MnSOD基因Val16Ala多态性与前列腺癌骨转移患者易感性的关系
2024-01-17孙俊红张方方张丽媛李雷花
孙俊红 张方方 张丽媛 李雷花
作者单位：457000 河南省濮阳市人民医院
前列腺癌疾病属于临床上常见的上皮性恶性肿瘤,主要发生于男性生殖系统。近几年,随着人们生活方式及饮食习惯的变化,前列腺癌疾病的发生率逐渐增加[1]。晚期前列腺癌患者发生骨转移的几率比较大,前列腺癌骨转移患者并发骨痛,严重情况下,可能引起病理性骨折,影响其生活质量[2]。前列腺癌骨转移疾病的发病原因备受关注。目前,大多数研究学者表示前列腺癌骨转移疾病的发生主要与遗传及环境因素有关[3]。相同环境下,不同个体前列腺癌骨转移的发病风险也存在差异性,进一步表明遗传因素属于前列腺癌骨转移易感性关键原因[4]。目前关于基因多态性与前列腺癌易感性相关的研究较多[5-6],但是其潜在发病机制尚且不清楚。机体正常情况下,锰超氧化物歧化酶(MnSOD)主要通过清除机体内多于的氧物质,目的为维持氧化-还原系统,但是若此系统被破坏,ROS过剩,引起氧化应激反应,最终促进肿瘤疾病发展[7]。研究证实,MnSOD基因Ala多态性与多种肿瘤发病风险有关,如食管癌[8]、乳腺癌[9]、前列腺癌[10]等,尤其前列腺癌。但关于MnSOD基因Ala多态性与前列腺癌骨转移发病关系值得探讨。
1 材料与方法
1.1 研究对象
选择本院肿瘤科2019年3月至2021年3月前列腺癌患者94例为研究对象。纳入标准:①本研究纳入的研究对象均中华医学会泌尿外科分会符合《2019版EAU前列腺癌指南更新摘要》中关于前列腺癌疾病的诊断标准[11];②均为首次确诊的患者;③以往均未采用去势或者药物治疗;③年龄均在50-80岁;④前列腺癌分期均≥M1b期;⑤均无心、肝、肾等疾病重要脏器障碍的患者;⑥临床资料完整。排除标准:①既往存在精神异常的患者;②合并严重骨折疾病史者;③合并血液系统类、代谢性类疾病史者;④其他部位合并恶性肿瘤的患者;⑤既往具有肿瘤手术史的患者。本研究纳入对象均签署对研究的知情同意书且研究设计符合《赫尔辛基宣言》。根据患者是否发生骨转移进行分组,将发生骨转移的前列腺癌患者作为骨转移组,将未发生骨转移的前列腺癌患者作为前列腺癌组。收集入组研究对象年龄、病程、TNM分期、体质量指数等临床资料。
前列腺癌骨转移的诊断标准[12]:根据《2011版中国泌尿外科疾病诊断治疗指南》,即①患者存在明显的临床症状,如排尿困难、血尿以及骨转移造成的临床症状;②经肿瘤标记物证实;③均经过直肠指诊、B超、CT以及MRI等检查存在肿块;④经穿刺活检病理证实,且骨扫描显示具有至少1处的骨转移病灶。
1.2 研究方法
1.2.1 主要仪器与试剂 主要仪器:-80 ℃冰箱(澳柯玛生物医疗,DW-86L290);PCR仪(美国/Thermo Scientific,PikoReal);DNA提取试剂盒(美国/MP Biomedicals,50 preps);MnSOD基因引物设计及合成(美国BLP,Dr.Oligo);主要试剂:溴化乙锭(钰博生物,1.5 mL);3%琼脂糖(雅吉,1 g)。
1.2.2 MnSOD基因多态性检测 入院当天抽取肘部静脉血溶液2～5 ml,置于-80 ℃冰箱,酚-氯仿抽取基因DNA,聚合酶链式反应-限制性片段长度多态法(PCR-RFLP)检测基因型。Primer Premier 5.0设计引物,上游引物:5'-CAGATGTAGTGGTTAGCGCC-3';下游引物:5'-CATGGATTGCGCTTAAGGGC-3';PCR反应条件:94 ℃预变性3 min,94 ℃变性30 s,58.5 ℃退火45 s,72 ℃延伸7 min。采用3%琼脂糖凝胶电泳检测酶切产物,溴化乙锭染色,数码凝胶成像系统确定MnSOD基因Val16Ala基因型。
1.3 统计学分析
2 结果
2.1 两组临床资料比较
前列腺癌患者发生骨转移40例,即骨转移组40例,未发生骨转移患者为前列腺癌组54例。两组年龄、病程、TNM分期、体质量指数等临床资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),见表1。
表1 两组临床资料比较
2.2 两组MnSOD基因Val16Ala遗传平衡检验
骨转移组和前列腺癌组MnSOD基因Val/Val、Val/Ala和Ala/Ala基因型实际频数和理论频数分布比较,差异无统计学意义(P>0.05),见表2。
表2 两组MnSOD基因Val16Ala遗传平衡检验
2.3 两组MnSOD基因Val16Ala多态性分布比较
骨转移组MnSOD基因Ala/Ala基因型、Ala等位基因频率高于前列腺癌组,Val/Val基因型频率、Val等位基因频率低于前列腺癌组,差异具有统计学意义(P<0.05),见表3。
表3 两组MnSOD基因Val16Ala多态性分布比较(例,%)
2.4 携带不同基因型前列腺癌骨转移患者临床特征比较
MnSOD基因Val16Ala基因型与前列腺癌骨转移患者PSA、年龄以及Gleason评分无关(P>0.05);TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期患者Ala/Ala比例[75.00%(18/24)]显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者[37.5%(6/16)](P<0.05)。见表4。
表4 携带不同基因型前列腺癌骨转移患者临床特征比较/例
3 讨论
关于肿瘤遗传易感性属于目前研究热点。尤其关于MnSOD基因多态性与肿瘤疾病之间的关系受到越来越多研究学者的关注,发现MnSOD基因多态性可以参与多种肿瘤疾病进展,如前列腺癌[13]、肝癌[14]以及肺癌[15]等。MnSOD主要来源于线粒体,属于一类较为关键的抗氧化酶,主要将O2-转化氧化为H2O2,再经过氧化酶等物质的转化,最终分解为水及氧气,使细胞表现为无毒化[16]。MnSOD基因表达水平下降后,ROS浓度上升,引起细胞内DNA、脂质等水平异常增加,进一步导致正常细胞出现异常分化,同时促进肿瘤疾病的发生和发展。MnSOD基因启动子区域处16号位点,T转为C,可引起Val转为Ala,无法有效清除线粒体内ROS物质,从而促进肿瘤进展。
前列腺癌属于男性好发疾病,目前,已有多项研究证实了MnSOD基因Val16Ala多态性与前列腺癌易感性存在关系,但是也有研究表明两者无关系,同时MnSOD基因Val16Ala多态性与前列腺癌骨转移之间的关系研究报道不多。由此,本次研究分析了MnSOD基因Val16Ala多态性与前列腺癌骨转移患者的关系。结果显示,骨转移组MnSOD基因Ala/Ala基因型、Ala等位基因频率高于前列腺癌组,Val/Val基因型频率、Val等位基因频率低于前列腺癌组,差异具有统计学意义(P<0.05),提示MnSOD基因Ala等位基因突变可能促进前列腺癌骨转移疾病的发病风险,此基因rs16位点单核苷酸多态性与疾病进展有关,也可能是前列腺癌骨转移疾病发生和发展的遗传因素之一,MnSOD是SOD调节的关键酶,Ala等位基因可能通过干扰MnSOD酶的活性进而影响前列腺癌骨转移疾病的发生和发展。张超贤等人的研究中[17],研究显示MnSOD基因携带Ala基因的频率在Ⅲ～Ⅳ期患者明显高于Ⅰ～Ⅱ期,其研究结果与本次研究结果具有一致性。另外在WIKLUND的研究中[18],研究显示MnSOD基因多态性与前列腺癌发病风险无关,与本次研究存在一定差异性,分析其原因可能与种族、样本量不同存在关系。
综上所述,MnSOD基因Val16Ala多态性与前列腺癌骨转移患者易感性存在关系,可能存在促进前列腺癌发生骨转移的作用。但是本研究也存在不足,关于遗传因素与前列腺癌骨转移之间的关系还需要大样本、多中心的随机对照研究,以进一步提高研究结果的准确性,同时为预防以及控制前列腺癌骨转移提供理论依据。
