惠众市场蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的调查与分析

张崇志

（清远职业技术学院食品药品学院，广东 清远 511510）

蔬菜是人们日常饮食中必不可少的食物之一，为减少农作物病虫害，增加产品产量与提高质量，越来越多农药被用于农作物种植过程。其中，有机磷农药易降解、成本低,氨基甲酸酯类农药毒性低、药效高，这两大类农药更是被普遍应用。有机磷和氨基甲酸酯类农药会抑制人体内乙酰胆碱酯酶的活性，且过程不可逆，导致乙酰胆碱在体内堆积，危害身体健康，严重时会导致器官衰竭甚至死亡。

虽然国家农业农村部持续开展高危高毒农药淘汰行动，在近几年取得了一定成效,但国家明令禁止蔬菜中使用的有机磷和氨基甲酸酯等杀虫剂残留还是会被检出,如毒死蜱、氧乐果、克百威等。因此,有关政府部门应该对生产农药的企业加强监管，并禁止企业生产已经禁用的农药。从农药生产的企业上，企业需更好地了解农药禁限用知识，同时也要注意开发新的农药产品，从而增强企业竞争力。若是使用法律禁止的农药或是超出农药登记批准的范围使用农药,一律以假农药对待,除受到处罚外,情节特别严重的将由原发证部门撤销农业生产经营许可证书或者有关的农药登记证,对犯罪构成客观要件的,将依法追究刑事责任。

对要流通到市场的蔬菜加强农药残留的检测力度,提升基层蔬菜农残检测能力显得尤为重要。由于蔬菜具有易腐、流通快的特点,成本低、耗时短、操作简便的快速检测技术已成为蔬菜流通中的一个重要检测手段。目前,基层蔬菜农药残留快速检测应用最广泛的是GB/T5009.199-2003《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》酶抑制率法(分光光度法), 该方法利用有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase, AChE)的正常功能有抑制作用, 可快速测定蔬菜中有机磷类和氨基甲酸酯类农药[1-2]。

有机磷及氨基甲酸酯类杀虫剂都存在着致癌、致畸、致突变的风险。所以,对有机磷及氨基甲酸酯类杀虫剂的长期监测非常必要[3]。本研究在2023 年3 月对惠众市场的菜品进行了抽样测试，并分析了该市场菜品中有机磷农药残留的状况。

1 材料与方法

1.1 样品来源

利用随机抽样的方式，采集惠众市场上销售的新鲜蔬菜，该菜市场的蔬菜摊位，由富民农批、镇口市场供应。2023 年3 月共抽检样品164 批次。

1.2 试剂与仪器

1.2.1 试剂

农药残留快速检测试剂，购自深圳市易瑞生物技术股份有限公司。

1.2.2 仪器

一体式便携化食品药品安全快速检测系统（分光光度计）型号YR-600Plus,购自深圳市易瑞生物技术有限公司。

1.3 检测原理

利用某些物质影响酶的功能基团，使酶活力下降或消失的现象进行检测的方法叫做酶抑制分光光度法。这种方法常用于检测农药残留，因为有机磷以及氨基甲酸酯杀虫剂残留会抑制胆碱酯酶的正常功能，而且抑制率和农药浓度成正比。酶催化神经传导代谢的产物(乙酰胆碱)分解与显色剂发生反应，从而可以生成黄色物质，在412nm 处通过使用分光光度计测定吸光度随时间的变化值。因此，可以通过抑制率判断样品中是否含有高剂量的有机磷和氨基甲酸酯类农药，这是通常情况下的做法。

1.4 检测方法

酶抑制分光光度法。

1.4.1 样品前处理

整棵提取的方法：取韭菜、芹菜等适用的样品，擦掉其肉眼可见的泥土。用电子天平称取2g（±0.1g）整株的样品（不用剪碎），用镊子夹入50ml 离心管或三角瓶里面，应注意样品要深入底部，不要附着在容器壁上面。用移液枪移取10ml 缓冲液至容器里。用手轻轻地振摇容器1～2min，然后放回实验台上静置5min 以上。用滤纸过滤，滤液用作样品待测液。

整体测定法：选取油菜、菠菜等适用样品，擦掉样品肉眼可见的泥土，剪成1cm 左右见方形状的碎片。称取2g（±0.1g）剪碎的样品，用镊子夹入50ml 离心管或三角瓶里面，应注意样品要深入底部，不要附着在容器壁上面。用移液枪移取10ml 缓冲液加入到容器里面。用手轻轻地振摇容器1～2min，然后放回实验台上静置5min 以上。若提取的溶液杂质太多或呈现浑浊状态，可以用滤纸过滤后再测试，滤液作为样品待测液。

1.4.2 对照测试

先用移液枪在比色皿里加入3.0ml 缓冲液，后依次加入100μl 酶试剂和100μl 显色剂，混匀（用移液枪上下吸3 到9 次左右）。然后放回实验台上静置10min。再用移液枪加入100μl 底物，快速地摇晃使溶液分布均匀。后马上上机按“对照”键测试[对照测试△A 值必须大于0.1（1min 测试）或0.3（3min 测试）]。

1.4.3 样品测试

用移液枪吸取3.0ml 样品待测液加入比色皿里面，然后加入100μl 酶试剂和100μl 显色剂，混匀（用移液枪上下吸3 到9次左右）。然后放回实验台上静置10min。再用移液枪加入100μl 底物，快速地摇晃使溶液分布均匀。立即上机按“样品”键测试。

1.4.4 结果判定

（1）超出农药残留限量:抑制率不低于50%（建议对阳性样品进行2 次或更多次的重复检测）。（2）农药残留符合标准:抑制率不高于50%。

1.5 数据处理

利用Microsoft Excel 2019 软件对实验的检测结果进行统计研究分析、绘图。

2 结果与分析

2.1 样品分类

2023 年3 月从惠众市场9 个蔬菜摊位32 种蔬菜共164 批次，采用酶抑制分光光度法检测。依据(SB/T 10029-2012)《新鲜蔬菜分类与代码》这个标准来分门别类。收集样品包括绿叶菜类蔬菜、白菜类蔬菜、豆类蔬菜、瓜类蔬菜、葱蒜类蔬菜、茄果类蔬菜6类，检测总量中，白菜类蔬菜占了41%，有67 批次，绿叶菜类蔬菜占了24%，有40 批次，这两类蔬菜的量最多。瓜类蔬菜样品量最少，仅有4 批次，占检测总量的3%（图1）。

图1 蔬菜分类统计结果

2.2 样品农药残留情况分析

所有蔬菜样品的检测结果用Microsoft Excel 2019 软件进行统计研究分析，图2 显示了不同抑制率范围内的蔬菜抑制率的频次。检测样品的抑制率的平均值、极大值分别为10.9%、46.1%。164 批次的检测样品有机磷以及氨基甲酸酯类的农药残留项目合格，合格率100%。

图2 样品分布直方图及统计描述

2.3 不同种类蔬菜抑制率的平均值

图3 结果表明，惠众市场蔬菜中的有机磷以及氨基甲酸酯类农药总体水平含量较低。豆角的抑制率平均值最高，为16.90%。黄瓜的抑制率平均值最低，为2.03%。

图3 不同种类蔬菜的抑制率平均值

3 结论与讨论

对于检测部门而言，有机磷和氨基甲酸酯类农药的酶抑制率法具有操作简单、反应迅速、成本低廉等优点，适用于对大批量样品进行快速筛查，但需要避免假阳性结果的出现。易出现假阳性的蔬菜包括葱、蒜、韭菜、香菜、辣椒等。其原因首先是蔬菜细胞液中的次生物质会对酶的功能有着遏抑作用，导致抑制率值偏高出现假阳性结果；此外，蔬菜中色素成分呈现较高水平时也会阻扰A（吸光度），导致假阳性的情况出现。如果采用蔬菜整棵浸提的方法，可以有效避免假阳性结果发生[4-5]。

对于监管部门而言，首先通过制定严格控制农药施用的规范性和农产品检测全覆盖等相关制度，深入贯彻落实好“从农田到餐桌”的食品安全；其次加大对违规违法销售行为的处罚力度，通过提高违法成本，减少违法销售农产品的行为；建立蔬菜准入制度，流通到市场前的蔬菜需经检验合格后方可流入市场销售。可利用信息化手段加强检测结果的公示，如用“蔬菜健康码”等手段便于消费者查看检测结果。监管部门应加大监管频次，发现阳性或不合格样品应没收并销毁处理。

对于消费者而言，应尽量减少或避免购买市场周边的小贩所销售的蔬菜，买蔬菜还是选择来源于大型批发市场的货源。原因是：第一，路边的小贩没有受到市场监管；第二，对于小型种植户来说，大规模的种植农户在农药的使用方面比较规范或有专人指导，蔬菜中的农药残留超标情况会相对较少。