乳腺癌组织中FOXP3、CMTM6、Shoc2表达及其临床意义

李 平 赵 培 李玉环 王丽娜 于 洋

作者单位：450003 河南省人民医院,河南省护理医学重点实验室,郑州大学人民医院

乳腺癌为临床常见的恶性肿瘤,具有较高的发病率与死亡率[1]。近年乳腺癌的治疗手段在持续进步,但仍然有超过50%的患者经治疗后会出现癌细胞远处转移情况,继而危及生命,预后较差[2-3]。因此,从分子角度阐明乳腺癌的转移、复发机制,探寻乳腺癌新的分子靶标,对于完善乳腺癌患者的治疗方案和改善预后具有重要意义。叉头框蛋白P3(FOXP3)是FOX蛋白家族成员,在胚胎发育、免疫调节以及肿瘤发生发展中均起到重要作用[4]。趋化素样因子超家族6(CMTM6)是一种广泛表达的蛋白质,参与表现遗传调控、胚胎发育和肿瘤发生[5]。Shoc2蛋白广泛存在于生物体内,在Ras/ERK通路内发挥关键作用。但临床关于三项指标与乳腺癌患者的预后之间的联系报道较为缺乏,还有待进一步研究。基于此,本研究以51例乳腺癌患者为研究对象,探究FOXP3、CMTM6、Shoc2在乳腺癌内的表达与患者临床病理特征及预后之间的关系。信息示下。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选取2018年3月至2019年3月本院收治的51例女性乳腺癌患者为研究对象,研究经医学伦理委员会批准。纳入标准:经病理检查证实为乳腺癌;患者病历有关资料齐全;患者纳入遵照自愿原则,依从性高;术前未行放化疗,签署知情同意书。排除标准:存在其他恶性肿瘤者;合并全身性感染者;存有精神疾病者;合并凝血功能、免疫系统异常者;存有认知、视听或语言交流障碍者;存在血液系统病症者;妊娠期、哺乳期女性;合并严重的脑器质性疾病者。所有患者的年龄41～68岁,平均年龄(52.78±2.34)岁;体重指数(BMI)18.6～27.3 kg/m2,平均BMI(23.56±1.79)kg/m2。

1.2 方法

(1)标本采集:术中采集所有患者的癌组织与癌旁正常组织,留存待检。(2)检测方法:首先把全部组织标本制作成4 μm切片,施行脱蜡、水化处理,并行抗原修复,滴加3%过氧化氢溶液,在室温下孵育15 min,之后以磷酸缓冲盐溶液(PBS)洗涤3次;然后以10%山羊血清封闭0.5 h,滴加一抗,置于4 ℃冰箱中过夜,次日以PBS洗涤3次,滴加二抗之后于25 ℃环境下孵育30 min;之后以苏木精染色,脱水封片,镜检。(3)阳性评估标准:①染色强度:无色:0分;浅黄色:1分;棕黄色:2分;棕褐色:3分。②阳性细胞数评分:阳性表达率<5%:0分;阳性表达率>5～25%:1分;阳性表达率>25～50%:2分;阳性表达率>50%:3分。两者乘积>3分为阳性表达,反之为阴性表达。

1.3 观察指标

(1)FOXP3、CMTM6、Shoc2阳性表达情况。(2)收集患者的年龄、BMI、肿瘤大小、分化程度、临床分期、淋巴结转移等一般资料,分析FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与上述病理特征之间的关系。(3)随访3年,统计患者生存率,并分析FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与患者生存率间的关系。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 FOXP3、CMTM6、Shoc2阳性表达情况

癌组织FOXP3、CMTM6、Shoc2阳性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 FOXP3、CMTM6、Shoc2阳性表达对比(例,%)

2.2 FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与患者临床病理特征间的关系

FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与乳腺癌患者的年龄、BMI、肿瘤大小无关(P>0.05);FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与患者的分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。见表2。

表2 FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与患者临床病理特征间的关系(例,%)

2.3 FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与患者预后的关系

FOXP3、CMTM6、Shoc2阳性表达患者的3年生存率分别为35.00%(14/40)、36.84%(14/38)、36.59%(15/41),低于阴性表达患者的81.82%(9/11)、69.23%(9/13)、80.00%(8/10),差异有统计学意义(χ2=5.864、4.104、4.492,P=0.016、0.043、0.034)。见图1～3。

图1 FOXP3表达与患者预后关系的Kaplan-Meier图

图2 CMTM6表达与患者预后关系的Kaplan-Meier图

图3 Shoc2表达与患者预后关系的Kaplan-Meier图

3 讨论

乳腺癌是女性最为常见的恶性肿瘤,近年来乳腺癌的发病率与死亡率呈明显增长趋势,严重影响女性健康[6-7]。乳腺癌复发率较高,患者预后较差,临床现阶段关于乳腺癌的发病机制尚未完全明确,多认为与肿瘤免疫逃逸、肠道微生物菌群失调、抑癌基因失活等密切相关[8-9]。及时明晰乳腺癌的具体发病机制及与患者预后有关的分子标志物,对指导临床进行更具规范性的治疗、改善患者的预后尤为重要[10-11]。

FOXP3为转录因子蛋白,属于脊椎动物叉头样转录因子家族成员,包含11个外显子与10个内含子,能够参与一系列基因的转录与调控,进而促使肿瘤发生与发展[12]。CMTM家族是一种特殊的结构域蛋白,称作MARVEL结构域,在穿膜蛋白与分泌蛋白的转运内均发挥重要作用。而CMTM6是其家族内的一个成员,与胚胎发育、肿瘤发生等密切相关,可通过维持程序性死亡配体1的表达调节抗肿瘤免疫[13-14]。Shoc2蛋白可为Ras-ERK信号通路的激活提供作用平台,将信号分子定位在细胞内特定位点为其与高浓度的作用底物发生联系提供微环境,并可通过正反馈和负反馈信号调节通路信号的强度,并保护活化的信号分子的活性。Shoc2蛋白在肿瘤的发生发展中同样存在重要的意义,通过促进Ras通路的激活调节细胞异常增殖和微丝微管重新构造,从而影响不同肿瘤细胞的恶性潜能,促使肿瘤发展[15]。本研究结果显示,癌组织FOXP3、CMTM6、Shoc2阳性表达率高于癌旁组织,提示三项指标在乳腺癌组织内表达水较高。本研究结果显示,FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与乳腺癌患者的年龄、BMI、肿瘤大小无关;FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与患者的分化程度、临床分期、淋巴结转移有关,表明FOXP3、CMTM6、Shoc2与乳腺癌的发生、发展联系紧密。本研究结果还显示:FOXP3、CMTM6、Shoc2阳性表达患者的3年生存率低于阴性表达患者,提示FOXP3、CMTM6、Shoc2阳性表达的乳腺癌患者预后更差。值得需注意的是,本次研究仍然存在纳入样本量较少的局限性,可能会对本次研究结果的精准性构成一定的干扰。因此,临床之后还需不断完善试验设计,扩大样本量,以进行更深层次的分析。

综上所述,FOXP3、CMTM6、Shoc2在乳腺癌组织内呈高表达,三项指标与分化程度、临床分期、淋巴结转移密切相关,参与肿瘤的发生与发展,且阳性表达患者3年生存率更低,预后更差,临床需予以高度重视。