江西省饲料及饲料原料中真菌毒素污染水平调查与评估

■ 夏 骏 邢 磊 吴科盛 文露华 赵薇娜 符金华 尹腾桂 万文根

（江西省农业技术推广中心，江西南昌 330000）

真菌毒素是一类在霉菌生长繁殖过程中产生的有毒次级代谢产物。在畜牧业生产中，真菌毒素污染的饲料及原料，不仅影响饲料的营养品质，而且饲喂动物后会破坏机体的免疫系统，甚至影响动物的健康和生产[1-2]。饲料及相关产业链受真菌毒素的污染影响巨大，目前已知的真菌毒素有数百种，其中对养殖业威胁较大的主要是黄曲霉毒素（AfatoxinB1，AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、呕吐毒素（DON）、T-2毒素（T-2 TOXIN，T2）、赭曲霉毒素（OchratoxinA，OTA）以及伏马毒素（FB1）等[3-4]。

江西省位于中国中南部，地处中亚热带，气候潮湿，水热条件差异较大，有利于各种真菌的生长。在这种高温高湿的环境中，缺少有效防霉措施时，玉米、饼粕类、糠麸类等饲料原料及配合饲料，很容易发生霉变而受到真菌毒素污染[5]。为评估江西省饲料和饲料原料受真菌毒素污染情况，本研究对江西省507 批次饲料原料和配合饲料样本进行了跟踪调查和检测分析，以期为主管部门和饲料企业提供技术参考。

1 材料与方法

1.1 试验仪器与材料

Waters Xevo-TQD 液相色谱串联质谱仪，沃特世公司；Waters SB-C18 2.7 mm×50 mm×1.7 µm 液相色谱柱，沃特世公司；MLJ-1 0.4 g/2.5 mL 多重基质吸附型固相萃取柱，北京六角体检测技术有限公司；FB1、DON、FB1、ZEN、OTA 和T2 对照品，均购自天津阿尔塔科技有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 样品采集

本研究于2022年5月进行，采集江西省境内配合饲料及饲料原料共507 批次，其中饲料原料90 批，配合饲料417 批。采样按照GB/T 14699.1—2005《饲料采样》的要求执行，每份样品不少于500 g[6]。样品粉碎后放置于4 ℃冰箱中保存。饲料原料按照《饲料原料目录》分类，配合饲料按照标签说明分类，具体样品分类及数量见表1。

表1 样品分类及数量（批）

1.2.2 样本测定

参照NY/T 3803—2020《饲料中37 种真菌毒素的测定 液相色谱-串联质谱法》，对样本中AFB1、DON、FB1、ZEN、OTA、T2 六种真菌毒素含量进行测定[7]，其中液相色谱采集参数为：柱温35 ℃，进样量10 µL，流速0.3 mL/min，流动相A 为0.1%甲酸水溶液，流动相B 为0.1%甲酸乙腈溶液，梯度洗脱程序见表2；质谱参数为：ESI 源，正离子模式，毛细管电压2 700 V，脱溶剂气温度550 ℃，脱溶剂气流速1 000 L/h。以仪器响应3 倍信噪比为检出限，高于检出限样品为检出样本，检出限为：AFB1和T2 为1.0 µg/kg，DON、FB1和ZEN 为2.0 µg/kg，OTA 为5.0 µg/kg。依据GB 13078—2017 中真菌毒素限量进行判定，高于限量为超标样本[8]，同时计算检出率、超标率、阳性样本含量平均值、中值和最高值。

表2 梯度洗脱程序

1.3 数据统计分析

采用EXCEL 2016软件进行数据统计分析。

2 结果与分析

2.1 总体污染情况

对507 批饲料原料和配合饲料样品进行检测，其中474批检出真菌毒素，检出率93.5%，超标样品93批次，超标率18.3%。在507 批样本中，同时受5 种及以上的真菌毒素污染的样本2批次，占样本总数的0.4%；同时受4种真菌毒素污染的样本60批次，占样本总数的11.8%；同时受3 种真菌毒素污染的样本268 批次，占样本总数的52.9%；同时受2种真菌毒素污染的样本105批次，占样本总数的20.7%；只受1种真菌毒素污染的样本39批次，占样本总数的7.7%；未受真菌毒素污染的33批次，占样本总数的6.5%，如图1所示。

图1 样本中真菌毒素复合污染比例

2.2 AFB1污染情况

检测结果表明，所有饲料品种均有不同程度AFB1检出，总检出率为16.0%。其中，在饲料原料中，酒糟类检出率最高，达到18.8%；配合饲料中，肉禽料检出率最高，达到31.1%。共有19 批样本超出限量，超标率3.7%。超标样本为大豆、玉米、猪配合料、蛋禽配合料和肉禽配合料，其超标率分别为5.3%、12.5%、1.7%、12.6%和2.3%。饲料原料中玉米超标率最高，达到12.5%，配合饲料中肉禽料超标率最高，达到12.6%。从含量分布而言，玉米原料受AFB1污染最为严重，含量达682.48 µg/kg，超出限量13.6倍；配合饲料中肉禽料最严重，最高值达268.20 µg/kg，见表3。

表3 不同样本中AFB1检测结果

2.3 DON污染情况

在507 批样本中，共检出DON 393 批次，检出率达77.5%，超标64批次，超标率为12.6%。在饲料原料中，共检出42 批次，检出率46.7%，超标3 批次，超标率3.3%。超标样本均为酒糟类别中的玉米DDGS。在配合饲料中，共检出351 批次，检出率84.2%，超标61 批次，超标率14.6%。其中同AFB1 情况类似，酒糟类的检出率和超标率明显高于其他种类饲料原料。除水产配合饲料外，猪配合饲料、肉禽配合饲料和蛋禽配合饲料检出率相当，猪料略高，超标率明显高于其他配合饲料，见表4。从含量分布而言，饲料原料中酒糟类含量最高，玉米和小麦次之；配合饲料中四类产品含量分布无差异，如图2所示。

图2 不同配合饲料中DON的含量分布

表4 不同样本DON的检测结果

2.4 FB1污染情况

所有样本中，共检出FB1 444 批次，检出率为87.6%；超标11批次，超标率2.2%。饲料原料检出56批次，检出率62.2%，超标1批次，超标率1.1%，超标样本为酒糟类别中玉米DDGS。其中，稻谷样本全部检出FB1，检出率最高，酒糟和玉米检出率次之。配合饲料

共检出388 批次，检出率93.0%，超标10 批次，超标率2.4%。四种配合饲料之间的FB1 检出率和超标率相当，见表5。从含量而言，酒糟类的含量分布高于大豆、玉米、小麦和稻谷，蛋禽和肉禽配合饲料中FB1含量最高，水产料次之，猪料最低，见图3所示。

图3 饲料原料和配合饲料中的FB1的含量分布

图4 饲料原料和配合饲料中ZEN的含量分布

表5 不同样本FB1的检测结果

2.5 ZEN污染情况

在507 批样本中，共检出377 批，检出率74.4%，超标6 批，超标率1.2%。饲料原料检出40 批次，检出率44.4%，超标1 批次，超标率1.1%。其中，酒糟和稻谷样本检出率明显高于其他饲料原料，超标样本为稻谷。配合饲料检出337 批，检出率80.8%，超标5 批，超标率1.2%。其中，四种配合料检出率相当，蛋禽配合饲料最高；除水产料外，其余3 种配合饲料超标率相当，见表6。

表6 不同样本ZEN的检测结果

从含量上看，稻谷和酒糟的含量高于其他种类饲料原料，蛋禽配合料和肉禽配合料含量相当，且高于猪配合料和水产配合料。

2.6 OTA污染情况

在所抽取的饲料样本中，OTA 共检出3 批次，检出率为0.6%，无超标样本；其中饲料原料检出2批次，均为酒糟类，含量为6.88 µg/kg 和29.07 µg/kg；肉禽配合饲料检出1 批次，含量为9.50 µg/kg。上述检出样本含量均远低于国家限量（100 µg/kg），见表7。

表7 不同样本中OTA检测结果

2.7 T-2污染情况

在507 批样本中，T-2 共检出5 批次，总检出率为1.0%，均为配合饲料，平均含量为19.90 µg/kg，最高含量为81.14 µg/kg，均远低于国家限量（500 µg/kg），见表8。

表8 不同样本中T2检测结果

3 讨论

本研究表明，真菌毒素在饲料原料和配合饲料中污染普遍存在，且存在一定的风险。AFB1 是毒性最强、危害最大的真菌毒素之一，被世界卫生组织认定为一级致癌物，受到世界各国广泛关注[9]。在本调查中，玉米、大豆和以玉米为主要原料的酒糟类，以及肉禽配合饲料受到AFB1 的污染相对较为严重，应重点关注上述原料和产品受其污染的影响。DON 对人和动物均有很强的细胞毒性和免疫毒性，具有一定的“三致”（致癌、致畸、致突变）作用，被国际癌症研究机构列为3 类致癌物。更为重要的是，DON 能引起养殖动物呕吐、腹泻、皮肤刺激、拒食、神经紊乱、流产、死胎等，严重影响生产性能[10]。猪是对该毒素最敏感的动物，家禽次之，反刍动物由于瘤胃微生物的作用，耐受力较强[11]。因此，GB 13078—2017 规定猪配合饲料的限量为1 000 µg/kg，要严于其他动物饲料（3 000 µg/kg）本调查表明酒糟类原料、猪料和肉禽料受DON 污染相对严重，应重点关注。伏马菌素是由串珠镰刀菌产生的水溶性代谢产物，是一类由不同的多氢醇和丙三羧酸组成的结构类似的双酯化合物。主要污染以玉米为主的粮食及其制品，并对某些家畜产生急性毒性及潜在的致癌性，世界卫生组织国际癌症研究机构将其列入2B 类致癌物清单中。到目前为止，发现的伏马菌素有FA1、FA2、FB1、FB2、FB3、FB4、FC1、FC2、FC3、FC4 和FP1 等11 种，其中伏马毒素B1（FB1）是其主要组分，且危害最大[12]。FB1 主要损害动物肝肾功能，猪对其高度敏感，可引起猪肺水肿进而导致呼吸困难和皮肤黏膜发绀，该毒素同时也是高热病、圆环病的重要诱因，对养殖业危害巨大[13]。在本次调查中，FB1 在饲料原料和配合饲料中广泛存在，但超标情况不高，总体可控，酒糟、玉米和稻谷受污染情况相对较为严重。ZEN 又称F-2 毒素，是玉米赤霉菌的次级代谢产物。ZEN 主要污染玉米、小麦、大米、大麦、小米和燕麦等谷物。该毒素具有较强的类雌激素作用，主要作用于生殖系统，可使家畜，家禽和实验小鼠产生雌性激素亢进症，妊娠期的动物(包括人)食用含ZEN 的食物可引起流产、死胎和畸胎。ZEN 对畜牧养殖危害较高[14]。该毒素会导致母畜外生殖器肿大、充血、受胎率低、死胎和延期流产的现象大面积产生，并且伴有木乃伊胎的现象，造成繁殖性能大幅度降低。同时由于ZEN在动物体内有一定残留和蓄积，代谢时间长，往往导致一个育种基地一年内难以恢复至原有水平，而且造成大面积的品质下降[15]。因此需要格外引起重视。调查结果表明，一方面，ZEN 在玉米、稻谷和酒糟等饲料原料和配合饲料中的污染广泛存在，但超标率较低，整体风险不高。但相对而言，肉禽配合饲料最高含量超限量近3 倍，应予以关注；另一方面，由于猪对该毒素高度敏感，影响繁殖性能，因此对于母猪配合饲料的生产应采取适当措施防止受ZEN 污染的发生。OTA 是由曲霉属的7 种曲霉和青霉属的6 种青霉菌产生的真菌毒素组成，其中赭曲霉毒素A（OTA）毒性最大、分布最广、产毒量最高、对农产品的污染最重、与人类健康关系最密切[16]。OTA 主要毒害动物的肾脏和肝脏，肾脏是第一靶器官，其中猪和禽类的对该毒素的敏感性最强。OTA 对动物的急性中毒表现为精神沉郁，食欲减退，体重下降，肛温升高。消化功能紊乱，肠炎可视黏膜出血，甚至腹泻，脱水多尿，伴随蛋白尿和糖尿；妊娠母畜往往表现为子宫黏膜出血，往往发生流产，给养殖带来严重损失[17]。本调查表明，OTA 的污染情况风险水平较低，无需特别关注。T-2 毒素属于单端孢霉烯族化合物，广泛分布于自然界，是常见的污染田间作物和库存谷物的主要毒素。T-2 毒素抑制这些器官细胞蛋白质和DNA 合成，对新生或未成年动物比成年动物更加敏感[18]。本调查结果表明，配合饲料和饲料原料中T-2 的污染情况风险水平较低，无需特别关注。

真菌毒素污染的根本原因是霉变，因此防霉变是控制真菌毒素污染的关键。在饲料生产过程中，应着重在原料采购、原料验收、饲料加工和质量控制、储藏、运输等关键环节强化质量管理[19-20]，加强质量控制，规范化生产，同时加强科学研究，改进工艺，开发相应的脱毒产品和工艺，降低真菌毒素对产品的影响[21-22]。作为行业主管部门，应着眼饲料全产业链控制，一是引导科学种植、强化田间管理、规范粮食收储机制、强化收储监管力度，减少饲用农作物受霉变影响[23]；二是严把行业准入，淘汰落后产能，推动饲料转型升级[24]。三是强化监管力度，提高风险评估水平，提高技术支撑和保障能力，建立长期风险评估机制；四是加强政企沟通，提高政企协防能力。政府、企业以及相关技术部门要同向发力，共同应对真菌毒素污染风险。

4 结论

通过对饲料原料和配合饲料中6 种主要真菌毒素的调查和分析可以发现，一是真菌毒素在饲料及饲料原料中污染普遍存在，饲料中真菌毒素检出率和超标率较高。真菌毒素的总检出率和超标率分别为93.5%和18.3%，其中DON、FB1 和ZEN 三者的检出率均高于70%，DON 的超标率达12.6%。二是部分饲料原料和配合饲料存在一定风险。酒糟类原料和肉禽配合饲料受AFB1、DON、FB1、ZEN等真菌毒素污染的风险高，玉米受AFB1 和FB1 污染、稻谷受FB1 和ZEN污染风险相对存在，猪配合饲料受DON 污染、蛋禽配合饲料受FB1和ZEN 污染存在一定风险，上述污染风险应予以关注。