TG）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白胆固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、LDL-C、载脂蛋白A1（apolipoprotein A1，ApoA1）、载脂蛋白B（apolipoprotein B，ApoB）、脂蛋白a〔lipoprotein（a），Lp（a）〕、空腹血糖。

1.2.3 SMARCA4基因rs1122608位点多态性检测

抽取患者外周静脉血3 ml，加入2% EDTA抗凝，3 000 r/min离心10 min（离心半径15 cm），分离白细胞。采用天根生化科技（北京）有限公司的血液、细胞、组织基因组DNA提取试剂盒（货号/批号：DP319-02）提取外周血白细胞基因组DNA，于－80 ℃环境下保存备用。DNA样本送华大基因行高通量测序以检测SMARCA4基因rs1122608位点基因型（包括GG、GT、TT）及等位基因（包括G和T）。

1.3 统计学方法

采用S P S S 2 5.0 软件进行统计学分析。采用Kolmogorov-Smirnov法进行正态性检验，不符合正态分布的计量资料以M（P25，P75）表示，两组间比较采用Mann-WhitneyU检验；计数资料以相对数表示，组间比较采用χ2检验；采用Hardy-Weinberg遗传平衡检验评估样本的群体代表性；采用非条件二元Logistic回归分析探讨CHD的影响因素。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料及实验室检查指标比较

两组性别、年龄、BMI、饮酒者占比、血脂异常者占比、TG、ApoA1比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；CHD组吸烟者占比、有高血压者占比、有糖尿病者占比、TC、LDL-C、ApoB、Lp（a）、空腹血糖高于对照组，HDL-C低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组一般资料及实验室检查指标比较Table 1 Comparison of general data and laboratory test indexes between the two groups

2.2 Hardy-Weinberg遗传平衡检验

Hardy-Weinberg遗传平衡检验结果显示，对照组和CHD组SMARCA4基因rs1122608位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡（P＞0.05），见表2。

表2 两组Hardy-Weinberg遗传平衡检验结果Table 2 Hardy-Weinberg genetic balance test results of the two groups

2.3 两组SMARCA4基因rs1122608位点基因型、等位基因频率比较

两组SMARCA4基因rs1122608位点基因型、等位基因频率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

表3 两组SMARCA4基因rs1122608位点基因型、等位基因频率比较〔n（%）〕Table 3 Comparison of genotype and allele frequency of rs1122608 locus of SMARCA4 gene between the two groups

2.4 CHD影响因素的非条件二元Logistic回归分析

以吸烟（赋值：是=1，否=0）、高血压（赋值：有=1，无=0）、糖尿病（赋值：有=1，无=0）、TC（实测值）、HDL-C（实测值）、LDL-C（实测值）、ApoB（实测值）、Lp（a）（实测值）、空腹血糖（实测值）、SMARCA4基因rs1122608位点基因型（赋值：GG=1，GT=2，TT=3）为自变量，研究对象是否为CHD患者为因变量（赋值：是=1，否=0），进行非条件二元Logistic回归分析，结果显示，吸烟、高血压、Lp（a）升高、空腹血糖升高是CHD的独立危险因素，HDL-C升高是CHD的独立保护因素（P＜0.05）；SMARCA4基因rs1122608位点基因型不是CHD的影响因素（P＞0.05），见表4。

表4 CHD影响因素的非条件二元Logistic回归分析Table 4 Unconditioned binary Logistic regression analysis of influencing factors of CHD

3 讨论

SMARCA4基因紧邻低密度脂蛋白受体基因，位于19p13.2的染色体区域，由7个高度保守的结构域组成［9］。研究显示，SMARCA4基因可调节脂肪细胞的脂质代谢［10］，而其表达可能受rs1122608位点的调控［11］。rs1122608位于SMARCA4基因的第30个内含子上，既往研究表明，在亚洲男性人群中rs1122608位点G等位基因是CHD的重要危险因素；同时研究显示，rs1122608位点多态性与高加索人群CHD易感性相关［12］。伊朗的研究显示，rs1122608位点GT基因型或TT基因型与CHD的严重程度有关［13］。但同时有研究显示，在中国汉族人群中rs1122608位点多态性与CHD之间没有明显的关系［14］。因而SMARCA4基因rs1122608位点多态性与CHD的关系尚存在争议。本研究旨在分析SMARCA4基因rs1122608位点多态性与新疆地区人群CHD易感性的关系。

本研究结果显示，对照组和CHD组SMARCA4基因rs1122608位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡，提示本研究对象具有群体代表性。本研究结果还显示，两组SMARCA4基因rs1122608位点基因型、等位基因频率比较，差异无统计学意义；非条件二元Logistic回归分析结果显示，SMARCA4基因rs1122608位点基因型不是CHD的影响因素，提示SMARCA4基因rs1122608位点多态性与新疆地区人群CHD易感性无关。但考虑新疆是个多民族地区，不可避免地存在种族差异，因而还需排除种族差异，从遗传易感性和生活方式的角度进一步阐明SMARCA4基因rs1122608位点多态性与新疆地区人群CHD的关系。

此外，本研究非条件二元Logistic回归分析结果还显示，吸烟、高血压、Lp（a）升高、空腹血糖升高是CHD的独立危险因素，HDL-C升高是CHD的独立保护因素。分析原因：吸烟会影响动脉粥样硬化的所有阶段，从内皮功能障碍到急性临床事件，其还会加重炎症反应、促进血栓形成和LDL-C的氧化，从而增加个体心血管疾病发生风险。既往研究表明，主动吸烟者和被动吸烟者冠状动脉疾病发生风险均高于不吸烟者［15］。高血压可引起内皮功能障碍，促进动脉粥样硬化进程，导致动脉粥样硬化斑块不稳定，从而增加CHD发生风险。此外，左心室肥厚是高血压的常见并发症，其可导致冠状动脉储备减少及心肌氧需求增加，这两种机制均可导致CHD的发生［16］。Lp（a）是一种附着在低密度脂蛋白样颗粒上的大分子糖蛋白，其水平升高可能诱发血栓形成，从而加速动脉粥样硬化，进而导致CHD发生风险升高［17-18］。研究表明，即使是非糖尿病患者，空腹血糖＞5.5 mmol/L（100 mg/dl）与CHD发病有关［19］。Framingham研究表明，HDL-C降低是CHD的危险因素［20］。HDL-C在血管中的作用包括抗氧化、抗炎、预防缺血再灌注、修复损伤的内皮细胞等，但其最重要的作用是清除细胞内胆固醇，从而降低动脉粥样硬化发生风险。研究表明，血清HDL-C＜40 mg/dl是CHD的危险因素［21］。