PTEN和PAX-2在子宫内膜上皮内瘤变和非肿瘤性子宫内膜增生鉴别诊断中的应用价值分析

郜庆祖，王鑫宇，曲 雪，朱建雯

（扬州洪泉医院病理科，江苏 扬州 225200）

子宫内膜增生性病变包括单纯性增生（伴或不伴非典型性）、复杂性增生（伴或不伴非典型性）、子宫内膜上皮内瘤变（Endometrial Intraepithelial Carcinoma，EIN）、子宫内膜癌等一系列病变[1-2]。不伴有非典型性的单纯性增生和复杂性增生为非肿瘤性子宫内膜增生（Non Tumor Endometrial Hyperplasia，NTEH）。伴有非典型性的子宫内膜增生一部分为反应性的，一部分则为肿瘤性的，属于EIN。子宫内膜增生不伴非典型性为非肿瘤性病变，不易发展为子宫内膜癌，而EIN 是肿瘤性病变，发展成癌的比例高，因此二者的鉴别有重要意见[3-4]。磷酸酶和张力蛋白质脱酰酶（PTEN）、编码膀胱和上尿路皮上细胞中表达的转录因子（PAX-2）在子宫内膜病变和肿瘤发生、发展中的作用较为显著[5-6]。为了分析二者在子宫内膜病变组织和正常组织中的表达形式及临床病理特征等问题，本研究特将2020 年8 月至2023 年7 月我院病理科存档的子宫内膜标本作为研究对象，分析PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 鉴别诊断中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2020 年8 月至2023 年7 月我院病理科存档的手术切除子宫标本和诊刮子宫内膜标本，其中NTEH50 例，年龄28 ～63 岁，平均（42.53±5.13）岁。EIN62 例，年龄27 ～63 岁，平均（42.83±5.28）岁。全部患者对研究知情，并签署同意书，研究通过医院伦理委员会批准。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：（1）符合异常子宫出血临床诊断者；（2）均在本院接受检查且疑似子宫内膜病变者；（3）病历资料完整无误者；（4）阴道不规则出血及贫血者。排除标准：（1）合并严重心肾功能障碍者；（2）患有精神疾病，无法正常沟通、交流者；（3）合并妇科肿瘤疾病者；（4）短期内接受激素治疗者；（5）使用宫内节育环者；（6）合并血液系统疾病者。

1.3 方法

所有样本均进行PTEN 和PAX-2 免疫组化检查及常规病理检查，所有标本均在40 g/L 甲醛溶液中固定，石蜡包埋、切片后进行检查，病理切片由两位具有高级职称的病理专家阅片做出诊断。试剂均购于福州迈新生物技术开发有限公司，PTEN 和PAX-2 为兔抗人多克隆体抗体。免疫组化检查：对病理组织进行石蜡包埋、切片（4 μm），粘在防脱载玻片上，恒温箱60 ℃烘烤30 min 后放置在二甲苯溶液Ⅰ、Ⅱ中浸泡30 min，梯度酒精脱水各5 min。用磷酸盐缓冲溶液洗涤3 次，5 min/次。3%过氧化氢灭活内源性过氧化物酶，用磷酸盐缓冲溶液再次洗涤3 次，5 min/次。使用枸橼酸盐高压锅加热至沸腾的抗原修复步骤，持续10 min，在室温下冷却，随后采用磷酸盐缓冲溶液洗涤，共洗涤3 次，5 min/次。滴加第一抗体，室温孵育60 min，然后采用磷酸盐缓冲溶液洗涤（0.01 mol/L磷酸盐缓冲粉+1000 mL 纯净水，pH 值为7.2 ～7.4之间），洗涤3 次，5 min/ 次。滴加第二抗体，室温孵育20min，再次采用磷酸盐缓冲溶液洗涤，洗涤3次。使用显色剂（DAB）底物进行显色，置于室温下观察显色情况，显色反应持续5 ～10 min。随后，终止显色反应，并进行苏木素染色5 min。蒸馏水冲洗后，进行盐酸乙醇分化，再次置于蒸馏水中冲洗。随后在氨水中返蓝，进行梯度乙醇脱水，接着进行梯度二甲苯透明，最后使用中性树胶进行封片。

1.4 观察指标

（1）观 察PAX-2、PTEN 在EIN 和NTEH 中 的不同表现形式。（2）比较PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 中的表达情况，以病理诊断结果为金标准，分析PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 诊断中的应用情况，进而分析两者诊断结果与病理诊断结果之间的接近程度。（3）观察PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 诊断中的应用价值，包括灵敏度、特异度、准确率。

1.5 统计学方法

用SPSS 25.0 软件处理数据，计数资料用% 表示，行χ² 检验；计量资料符合正态分布，用均数± 标准差（±s）表示，行t检验，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 PAX-2、PTEN 在EIN 和NTEH 中的不同表现形式

PAX-2、PTEN 在EIN 和NTEH 中的不同表现形式见图1。

图1 PAX-2、PTEN 在EIN 和NTEH 中的不同表现形式

2.2 PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 中的表达情况

PAX-2 在子宫内膜病变中的阴性率高于PTEN，且阴性率更接近病理诊断结果。PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 中的表达情况见表1。

表1 PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 中的表达情况（例）

2.3 PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 诊断中的应用价值

PAX-2 在子宫内膜病变诊断中的灵敏度、特异度、准确率均高于PTEN。详见表2。

表2 PTEN、PAX-2 在EIN 和NTEH 诊断中的应用价值（%）

3 讨论

近些年流行病学相关研究发现，子宫内膜癌的发病率呈逐渐增高的趋势，发病年龄也越来越年轻化[7]。子宫内膜癌发病的分子生物学特性研究可以在疾病的早期诊断、治疗中提供参考，对早期预防和治疗疾病具有积极意义。NTEH 和EIN 是两种不同性质的子宫内膜病变，子宫内膜增生是一种非肿瘤性病变，其特征为子宫内膜增生超过正常界限，导致子宫内膜厚度增加，当增生过程中未出现细胞学上的非典型性改变时，称为子宫内膜增生不伴非典型性[8-9]。NTEH 患者在临床上无明显症状，可能会出现异常子宫出血、月经不规律等症状，癌变的发生率相对较低，通常被认为是良性病变，荷尔蒙疗法（如口服避孕药或黄体酮替代治疗）、手术干预（如刮宫）可能在本病的治疗中发挥作用[10]。EIN 是一种癌前病变，与子宫内膜癌的关系密切。EIN 被定义为局限性子宫内膜上皮异常增生，其特征包括腺体密集，腺体与间质比例增加，结构的不规则性、不均匀性和细胞异质性[11-12]。EIN与子宫内膜增生症状相似，会伴随异常子宫出血、月经不规律等症状，是一种癌前病变，可增加子宫内膜癌的发病风险，且15% ～30% 的患者最终病情会发展为子宫内膜癌。

本研究通过对NTEH 和EIN 中PAX-2、PTEN的表达形式进行观察与分析发现，PAX-2 和PTEN 在大多数EIN 中表达缺失，PAX-2 的正常腺体核强阳性与EIN 腺体对比明显。PTEN 在多数EIN 中表达缺失（完全不着色），间质细胞强阳性，正常腺体微弱阳性，非肿瘤性病变与EIN 差异小，不易观察[13]。另外，本研究结果显示，PAX-2 在NTEH 和EIN 鉴别中的阴性率高于PTEN，且阴性率检测结果与金标准的检测结果较为接近，可见该检测方式在子宫内膜病变的诊断中具有较高的应用价值。PAX-2 与PTEN表达的缺失与NTEH 和EIN 之间具有较大的关联，其中PTEN 作为抑癌基因，具有细胞增生负调节的作用。PAX-2 的缺失与NTEH 和EIN 之间也具备一定的关系[14]。因为PAX-2 是一种转录因子，对胚胎发育和细胞命运具有一定的决定性作用，因此PAX-2 异常极易引起细胞的增殖和分化。PTEN 作为一种肿瘤抑制基因，主要负责细胞生长、分化与凋亡的调控，该指标的缺失极易引发子宫内膜癌等疾病的发生。因此，PTEN 的缺失与子宫内膜增生、瘤变具有一定的关联性。但二者相比之下，PAX-2 与NTEH 和EIN 之间的关联性更为显著，在子宫内膜病变的诊断中具有更佳的指导作用。尽管如此，要想将PAX-2 检测在NTEH 和EIN 鉴别中广泛应用，还需要在未来的研究中纳入更多样本量展开分析，探讨该检测方式在子宫内膜病变诊断、治疗中的应用价值，并探究该检测方式是否可作为治疗效果评估的生物标志物。

综上所述，在NTEH 和EIN 的鉴别诊断中，PAX-2 的准确率、灵敏度和特异度均高于PTEN，可以在子宫内膜病变的早期诊断中作为指导和辅助诊断方式，为临床医生提供有效参考。