二甲双胍治疗对T2DM患者体内8-iso-PGF2α，11-dehydro-TXB2水平的影响

李进冬，高 一，杨淑芳，徐 震，薛 露，季晓慧

（南京医科大学附属泰州人民医院，江苏 泰州 225300）

糖尿病（diabetes mellitus，DM）是一种常见的内分泌代谢疾病，慢性高血糖是其重要的临床特征，其中大血管并发症已成为引起DM 患者死亡的首要病因。糖尿病与心血管疾病（cardiovascular disease，CVD）存在高度关联，加速心血管事件的发生。我国每年因糖尿病导致的CVD 死亡人数约50 万。近年来，2 型糖尿病（type 2 diabetes，T2DM）合并CVD 呈年轻化、患病率高、死亡率高，严重威胁人们健康[1]。2015 年美国心脏学会(AHA)和美国糖尿病学会（ADA）联合发布了《基于最新证据的成人2 型糖尿病患者心血管疾病预防科学声明》 ，指出应从体重、抗血小板治疗、血糖及 HbA1c 控制、血压和血脂管理方面预防T2DM 患者CVD 的发生。 因此，T2DM 的治疗重心除降糖治疗外，血管的保护也应受到重视。因此，寻找能有效控糖的同时又具备一定抗血小板作用的降糖药物，对T2DM 患者的健康及经济方面均有良好收益。

2014 年专家共识指出， 二甲双胍对心血管具有保护作用，并可降低T2DM 患者CVD 发生的风险。这可能与二甲双胍抑制活性氧生成， 降低T2DM 患者体内氧化应激指标水平有关[2]。8-异前列腺素 F2α（8-iso-PGF2α）是花生四烯酸在氧自由基催化下形成的一种中间产物，与糖尿病、肥胖、冠脉疾病和外周动脉粥样硬化病理生理改变密切相关[3]，8-iso-PGF2α升高是动脉粥样硬化的一个危险因素，其表达水平对于评估糖尿病、心血管的严重程度、抗氧化效果及其预后具有重要价值[4]。11-去氢-血栓素 B2（11-dehydro-TXB2）是血栓烷 B2（TXB2）经肝脏氧化酶或脱氢酶代谢后的产物。研究表明[5]，11-dehydro-TXB2水平与冠状动脉及其他血管病变的严重程度呈正相关，是发生脑卒中、心肌及其他心血管事件的危险因素，是反映体内血小板活化程度的特异性指标。

本文旨在研究二甲双胍治疗对T2DM 患者血糖、血脂、肝肾功能、 血清 8-iso-PGF2α、11-dehydro-TXB2水平的影响， 观察二甲双胍对T2DM 患者血小板活化的影响，为T2DM 患者预防CVD提供临床参考。

1 材料与方法

1.1 材料酶标仪（购自北京普朗新技术有限公司，型号：DNM-9602）；微量高速离心机（型号：TG16W）；培养箱（型号：GNP-9080）；全自动生化分析仪（购自东芝株式会式三广医疗公司，型号：TBA-120）；试验用二甲双胍缓释片（商品名：泰白，规格：0.5g，购自正大天晴药业集团股份有限公司）；人8 异前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)试剂盒（货号：JYM2034Hu）、人11 去氢血栓烷B2（11-dehydro-TXB2）试剂盒（货号：JYM1483 Hu）购自于武汉基因美科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 一般资料和实验分组 选择2019 年1 月至12 月在泰州市人民医院就诊的T2DM 患者30 例作为观察组（HG），采取运动疗法和饮食控制，不接受药物治疗（患者拒绝药物治疗，要求先行一般处理）；选择同期就诊于我院同意接受二甲双胍治疗的T2DM 患者30 例作为治疗组（MET），该组患者采用运动疗法、饮食控制联合二甲双胍（0.5g，qd）至少2 个月；同时，选择同期体检中心的健康人群30例作为健康对照组（NG）。

运动疗法：合理运动可以提高机体对糖、脂肪的摄取，并促进消耗和氧化分解，从而使得血糖水平下降。专科护士指导患者餐后1 小时开始运动，慢跑或快步30 分钟，以身体发热但不出汗为止，运动时不能喘粗气，以此运动量为主，监督保证实施。

饮食控制：在充分了解患者饮食习惯的基础上，由专科医师制定个体化饮食方案。合理平衡热量的摄入和能量的消耗，严格控制每餐热量，均衡每餐蛋白质、脂肪和糖类占比，监督患者少食多餐，严格按照糖尿病食谱进餐，定时监测血糖。

由1名糖尿病专科医师和1名糖尿病专科护士同质化管理患者，负责患者的饮食、运动指导和监督。

1.2.2 纳排标准 纳入标准：HG 组和MET 组患者均符合2 型糖尿病的诊断标准；血压需控制在（90/60mmHg~140/90mmHg）；均未接受过胰岛素治疗。排除标准：1 型糖尿病；存在心、肝、肾、脑等器官功能严重障碍；合并急慢性感染、外伤、组织坏死等疾病；合并酮症酸中毒或者其他严重糖尿病并发症；妊娠期和哺乳期女性；合并恶性肿瘤、血液性或者免疫性疾病；服用普罗布考等抗氧化药物及阿司匹林等抗血小板药物的患者。

2型糖尿病诊断标准：具有典型的糖尿病症状（如：多饮、多食、多尿等），并符合下列标准的任意一条：空腹血糖（FPG）≥7.0 mmol/L；餐后2h 血糖（2hPG）≥11.1 mmol/L；任意时间血糖 ≥11.1 mmol/L。

1.2.3 样本采集 记录各组人群性别、年龄、相关病史及用药情况，收集空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、谷草转氨酶 （AST）、谷丙转氨酶（ALT）、肌酐（CREA），尿素氮（BUN）数据。剩余样本经3000r/min 离心20 min 后取血清冻存于-80℃的冰箱内，待样本收集完全后测 8-iso-PGF2α和 11-dehydro-TXB2。

1.2.4 指标检测

1.2.4.1一般生化指标检测 血糖（FPG）采空腹静脉血，用己糖激酶法检测血浆血糖， 糖化血红蛋白（HbA1c） 采用乳胶凝集法检测； 血脂（TG、TC）和肾功能 （CREA 、BUN） 采用酶法检测；肝功能（AST、ALT）采用 IFCC 法检测。以上指标均在泰州市人民医院检验科生化实验室，采用全自动生化分析仪检测。

1.2.4.2 8-iso-PGF2α和11-dehydro-TXB2检测 于-80℃冰箱取出样本，常温下解冻，并于稀释样本前15 min 拿出试剂盒置于室温环境稳定，按照试剂盒说明书进行操作。

1.3 统计学方法使用 SPSS 22.0 统计软件处理数据，计量资料用均数±标准差（-x ± s）表示，计数资料用卡方检验比较，组间数据分析采用单因素方差分析，多个样本比较用 LSD 检验。P＜0.05为有统计学差异。

2 结果

2.1 各组人群基础特征值比较如表1 所示：健康对照组（NG）、观察组（HG）、二甲双胍治疗组（MET）三组间性别、年龄均无统计学差异（P均>0.05），说明入组病例具有可比性；结合图1所示，与NG 组比较，HG 和MET 组空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）明显升高（P均＜0.01），与HG组比较，MET空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）明显降低（P＜0.01、P＜0.05），说明二甲双胍能降低糖尿病患者血糖水平。三组之间肝功能（AST、ALT）、肾功能（BUN、CREA）均无统计学差异（P均>0.05）；对于血脂水平分析，三组之间总胆固醇（TC）无统计学差异（P>0.05），与NG组比较，HG与MET组甘油三酯TG）水平明显升高（P＜0.01），与HG组比较，MET组甘油三酯水平无明显变化（P>0.05）。

表1 各组人群基础特征值比较（ ± s，n=30）

表1 各组人群基础特征值比较（ ± s，n=30）

注：a vs b, P＜0.01；a vs c, P＜0.01；b vs c, P>0.05

特征值性别（男/女）年龄FPG HbA1c TC TG ALT AST BUN CREA NG 14/16 45.15±13.257 4.57±0.345 5.17±0.545 4.16±0.672 0.99±0.329a 19.89±8.313 20.33±4.412 4.86±0.751 60.67±12.98 HG 11/19 48.04±15.772 10.72±3.142 9.90±2.680 4.29±0.779 1.97±1.417b 26.70±16.064 24.57±9.519 5.42±1.915 53.65±21.062 MET 17/13 47.93±14.946 7.99±2.522 8.38±2.409 3.87±0.911 1.90±0.914c 20.15±10.163 20.93±8.185 5.80±1.642 62.05±15.697 P>0.05>0.05＜0.01＜0.01>0.05＜0.01>0.05>0.05>0.05>0.05

图1 各组空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）水平比较。NG、HG、MET 分别代表健康对照组、观察组、二甲双胍治疗组。

综上所述，所有入组病例肝肾功能正常，二甲双胍降低糖尿病患者血糖明显，但对糖尿病患者肝、肾功能、血脂无明显影响。

2.2 各组8-iso-PGF2α和11-dehydro-TXB2水平比较如图2 所示，与NG 组比较，HG 组和MET 组8-iso-PGF2α水平明显升高，差异具有统计学意义（P均＜0.01），与HG 组比较，MET 组8-iso-PGF2α水平显著降低，差异具有统计学意义（P＜0.01）；与NG 组比较，HG 组和MET 组11-dehydro-TXB2水平显著上升，差异具有统计学意义（P均＜0.01），与HG 组比较，MET 组11-dehydro-TXB2水平显著下降，差异具有统计学意义（P＜0.01）。综上所述，糖尿病能够增加体内8-iso-PGF2α和 11-dehydro-TXB2水平，应用二甲双胍治疗在一定程度上降低了糖尿病患者体内8-iso-PGF2α和11-dehydro-TXB2的水平。

图2 各组8-iso-PGF2α 和11-dehydro-TXB2 水平比较。NG、HG、MET分别代表健康对照组、观察组、二甲双胍治疗组。

3 讨论

心血管疾病是DM 最严重的并发症之一， 其发病风险较非糖尿病人群高达2~4 倍，严重影响到患者生活质量[6]。美国国家胆固醇教育计划成人治疗组（NCEP-ATPⅢ）指出：DM 是冠心病等危症[7]，75%的DM 患者最终死于血栓性疾病，其中血小板激活在DM 病理进程中起到关键作用。DM发展进程中伴随的肥胖、脂代谢紊乱、血管紧张素Ⅱ的激活等，均能够加速活性氧（reactive oxygen species，ROS）的生成，后者可通过细胞膜脂质过氧化及影响线粒体ATP 生成，使细胞内游离Ca2+浓度增加，进而激活磷脂酶，促进膜磷脂分解，并激活脂加氧酶 （lipoxygenase，LOX）、环氧合酶（cyclooxygenase，COX）形成前列腺素、血栓素、白三烯等生物活性炎症因子，进而导致胰岛β 细胞损伤凋亡，加重糖尿病进程。同时，ROS 可导致机体内多种细胞的氧化量增加，产生多种氧化应激产物，使血管粘附分子大量增加，激活核转录因子-κB 等，加剧动脉粥样硬化的形成。可见，体内氧化应激与炎症反应是T2DM 和CVD 共同的病理过程[8]。

8-iso-PGF2α是评价抗氧化应激的理想指标，11-dehydro-TXB2则反映了血小板的活化情况，且与T2DM 相关的CVD 发生有关，是发生脑卒中、心肌梗死及其他心血管终点事件的危险因素[7]。许多国家糖尿病诊疗指南中推荐二甲双胍作为超重和肥胖T2DM 患者控制血糖的一线用药，此外，其突出的抗氧化应激作用已被证实[9]。因此，二甲双胍可作为研究降糖药物抗血小板作用强度的首选药物。

国外的研究发现T2DM 患者体内8-iso-PGF2α和 11-dehydro-TXB2水平与血糖水平成正相关，在T2DM 早期的动脉粥样硬化血栓形成中起关键作用[10]。本研究中，T2DM 患者体内8-iso-PGF2α和11-dehydro-TXB2水平均明显高于健康人群，与国外的研究一致。这可能与T2DM 患者体内存在的强氧化应激反应有关。给予二甲双胍治疗一段时间之后，与未接受二甲双胍治疗的T2DM 患者相比，治疗组患者 8-iso-PGF2α和 11-dehydro-TXB2水平显著降低，同时 FPG、HbA1c 明显降低，且对患者肝、肾功能、血脂无影响。表明二甲双胍可抑制T2DM 血小板活化，这可能与氧化应激减弱，代谢水平改善有关。基于以上实验结果得出：二甲双胍具有的潜在心血管保护作用可能与 8-iso-PGF2α、11-dehydro-TXB2水平降低有关，为临床治疗糖尿病并发血管病变提供试验依据。