Flt3L、TGF-β1及EGFR与急性髓系白血病患者不良预后的关系

高 磊 赵 梅 魏兴禹

作者单位：466000 河南省周口市中心血站(高 磊);466000 河南省周口市第二人民医院(赵 梅);466000 河南省周口开元医院(魏兴禹)

白血病是血液系统恶性肿瘤,患者主要表现为造血功能障碍,根据发生恶性克隆增殖的细胞类型不同可分为髓系白血病和淋巴细胞白血病,其中临床发病以急性髓性白血病(acute myelogenous leukemia,AML)常见,占白血病发病患者的60%以上[1]。AML发病机制尚未完全阐明,考虑受环境、遗传等多种因素共同影响[2]。AML临床治疗以化疗为主,利用阿糖胞苷、柔红霉素等药物诱导化疗破坏白血病细胞,短期可有效延缓疾病进展,有75%～80%的患者可以得到有效缓解,但长期生存率仍无法保证,仅有不足30%的患者能得到治愈[3],临床普遍认为早期诊断是延长生存率的关键。FMS样酪氨酸激酶3配体(Fms-related tyrosine kinase 3 ligand,Flt3L)是具有促进造血干细胞、造血祖细胞增殖、分化功能的生长因子,其对维持造血功能十分重要,研究显示AML患者Flt3L水平与健康人有较大差异[4];转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)属于转化生长因子超家族,同时参与构建骨髓微环境,是造血系统主要负调节因子,能抑制血细胞增殖[5];表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是具有酪氨酸激酶活性的跨膜表面受体,在多种恶性肿瘤中高表达,其能介导肿瘤细胞增殖、转移[6],但在AML预后研究中讨论较少。本研究回顾分析我院收治的120例初诊AML患者资料,探究Flt3L、TGF-β1及EGFR与患者不良预后的关系,旨在为临床AML早期诊断提供依据。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取我院2018年5月至2021年5月收治的120例首次确诊AML患者为观察组,纳入标准:①年龄≥18岁;②符合2016年世界卫生组织发布的《造血和淋巴组织肿瘤分类》中相关标准[7];③首次确诊,入院前未接受相关治疗;④临床资料完整。排除标准:①合并重要器官器质性病变;②合并其他系统恶性肿瘤;③合并其他血液系统疾病;④随访过程中样本丢失。募集同期来院体检的100例健康志愿者为对照组。2组性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05),见表1。本研究经医院医学伦理委员会审核批准后展开。

表1 一般资料比较

1.2 血清学检验

清晨,取观察组AML患者及健康志愿者的空腹外周静脉血5 ml,置入EDTA抗凝管中,以3 500 rpm离心15 min分离上层血清待测。取待测血清样本,根据试剂盒要求,以酶联免疫吸附反应检测Flt3L、TGF-β1、EGFR水平。

1.3 随访

观察组AML患者出院后,每月电话随访1次追踪预后情况,其中预后不良判断参考《成人急性髓系白血病中国诊疗指南2017版》中的AML预后危险度分级标准[8],以死亡、复发、累及≥3条染色体的复杂异常核型判定为预后不良。

1.4 观察指标

①比较观察组和对照组的Flt3L、TGF-β1及EGFR水平。②将观察组根据随访预后情况分为良好组和不良组,比较不同预后患者的临床资料,包括:性别、年龄、FAB分型、血小板计数、白细胞计数、血红蛋白浓度、Flt3L、TGF-β1及EGFR水平。③采用COX模型分析指标与患者不良预后的关系,并以ROC曲线判断Flt3L、TGF-β1及EGFR水平对AML患者不良预后的预测效能。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 观察组和对照组Flt3L、TGF-β1及EGFR水平比较

观察组Flt3L、TGF-β1水平低于对照组,EGFR水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 观察组和对照组Flt3L、TGF-β1及EGFR水平比较

2.2 不同预后患者临床资料比较

观察组患者出院后随访3～12个月,中位随访时间10个月,存活86例,死亡12例,复发22例,预后不良发生率28.33%(34/120)。不同预后患者的Flt3L、TGF-β1及EGFR水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),见表3。

表3 不同预后患者临床资料比较

2.3 影响AML患者预后的COX模型分析

COX模型分析显示Flt3L、TGF-β1及EGFR水平为AML患者预后不良的独立影响因素(P<0.05),见表4。

表4 影响AML患者预后的COX模型分析

2.4 Flt3L、TGF-β1及EGFR水平预测AML患者不良预后的ROC曲线

经ROC曲线分析显示,Flt3L、TGF-β1及EGFR水平预测AML患者预后不良的AUC为0.874、0.838、0.858,见表5、图1。

图1 Flt3L、TGF-β1及EGFR水平预测AML患者不良预后的ROC曲线

表5 Flt3L、TGF-β1及EGFR水平预测AML患者不良预后的ROC曲线参数

3 讨论

AML是临床主要白血病类型,有进展迅速、预后差、死亡率高等特点。此外,AML发病机制尚未明晰,临床表现差异较大,早期诊断及预后判断较为困难,因此探索多样化的AML标志物具有重要意义。

Flt3是Ⅲ型受体酪氨酸激酶,是由Flt3基因编码的蛋白质,其基因突变是导致AML复发的主要原因之一[9]。Flt3由993个的氨基酸组成,主要在骨髓中表达,参与造血系统。Flt3L是Flt3的配体,主要在骨髓基质干细胞中合成,其与Flt3结合时可活化Flt3的酪氨酸结构域,形成二聚体进而激活P13K/AKT和MAPK通路相关信号分子,从而发挥调控造血干细胞和造血祖细胞增殖、分化、迁移等作用[10]。本研究结果显示AML患者Flt3L水平低于健康志愿者(P<0.05),与Milne等[11]研究结果类似,提醒早期检测Flt3L有助于诊断AML。比较不同预后患者血清学指标显示良好组Flt3L水平高于不良组,且COX分析显示其为AML预后不良独立影响因素(P<0.05),经ROC曲线分析其预测预后不良的AUC为0.874,提醒诊断早期检测Flt3L水平可有效预测不良预后。此外,Flt3L检测较Flt3基因检测便捷,更有利于动态追踪以及时采取对症治疗措施。

TGF-β1是多效应细胞因子TGF-β的同分异构体,可参与胚胎的生长发育过程,并且能通过自分泌或旁分泌的方式通过细胞表面受体途径来调控细胞的增殖分化,此外还具有促进细胞外基质形成、免疫调节、促血管生成等作用[12]。杨丽媛等[13]观察经TGF-β信号通路抑制剂LY364947处理的白血病细胞的细胞周期及凋亡情况,发现抑制TGF-β信号通路能够抑制白血病细胞的体外增殖,诱导细胞凋亡,降低细胞迁移及侵袭能力。本研究结果显示AML患者与健康人之间TGF-β1水平差异明显,而且预后不良的AML患者TGF-β1水平更低,经COX分析及ROC曲线分析发现TGF-β1水平是AML患者预后不良独立影响因素,存在较高的预测预后的效能,分析原因一方面是TGF-β1能抑制白血病细胞增殖,避免复发,另一方面Jäger等[14]研究发现TGF-β1能诱导健康CD34+造血干细胞及祖细胞功能抑制。

EGFR是具有酪氨酸激酶活性的受体,其能通过与EGF结合后磷酸化激活P13K/AKT和MAPK等多条通路,进而参与细胞增殖、分化、迁徙等生理过程中,常在肿瘤组织中异常激活。Mu等[15]研究显示调节EGFR家族表达的MYO1D能通过诱导PI3K/AKT信号传导和ERK信号通路调节AML的生长。本研究结果显示AML患者与健康志愿者及不同预后的AML患者的EGFR水平有明显差异,经COX及ROC曲线得知其水平可作为预后不良预测指标,提醒其参与AML疾病进展及复发。

综上所述,不同预后的AML患者Flt3L、TGF-β1及EGFR水平不同,三者水平变化均与预后相关,且有较好预测AML患者预后的效能,检测其水平变化有助于为制定患者早期诊治方案提供参考。