黏度法测定化妆品用原料透明质酸钠平均相对分子质量的不确定度评定

王秀娟 穆淑娥 闫婷婷 李敏 崔玉磊

摘 要：本文依据CNAS-GL006： 2019《化学分析中不确定度的评估指南》和JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》不确定评定程序，建立化妆品用原料透明质酸钠平均相对分子质量测定不确定度的数学模型，研究分析了整个测定过程中各种不确定度因素并进行评定，确定不确定度分量及合成不确定度。结果表明：当测定结果为1.41×106Da时，其扩展不确定度为0.04×106 Da（k=2），方法重复性引入的不确定度贡献较大。通过对测量不确定度的评定，可以更客观科学地评价该测量结果。

关键词：透明质酸钠，平均相对分子质量，不确定度

DOI编码：10.3969/j.issn.1002-5944.2023.07.034

Uncertainty Evaluation and Determination of Average Relative Molecular Weight for Cosmetic Raw Material Sodium Hyaluronate by Viscosity Method

WANG Xiujuan MU Shue YAN Tingting LI Min CUI Yulei

（Bloomage Biotechnology Co.， Ltd.）

Abstract： According to the procedure for uncertainty assessment descried in Guidance on Quantifying Uncertainty in Chemical Analysis （CNAS-GL006： 2019） and Evaluation and Expression of Uncertainty in Measurement （JJF 1059.1-2012）， the mathematical model of the uncertainty in the determination of average relative molecular weight of sodium hyaluronate was established. Various uncertainty factors in the whole determination process were studied and analyzed， and the uncertainty component was determined. The results showed that the expanded uncertainty was 0.04×106Da （k=2） when the measurement result is 1.41×106Da. The uncertainty caused by repeatability was greater. Through the evaluation of measurement uncertainty， the measurement results can be evaluated more objectively and scientifi cally.

Keywords： sodium hyaluronate， average relative molecular weight， uncertainty

測量不确定度根据所用到的信息，表征赋予被测量值分散性的非负参数。依据CNAS CL-01：2018《检测和校准实验室能力认可准则》，开展检测的实验室应具有评定测量不确定度评定控制程序。本文依据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定和表示》、《CNAS-GL006：2019化学分析中不确定度的评估指南》[1]和CNAS-CL01-G003：2021《测量不确定的要求》[2]规定的方法和程序，参照《QB/T4416-2012化妆品用原料 透明质酸钠》[3]进行化妆品用原料透明质酸钠平均相对分子质量的不确定度评定。

1 实验目的

用黏度法测定化妆品用原料透明质酸钠平均相对分子质量。

2 材料与方法

2.1 仪器

石油产品运动粘度测定器（恒温水浴：控温精度±0.1 ℃内）；

电子天平（精度0.1 mg）；

电子天平（精度0.01 g）；

计量器具：100mL容量瓶；

秒表：分度不大于0.2 s；

水银温度计：最小分度不大于0.1℃；

乌式黏度计（毛细管内径0.5～0.6 mm）。

2.2 检验依据

按QB/T 4416-2012《化妆品用原料 透明质酸钠》“5.4 平均相对分子质量”进行检测。

2.3 检测方法要点

检测方法[3]要点如下：

2.3.1 供试液的制备

精密称取透明质酸钠样品约0.1g（W1）于100 mL容量瓶中，用0.2 mol/L氯化钠溶液溶解，稀释至刻度，摇匀；再称取该溶液一定量（W2）至100 mL容量瓶中，加0.2 mol/L氯化钠溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试液。

2.3.2 测定

3 评定方法

3.1 建立数学模型

3.2 不确定度来源

从数学模型分析得出，不确定度的来源主要有重复性引入的不确定度、样品制备过程中引入的不确定度、样品制备稀释过程中引入的不确定度、样品测量过程中引入的不确定度。

4 各分量标准不确定度的评估

各分量标准不确定度的评估[4-5]如下：

4.1 测量重复性引入的不确定度

透明质酸钠平均相对分子质量的10次测量结果见表1。

此分量已经合并研究了各种随机因素，例如天平称量的重复性偏差、体积定容的重复性偏差、试样不均匀及环境条件波动等因素的影响，随后进行的不确定度分量评定时不再重复考虑。

4.2 样品制备过程中引入的不确定度

主要由称量样品W1、溶解过程容器校准和实验室温度引入。

4.2.1 称量样品W1时引入的不确定度

4.2.1.1 W总1称量不确定度评定

W总1称量不确定度主要来自3个方面：第一，称量的重复性，此因素已在3.1中体现，在此不再重复计算；第二，由天平称量不准（最大允许误差）引入的不确定度；第三，由天平标度的可读性（数字分辨力）引入的不确定度。

4.3 样品制备稀释过程引入的不确定度

主要由样品称量初始液W2、溶解过程容器校准和实验室温度引入。

4.3.1 样品稀释过程天平引入的不确定度

样品测量过程中，使用运动粘度测定器4次，则相对标准不确定度为：

4.6 扩展相对不确定度

取包含因子k=2（近似95%置信水平），其扩展相对不确定度为Urel= ucrel×k=0.026。

4.7 報告不确定度

按照《化妆品用原料 透明质酸钠》（QB/ T4416-2012）5.4 平均相对分子质量，当平均相对分子质量为1.41×106 Da时，其扩展不确定度为U=1.411060.026=36556≈0.04×106 Da，k=2。

5 结 论

本次依据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定和表示》、CNAS-GL006：2019《化学分析中不确定度的评估指南》和CNAS-CL01-G003：2021《测量不确定的要求》规定的方法和程序，对QB/T 4416- 2012《化妆品用原料 透明质酸钠》“5.4平均相对分子质量”进行不确定度评定，得出平均相对分子质量的扩展不确定度为U=0.04×106 Da，其中方法重复性引入的不确定度为urel（rep）=0.0117，样品制备引入的不确定度为ucrel1=0.0042，样品制备稀释过程引入的不确定度为 ucrel2=0.0026，样品测定过程引入的不确定度为 ucre3=0.002。方法重复性引入的不确定度贡献较大。最终得出扩展不确定度为包含因子k=2时，扩展不确定度U=0.04×106 Da，测定结果为（1.41±0.04）106 Da（k=2）。

参考文献

[1]中国合格评定国家认可委员会.化学分析中不确定度的评估指南： CNAS-GL006： 2019[S]. 北京：中国标准出版社，2019.

[2]测量不确定度评定和表示： GB/T 27418-2017[S].北京：中国标准出版社，2017.

[3]化妆品用原料 透明质酸钠： QB/T 4416-2012[S].北京：中国轻工业出版社，2012.

[4]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.测量不确定度评定与表示：JJF 1059.1-2012[S].北京：中国标准出版社，2012.

[5]化学检测领域测量不确定度评定利用质量控制和方法确认数据评定不确定度： RB/T 141-2018[S].北京：中国标准出版社，2018.

[6]王鹏.电子天平测量结果不确定度的评定研究[J].仪器仪表标准化与计量，2022（5）：38-40.

作者简介

王秀娟，硕士，工程师，从事药品、食品、医疗器械、化妆品等的检测研究。

（责任编辑：张瑞洋）