在饲料中添加酵母培养物对鲫鱼幼鱼生长性能、血清生化、消化酶活性、抗氧化能力及免疫力的影响

易建华， 王 钦#， 王 辉， 宋庆洋，敖慧玲， 曹诗宜， 别汉晴， 张 彦， 戴晋军

（1.农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室，湖北宜昌 443003；2.湖北省酵母功能湖北省重点实验室，湖北宜昌 443003）

近年来，随着水产养殖密度的增加，鱼类病害不断增多，限制了渔获产量的提升，严重威胁了鱼类健康，制约了水产养殖行业的发展。酵母培养物（Yeast Culture）是由发酵底物、酵母细胞及其代谢物组成的复合发酵产物，含有核苷酸、肽、β-葡聚糖、 甘露糖低聚糖和其他免疫调节成分（Jensen等，2008），因此，其常被用作免疫增强剂。 酵母细胞壁中甘露聚糖（MOS）和β-葡聚糖的结构成分有助于促进免疫力。酵母培养物中的β-葡聚糖可以有效降低胆固醇（CHO）并激活巨噬细胞释放各种免疫球蛋白，例如细胞因子和白细胞介素（Jayachandran 等，2018）。酵母培养物在提高动物生长性能，增强动物消化酶活性、机体免疫力和肠道健康方面具有积极作用（冷向军，2023）。 研究表明，酵母培养物可以显著提高草鱼、南美白对虾、和大鳞副泥鳅等的生长性能、消化酶活性、抗氧化能力和免疫力（李佑杰等，2021；李军涛等，2018；刘明等，2017）。本试验以鲫鱼为试验对象，在鲫鱼基础饲料中添加不同浓度的酵母培养物， 探讨酵母培养物对鲫鱼生长性能、血清生化、消化酶、抗氧化和免疫指标的影响， 为其在水产饲料中的应用及水产行业健康发展提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 试验饲料 酵母培养物为安琪酵母股份有限公司提供（湖北，宜昌）。按照配方设计将饲料分为4 个组， 在基础饲料中添加不同含量的酵母培养物，分别为对照组（CK）、0.1%酵母培养物添加组（S1）、0.3%酵母培养物添加组（S3）和0.5%酵母培养物添加组（S5）。 将原料粉碎过60 目筛，经混合制粒膨化成3.0 mm 粒径的颗粒饲料，冷藏储存备用。 饲料组成及营养水平见表1。

表1 试验饲料组成及营养水平（风干基础）%

1.2 养殖试验和样品采集 试验鱼购自湖北省当阳市某养殖场。 在分组前，进行投喂2 周的商品料来驯化鲫鱼。 挑选出300 尾健康活泼、规格均一且初始均质量为（13.00±0.50）g 的试验鲫鱼，设置4个处理，每个处理3 个重复，每个重复25 尾鲫鱼。

试验地点为安琪生物农业科技有限公司水产养殖基地。 在室内循环水养殖系统进行养殖试验，试验鲫鱼养殖容器的规格为200 cm×200 cm×100 cm。 养殖用水为经过曝气处理的自来水，水体24 h不间断增氧，配有加热装置以维持鲫鱼生长较适宜的水温。 养殖周期为8 周，每天投喂2 次（08：00~09：00 和17：00 ~ 18：00），并且定期对养殖用水进行更换。 投饵量为鲫鱼体重的1%~3%，之后依据每个试验组前一天的实际摄食量进行适当调整。每天察看鲫鱼摄食状况和死亡状况并记录，同时记录每天的水温。 饲养期间水温 （26.00±2.00）℃，pH（7.05±0.52），溶解氧（7.78±0.13）mg/L。

摄食生长试验结束后， 所有试验鱼空腹24 h，经120 mg/L MS-222 麻醉后进行称重及计数。 每桶选5 尾鱼，用ACD 抗凝剂浸润过的一次性注射器从尾静脉中抽血，在4 ℃，用离心机以3500 r/min离心10 min 获得血清，-70 ℃保存， 用于血清生化指标检测；取血后的5 尾鱼被解剖获取肠道，用于消化酶活性检测； 取血后的5 尾鱼被解剖获取肝脏，称重并计算肝体比，肝脏用于抗氧化酶活性及免疫应答指标检测。

1.3 生化分析 血清生化指标由宜昌市第一人民医院测定：包括血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、总蛋白（TP）、血清白蛋白（ALB）、尿素（UREA）、葡萄糖（GLU）、总胆固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C） 、碱性磷酸酶（ALP）。肠道脂肪酶、胰蛋白酶和α-淀粉酶测定采用商业试剂盒（南京建成生物工程研究所，南京）。肝脏组织匀浆液蛋白含量（TP）、总超氧化物歧化酶（TSOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）、总抗氧化能力（T-AOC）、丙二醛（MDA）及溶菌酶（LZM）等抗氧化及免疫指标，相关试剂盒均来源于南京建成生物工程研究所。

1.4 统计分析 采用Minitab21.3.1.0 软件对数据进行Tukey 检验， 结果以 “平均值±标准误”（mean±SE）表示，P < 0.05 代表显著差异。 生长性能相关计算公式如下：

式中：Nt为试验末鱼数量，尾；N0为鱼初始数量， 尾；Wt为试验终末均体质量，g；Wd为试验期间死亡鱼均体质量，g；W0为试验初始均体质量，g；t 为试验天数，d；F 为总摄食量，g；L 为终末平均体长，cm；Wz 为试验终末平均肝胰脏质量，g；Wv 为试验终末平均内脏团质量，g。

2 结果与分析

2.1 饲料中添加酵母培养物对鲫鱼幼鱼生长性能的影响 56 d 养殖试验结束后，在基础饲料中添加酵母培养物组鲫鱼幼鱼的终末体质量、 增重率和特定生长率显著提高（P ＜0.05），其中S3 组终末体质量、增重率和特定生长率最高，分别提高了16.77%、34.67%和23.93%；三个处理组均能降低鲫鱼幼鱼的饲料系数（P ＜0.05），其中S3 组饲料系数最低，降低了34.72%；与CK 组相比，S5 组鲫鱼幼鱼的肝体比和肥满度显著增加（P ＜0.05），分别增加31.58%和24.10%，S3 组鲫鱼幼鱼的肥满度显著增加20.51%（P ＜0.05）。 但各组间存活率和脏体比等差异不显著（表2）。

表2 酵母培养物对鲫鱼幼鱼生长性能的影响

2.2 饲料中添加酵母培养物对鲫鱼幼鱼血清生化的影响 56 d 养殖试验结束后， 血清中尿素、总蛋白、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、血糖含量无显著性差异。 与对照组相比，S1 组鲫鱼的血清谷草转氨酶显著升高38.45%（P ＜0.05） 和碱性磷酸酶显著升高47.87%（P ＜0.05），S3 组鲫鱼的血清甘油三酯显著降低24.40%（P ＜0.05） 和碱性磷酸酶显著升高90.06%（P ＜0.05），S5 组鲫鱼的血清白蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶和碱性磷酸酶显著升高（P ＜0.05），分别升高19.17%、56.23%、267.42%和58.48%，S5 组鲫鱼的血清低密度脂蛋白胆固醇显著降低35.25%（P ＜0.05）；S3 组鲫鱼的血清甘油三酯也显著低于S1 组（P ＜0.05）（表3）。

表3 酵母培养物对鲫鱼幼鱼血清生化的影响

2.3 饲料中添加酵母培养物对鲫鱼幼鱼肠道消化酶活性的影响 56 d 养殖试验结束后，与对照组相比，S3 组鲫鱼幼鱼的肠道脂肪酶和胰蛋白酶显 著 升 高 （P ＜0.05）， 分 别 提 高398.46%和307.40%， 并具有提高鲫鱼幼鱼肠道α-淀粉酶的趋势，但差异不显著（P ＞0.05），S5 组鲫鱼肠道脂肪酶显著升高267.70%（P ＜0.05）；S3 组鲫鱼幼鱼的肠道脂肪酶和胰蛋白酶显著高于S1 组和S2组（P ＜0.05）；S5 组鲫鱼的肠道脂肪酶显著高于S1 组（P ＜0.05）（表4）。

表4 酵母培养物对鲫鱼幼鱼肠道消化酶活性的影响

2.4 饲料中添加酵母培养物对鲫鱼幼鱼肝脏抗氧化能力及免疫力的影响 56 d 养殖试验结束后，丙二醛含量无显著性差异。 与对照组相比，S3组鲫鱼幼鱼的肝脏总抗氧化能力、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化酶显著升高（P ＜0.05）， 分别提高12.5%、35.77%和11.92%，并具有提高鲫鱼幼鱼肝脏溶菌酶含量的趋势 （P ＞0.05），S1 组鲫鱼的肝脏过氧化氢酶显著升高17.06%（P ＜0.05）； S3 组鲫鱼的肝脏过氧化氢酶显著高于S1 组 （P ＜0.05），S5 组肝脏谷胱甘肽过氧化物酶显著低于S1 组（P ＜0.05）（表5）。

表5 酵母培养物对鲫鱼幼鱼肝脏抗氧化能力及免疫力的影响

3 讨论

3.1 饲料中添加酵母培养物对鲫鱼幼鱼生长性能的影响 在饲料中添加酵母培养物可促进水产动物生长，在建鲤、虹鳟、团头鲂和南美白对虾等鱼类上均证明谷胱甘肽的促生长作用（周婷婷等，2013；Barnes 等，2007； 刘 哲 等，2003）。 刘 哲 等（2003）报道，在饲料中添加0.5%的酵母培养物能使建鲤的增重率提高32.8%， 饵料系数降低19.34%。 Barnes 等（2007） 研究发现，添加0.025%的酵母培养物能显著提高虹鳟的生长性能， 增重率提高45.76%。 李高锋等（2009）发现，在团头鲂饲料中添加0.2%的酵母培养物团头鲂特定生长率提高12.95%， 饵料系数降低9.87%。 刘明等（2017）研究表明，在南美白对虾饲料中添加0.5%酵母培养物能显著提高南美白对虾的生长性能，增重率提高了16.74%， 饲料系数降低了9.79%。李佑杰等（2021）报道，添加1%的酵母培养物能对大鳞副泥鳅的生长有促进作用， 饲料系数降低了19.29%。 在本研究中，饲料中添加0.1%、0.3%和0.5%酵母培养物均能促进鲫鱼生长，增重率分别提高了16.56%、34.67%和19.98%， 饵料系数分别降低了15.09%、34.72%和19.25%，最佳添加量为0.3%。酵母培养物能提高水产动物的生长性能和饲料利用率， 可能与其含有丰富的B 族维生素、小肽、核苷酸等活性成分有关。

3.2 饲料中添加酵母培养物对鲫鱼幼鱼血清生化的影响 血清生化指标一般可以反馈出水产动物的健康状况，血清中的白蛋白、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇可以反映机体对蛋白的利用率及脂类代谢； 谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性可以反映肝功能状态；碱性磷酸酶可以反映机体免疫力。本试验中，在鲫鱼饲料中添加0.5%酵母培养物可以显著提高血清中白蛋白含量， 表明酵母培养物提高了机体对蛋白质的利用率。 与陈坤海（2023）在加州鲈上的研究结果相似。 本试验中， 添加0.5%酵母培养物鲫鱼血清LDL-C 含量降低35.25%，添加0.3%酵母培养物鲫鱼血清TG 含量降低24.40%，表明酵母培养物对机体脂质代谢起到重要作用。 与桂良超等（2019）在凡纳滨对虾的研究结果类似。 可能是酵母培养物使脂肪酶活性的提高，加速了脂质代谢（Castillo 等，2014）。 本试验中， 添加0.1%、0.5%酵母培养物增加了血清AST 含量， 添加0.5%酵母培养物增加了ALT 含量， 但0.3%酵母培养物对AST 和ALT 却没有影响，表明在饲料中0.3%酵母培养物对肝脏健康无影响。 Liu 等（2018）在草鱼上也有类似的研究结果。 本试验中，添加0.1%、0.3%、0.5%酵母培养物可以显著提高血清中碱性磷酸酶含量， 分别提高47.87%、90.56%和58.48%， 表明酵母培养物可以提高机体免疫力。 与刘泓宇等（2021）在珍珠龙胆石斑鱼的结果类似。

3.3 饲料中添加酵母培养物对鲫鱼幼鱼肠道消化酶活性的影响 水产动物中肠道脂肪酶、蛋白酶活性能够影响机体对营养物质的吸收利用，从而影响水产动物的生长（唐黎等，2007）。 本研究中，添加0.3%酵母培养物能显著提高鲫鱼脂肪酶活性（398.46%）和胰蛋白酶活性（307.40%），添加0.5%酵母培养物能显著提高鲫鱼脂肪酶活性（267.69%），这与Wang 等（2022）在南美白对虾上的研究结果相似。酵母培养物提高了鲫鱼肠道消化酶活性，可能是与其含有丰富的小肽和氨基酸等强化了消化酶，同时含有的乳酸等酸性物质也降低了消化道的pH 有关，相关机理有待进一步研究。

3.4 饲料中添加酵母培养物对鲫鱼幼鱼肝脏抗氧化能力和免疫力的影响 研究表明，酵母培养物可调节人类（Possemiers 等，2013）、猪（Shen 等，2009）和鱼类（Berto 等，2016）的免疫反应，通过减少病原菌和改善肠道健康来维持健康和改善生长性能。TAOC、CAT、GSH-PX 和LZM 等指标常用来表征水产动物的抗氧化能力和免疫力。 本试验中， 添加0.1%酵母培养物可提高鲫鱼肝脏CAT 活力（17.06%）； 添加0.3%酵母培养物可显著提高鲫鱼肝脏T-AOC、CAT 和GSH-PX 活力， 分别提高了12.5%、35.77%和11.92%， 具有提高鲫鱼幼鱼肝脏溶菌酶含量的趋势； 添加0.5%酵母培养物可提高鲫鱼肝脏GSH-PX 活力（12.59%），这与雷宇杰等（2020）在斑点叉尾鮰和陈浔等（2024）在加州鲈上的研究结果相似。本研究表明酵母培养物可以增强鲫鱼抗氧化和免疫力， 可能与其含有的甘露寡糖、β-葡聚糖、小肽、核苷酸等多种活性成分有关。

4 小结

综上所述， 在饲料中添加酵母培养物对鲫鱼幼鱼的生长性能有促进作用， 并且提高了鲫鱼消化酶活性、抗氧化能力及免疫力，其中0.3%酵母培养物添加组效果最佳。