高危型人乳头瘤病毒基因亚型感染与宫颈病变的相关性研究

王 敏,杨 波,王 娟,陈 龙,买 莉,王佳陪

宫颈癌是危害全球女性健康的第二大常见恶性肿瘤[1],人乳头瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关[2],高危型HPV(HR-HPV)的持续感染是诱发宫颈上皮内瘤变(CIN)及浸润性宫颈癌的重要因素[3]。不同地区HPV基因型分布存在差异性,本研究通过分析HR-HPV基因型别分布情况及宫颈病变与不同基因亚型之间的关系,为本地区宫颈癌的防治提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2019年1月至2022年10月在银川市妇幼保健院妇科门诊就诊患者872例,对其进行HPV分型检测及活组织病理检查。本研究通过医院伦理委员会批准。

1.1.1 纳入标准 ①患者进行HPV基因分型检测,并行阴道镜下活组织病理检查;②病理诊断为慢性宫颈炎、CIN1、CIN2、CIN3、浸润性宫颈癌者;③临床资料完整者。

1.1.2 排除标准 ①妊娠期或哺乳期患者;②有宫颈手术、宫颈锥切、子宫切除及盆腔放疗史患者。

1.2 研究方法

1.2.1 标本采集 用无菌棉拭子沾除宫颈口过多分泌物,将一次性宫颈细胞采集器伸至宫颈口处顺时针旋转3～5圈,然后将采样刷放入专用保存液中,旋紧瓶盖置4 ℃保存,1 h内送检。

1.2.2 检测方法 采用荧光PCR法,可检测23种基因型别,包括17种HR-HPV基因亚型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82)、 6种低危HPV基因亚型(6、11、42、43、44、81)。其中有两种及以上高危基因亚型感染则定义为多重感染。

1.2.3 病理学检查 阴道镜下取活检组织,常规4%中性甲醛固定,石蜡包埋,4 μm切片,苏木素-伊红染色,诊断结果由2名病理医师分别阅片,有争议者由高年资医师复核或免疫组化协助诊断,最终结果至少2名病理医师诊断一致。病理诊断包括宫颈炎、CIN1、CIN2及CIN3和浸润性宫颈癌。

2 结果

2.1 宫颈病变患者中单一感染HR-HPV基因亚型分布 对597例单一感染HR-HPV患者进行HPV基因亚型分析,17种HR-HPV基因亚型全部检出,检出最高的5种基因亚型依次为16(41.21%)、52(13.74%)、58(12.56%)、18(4.69%)、33(4.69%),其中宫颈炎组检出前5种HR-HPV基因亚型依次为16(24.76%)、52(17.62%)、58(13.81%)、53(5.71%)、59(5.24%); CIN1组检出前5种HR-HPV基因亚型依次为16(21.55%)、58(19.83%)、 52(18.97%)、18(8.62%)、31(6.03%);CIN2及CIN3组检出前5种HR-HPV基因亚型依次为16(59.31%)、52(9.96%)、58(9.52%)、33(6.06%)、18(4.33%),宫颈癌组检出主要亚型为16(80.00%),其次为33(5.00%)。单一感染中,随病变程度的加重,HPV16感染率明显增高,4组比较差异有统计学意义(χ2=98.02,P<0.05),单一感染HR-HPV基因亚型结果见表1。

表1 单一感染HR-HPV基因亚型分布

2.2 宫颈病变患者中多重感染HR-HPV基因亚型分布 对275例多重感染HR-HPV患者进行HPV基因亚型分析,17种HR-HPV基因亚型全部检出,检出最高的5种HR-HPV基因亚型依次为16(21.43%)、52(14.33%)、58(12.88%)、18(8.7%)、53(7.57%),其中宫颈炎组检出前5种HR-HPV基因亚型依次为58(16.25%)、52(15.63%)、16(13.75%)、53(10.63%)、18(8.75%); CIN1组检出前5种HR-HPV基因亚型依次为16(17.71%)、52(14.86%)、58(13.14%)、53(10.63%)、51(6.86%),其中CIN2及CIN3组检出前5种高危亚型依次为16(26.59%)、52(14.23%)、 58(10.86%)、18(8.99%)、33(6.37%),宫颈癌组检出主要亚型为16(47.37%),其次为18(26.32%),多重感染中,随病变程度的加重,HPV16感染率明显增高(χ2=18.86,P<0.05),多重感染HR-HPV基因亚型结果见表2。

表2 多重感染HR-HPV基因亚型分布

2.3 HR-HPV基因亚型单一感染和多重感染的情况 872例感染HR-HPV基因亚型中,单一感染597例,占比68.46%,多重感染275例,占比31.54%,见表3。

表3 HR-HPV基因亚型单一感染和多重感染的情况

3 讨论

宫颈癌是严重危害女性生殖健康的疾病之一,也是目前少有的可通过早期干预治愈的癌症之一,现有的医学研究表明HR-HPV与宫颈癌密切相关,而人体感染HPV过程较为隐匿,患者早期往往无明显症状和体征,容易被忽视,随着病情进展,逐步发展为宫颈癌。

不同地域不同程度宫颈病变中HPV基因亚型分布有所不同,本文回顾性分析银川地区HR-HPV感染的流行病学数据,明确本地区主要HR-HPV基因亚型分布以及各基因亚型与宫颈病变相关性,对银川地区宫颈癌的精准防治及疫苗的使用有重要指导意义。

国际癌症研究协会的研究显示,在世界范围内HPV16、HPV18为常见的基因亚型[4],我国河南省新乡地区[5]宫颈癌中主要流行基因型依次为：16、18、58、52、31、68、51;宫颈高级别病变主要流行基因型为：16、58、52、18、31、51、68。HPV16感染患宫颈癌的风险最大,彭海兰等[6]研究发现,在宫颈炎、CIN 1这些低级别的病变中,HPV16、52、68、53是检出率较高的基因亚型;而在CIN2、CIN3中检出率较高的基因亚型为HPV16、18、33、58 等,在宫颈癌中,HPV16、18的检出率较高与本研究结果一致。南非东部,在CIN2患者中常见的基因亚型分别为HPV35、58、45、16,而在CIN3患者中,HPV35、16、33、58是最常见的基因亚型[7]。福建省宫颈病变筛查发现,HPV16、58、52、18、33和31感染是最常见的基因亚型,其中HPV16、18、58、33和31与CIN2的发生有关[8]。另有研究显示,在南非妇女筛查中发现HPV16、18、31、33、35、52、58基因亚型与CIN2显著相关[9]。本研究显示,HR-HPV单一感染主要基因亚型为16、52、58、18、33,其中宫颈炎组检出前5种HR-HPV基因亚型依次为16、52、58、53、59; CIN1组检出前5种HR-HPV基因亚型依次为16、58、 52、18、31;CIN2及CIN3组检出前5种HR-HPV基因亚型依次为16、52、58、33、18,宫颈癌组以16为主,其次为33。多重感染检出最高的5种基因亚型依次为16、52、58、18、53,其中宫颈炎组检出前5种HR-HPV基因亚型依次为58、52、16、53、18;CIN1组检出前5种HR-HPV基因亚型依次为16、52、58、53、51;CIN2及CIN3组检出前5种HR-HPV基因亚型依次为16、52、 58、18、33,宫颈癌组主要感染HPV基因亚型为16,其次为18,可见不管是单一感染还是多重感染CIN2及CIN3组前5种HR-HPV基因亚型均为16、52、 58、18、33,宫颈癌以16、18、33为主。此外,单一感染或多重感染中,随病变程度的加重,HPV16感染率明显增高,所以HPV16亚型感染仍是宫颈病变发展的主要基因型。目前面市的HPV疫苗主要有3种,分别为：默沙东公司的HPV四价疫苗(HPV6、HPV11、HPV16、HPV18),默沙东公司的九价疫苗(HPV6、HPV11、HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV52、HPV58、HPV45),葛兰素史克公司的HPV二价疫苗(HPV16、HPV18)[10]。对女性而言,九价疫苗能有效预防HPV感染、宫颈高级别病变及宫颈癌的发生,如经济状况允许,应尽早接种疫苗。

有研究显示[11],在宫颈低级别病变组、高级别病变组、宫颈癌组中,患者HPV感染以单一感染为主,随着宫颈病变级别的增高,单一感染率逐渐增加,多重感染率逐渐下降。本研究结果亦显示,275例多重感染HR-HPV基因亚型阳性患者中,随着宫颈病变程度加重,CIN1、CIN2及CIN3、宫颈癌组的多重感染占比呈下降趋势,而597例单一感染HR-HPV基因亚型随病变级别的增高,单一感染率逐渐升高,研究结果说明,HR-HPV多重感染与不同程度的宫颈病变无明显相关性,与上述研究结果一致。

综上所述,在不同国家不同地域、同一国家不同地域HPV基因亚型分布不同,体现了其地域分布差异性,HR-HPV多基因亚型混合感染与宫颈病变无明显的相关性,随着宫颈病变严重程度升高多亚型混合感染率趋于下降。HR-HPV感染亚型数目与宫颈病变是否发生以及宫颈病变的严重程度也无显著相关性,而HR-HPV基因型的致病能力与宫颈病变、宫颈病变后病情进展密切相关。鼓励适龄女性积极预防性接种HPV疫苗,减少宫颈病变及宫颈癌的发生。