柱前衍生气相色谱法测定植物油中的脂肪酸

唐 鹏，唐 亮

（1.空气产品气体（中山）有限公司，广东 中山 528434；2.北京氦普北分气体工业有限公司，北京 100095）

0 引言

食用油脂中最主要的成分是脂肪酸，构成脂肪酸的有饱和、不饱和及特殊脂肪酸，以及几何及位置异构体等[1]。油脂的营养价值主要取决于它的脂肪酸组成及其配比。我国主要使用的植物油，由于种类、产地不同，其主要成分也有差别；同时，近年国内市场的食用植物油掺伪现象也时有发生。因此，植物油的成分分析也越来越得到人们的重视。

气相色谱法具有分离效率高、成本较低等特点，可便捷、准确地实现多种不同脂肪酸的分离和测定[2]，使用气相色谱进行脂肪酸分析时必需进行衍生化处理，酯化衍生化方法是气相色谱中常用的柱前衍生化方式[3-4]。本文采用柱前酯化衍生化气相色谱法测定食用植物油中的脂肪酸的组成，为合理利用食用油提供科学依据。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

仪器为SP-3420A 型气相色谱仪（北京北分瑞利分析仪器（集团）有限责任公司），配有FID 检测器，填充柱注样口；BF-2002 色谱工作站（北京北分瑞利分析仪器（集团）有限责任公司）；色谱柱：Φ3 mm×2 m不锈钢填充柱，20% DEGS 涂于酸洗101 白色担体上；载气：高纯氮（北京氦普北分气体工业有限公司，纯度≥99.999%）。

试剂有氢氧化钠、甲醇、三氟化硼、正己烷、氯化钠、无水硫酸钠，均为分析纯；氢氧化钠甲醇溶液：约0.5 mol/L；三氟化硼甲醇溶液：质量分数12%～15%。

1.2 甲酯化试样制备

用移液管吸取油样0.35 mL 置于50 mL 圆底烧瓶中，加入6 mL 氢氧化钠甲醇溶液（0.5 mol/L），然后将冷凝管固定于烧瓶上，水浴锅加热到60 ℃左右时，将烧瓶置于水浴中，加热回流约30 min，直至油滴消失。用移液管从冷凝管顶部加入6 mL 三氟化硼甲醇溶液于沸腾溶液内，继续煮沸2 min，经冷凝管顶部加入4 mL 正己烷，继续煮沸1 min，停止加热，冷却至室温后取下冷凝管，加入少量饱和氯化钠溶液并轻摇烧瓶数次，继续加入氯化钠溶液至烧瓶顶部，静置分层后吸取上层溶液于小试管中，经无水硫酸钠去除痕量水。

1.3 色谱条件

柱温为200 ℃；进样口温度为250 ℃；FID 温度为270 ℃；载气流速为30 mL/min；氢气流速为30 mL/min；空气流速为300 mL/min；进样量为1 μL。

1.4 定性及定量分析

按照上述方法和条件测定样品，以保留时间定性，面积归一法定量。

2 结果与讨论

2.1 衍生化技术

衍生化技术是通过化学反应将样品中难于分离检测的目标化合物定量转化成另一种易于分析检测的化合物，通过后者的分析检测可以对目标化合物进行定性和定量分析。柱前衍生化在色谱分离之前进行衍生化反应，可扩大色谱分析的应用范围，是色谱分析中样品处理的一个重要方法。

有机酸由于极性较强，易产生严重的拖尾现象，而且大多数有机酸挥发性差，热稳定性也较低。因此，植物油中的脂肪酸在进行气相色谱分析之前都要衍生为相应的酯，常用的衍生化方法有三氟化硼法、三甲基氢氧化硫法、酯交换法。本文使用三氟化硼作催化剂通入甲醇中配制酯化剂，然后再进行酯化反应，该反应能迅速、定量地进行，反应重复性好，反应条件不苛刻，容易操作；衍生化反应产物只有相应的甲酯，无反应的副产物，过量的衍生化试剂不干扰目标化合物的分离与检测。

2.2 各种脂肪酸甲酯的保留时间（见表1）

表1 脂肪酸甲酯的保留时间 单位：min

2.3 精密度

甲酯制备过程、色谱柱的选择、色谱条件及气相色谱仪对重复性值有重要影响。使用本方法对某品牌米糠油中的脂肪酸含量进行测定，平行测定5 次，取平均值，分别计算平行测定的相对标准偏差，分析结果见表2。

表2 精密度实验（n=5）

2.4 实际样品分析

使用本方法对某公司生产的花生油、芝麻油、米糠油、菜籽油中的脂肪酸含量进行了测定，实验结果见表3。

表3 实际样品分析结果

不同种类植物油中的脂肪酸组成及特征脂肪酸含量各不相同，如花生油中特征脂肪酸是山嵛酸、花生酸，菜籽油中特征脂肪酸是芥酸，其含量均高于其它油种相应组分。因此，将得到的不同油种中脂肪酸的组成及特征脂肪酸含量与产品标准中规定的含量进行对比即可鉴别是否掺伪及掺入的油种。

3 结语

使用本方法测定植物油中的脂肪酸，衍生化反应速度较快，酯化效率高，方法简便、准确，适合分析大批量样品，可被广泛应用于植物油质量检验监督工作中。