儿童手足口病流行特征及肠道病毒核酸检测分析

[摘" "要]" "目的：分析儿童手足口病（hand，foot and mouth disease，HFDM）流行特征及肠道病毒感染情况。方法：手足口病患儿600例，在服用抗病毒药物前无菌采集咽、肛拭子标本。采用实时荧光定量PCR法（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）进行肠道病毒核酸检测，并进行分型鉴定。结果：600例手足口病患儿标本中417例肠道病毒核酸呈阳性，阳性检出率为69.50%。阳性病例中男童262例（62.83%），女童155例（37.17%），男童占比高于女童（Plt;0.05）。柯萨奇病毒A16（Coxsackie virusA16，CVA16）阳性306例，阳性率51.00%，CVA6阳性96例，阳性率16.00%，CVA10阳性8例，阳性率1.33%，其他肠道病毒7例，阳性率1.17%。不同血清型肠道病毒阳性率比较，差异均有统计学意义（Plt;0.05）。417例肠道病毒核酸阳性病例中1～2岁患儿72例（17.27%），～3岁91例（21.82%），～4岁107例（25.66%），～5岁89例（21.34%），～6岁58例（13.91%），不同年龄段患儿发病率的差异有统计学意义（Plt;0.05），其中3～4岁发病率最高。600例患儿中咽拭子检出382例（63.70%）病毒核酸阳性，肛拭子检测出415例（69.17%），肛拭子检测阳性率高于咽拭子（Plt;0.05）。结论：多种肠道病毒可以引起儿童手足口病，其中以CVA16型最多见，3～4岁患儿是手足口病的防控重点。

[关键词]" "肠道病毒核酸检测；流行特征；手足口病；儿童

[中图分类号]" "R725.1 [文献标志码]" "B [DOI]" "10.19767/j.cnki.32-1412.2024.05.029

手足口病（hand，foot and mouth disease，HFDM）是常见的儿童传染病，流行十分广泛，主要由肠道病毒引起，同一患儿可能因感染不同类型肠道病毒而在一年内多次发病[1]。该病发生率通常在春夏季节达到高峰，主要感染婴幼儿和幼儿园儿童[2-3]。患儿常出现发热、咽痛、口腔溃疡、手掌脚底皮疹等症状，多数患儿为轻症，1～2周痊愈，但少数重症和危重症患儿可并发心肌炎、脑膜炎、肺水肿等，具有较高的致残率和致死率。手足口病传统诊断依赖临床症状和体征，但易与其他病毒感染混淆，造成漏诊、误诊[4]。为了解本区域儿童手足口病流行特征及肠道病毒感染情况，本研究于2023年1月—12月对手足口病哨点监测医院收治的手足口病患儿进行肠道病毒核酸检测，分析流行特征。

1" "资料与方法

1.1" "一般资料" "随机选取盐城市亭湖、盐都、大丰等九个县市区手足口病哨点监测医院收治的手足口病患儿600例，其中男性426例，女性174例，年龄1～6岁，平均（4.01±0.33）岁，均符合《手足口病诊疗指南（2018年版）》相关诊断标准。

1.2" "研究方法

1.2.1" "标本采集：发病3天内、使用抗病毒药物前，无菌采集患儿咽、肛拭子标本，置入含有3～5 mL保存液的采样管中，紧密封闭，冷藏条件下4小时内送至实验室检测[5-6]。

1.2.2" "实时荧光定量PCR法（quantitative real-time PCR，RT-PCR）检测病毒核酸：提取患儿咽、肛拭子核酸作为模板，采用ABI系列Q5实时荧光定量PCR检测仪器进行扩增。采用广州中山达安基因试剂公司RT-PCR试剂盒（探针法）进行肠道病毒通用型、肠道病毒71型（Enterovirus 71，EV71）、柯萨奇病毒A16（Coxsackievirus A16，CVA16）、CVA6、CVA10分型鉴定。

1.3" "统计学处理" "应用SPSS 16.0统计学软件处理分析数据。计量资料以±s表示，组间比较采用t检验；计数资料以频数或百分率表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2" "结" " " 果

2.1" "手足口病病例核酸检测及病原谱构成分析" "经实时荧光定量PCR检测，600例手足口病患儿标本中有417例肠道病毒核酸（咽拭子或者肛拭子）呈阳性，阳性检出率为69.50%，阳性病例中男童262例（62.83%），女童155例（37.17%），男童占比高于女童，差异有统计学意义（χ2=54.911，Plt;0.05）。其中CVA16阳性306例（男童188例，女童118例），阳性率51.00%。CVA6阳性96例（男童64例，女童32例），阳性率16.00%。CVA10阳性8例（男童3例，女童5例），阳性率1.33%。其他肠道病毒7例（男童6例，女童1例），阳性率1.17%。不同血清型肠道病毒阳性率比较，差异均有统计学意义（χ2=6.907，Plt;0.05），四种血清型肠道病毒阳性病例中男女构成比比较，差异均无统计学意义（χ2=4.604，P＞0.05）。见图1。

2.2" "手足口病时间及年龄段分布" "手足口病呈现典型的季节性双峰型分布，从3月开始增多，4～7月出现最高峰（春夏高峰），7月逐渐降低，9～11月出现小幅反弹，出现次高峰（秋冬高峰），见图2。417例肠道病毒核酸阳性病例中1～2岁患儿72例（17.27%），～3岁91例（21.82%），～4岁107例（25.66%），～5岁89例（21.34%），～6岁58例（13.91%），不同年龄段发病率比较，差异有统计学意义（χ2=21.301，Plt;0.05），其中3～4岁发病率最高。见图3。

2.3" "咽、肛拭子肠道病毒核酸检测阳性率比较" "手足口病600例中，咽拭子检出382例病毒核酸阳性，阳性率63.70%，肛拭子检出415例病毒核酸阳性，阳性率69.17%，肛拭子检测阳性率高于咽拭子，差异有统计学意义（χ2=4.069，Plt;0.05）。咽拭子阳性病例在年龄构成上差异有统计学意义（χ2=17.177，Plt;0.05），肛拭子阳性病例在年龄构成上差异有统计学意义（χ2=19.547，Plt;0.05）。见表1。

3" "讨" " " 论

肠道病毒相关的手足口病的临床症状和体征分为五个阶段：皮疹和发热阶段、神经系统障碍阶段、心肺衰竭早期阶段、心肺衰竭全面阶段和恢复阶段[7]。大多数病例通常仅表现为轻微症状或发热，并在一周内恢复[7-8]。然而，少部分患者会发展为重症病例，有神经系统受累、呼吸及循环功能障碍等表现，甚至导致死亡[7-9]。

目前诊断手足口病主要基于临床症状和体征，并结合实验室检测。病毒培养需要数日才能得到结果，无法满足临床诊断需求。肠道病毒核酸检测具有高度特异性和敏感性，能迅速确定患者是否感染肠道病毒，同时有助于分型鉴定，了解流行的肠道病毒类型[10-11]。

本研究结果显示，600例手足口病患儿标本共检出4种血清型肠道病毒，分别为CVA16、CVA6、CVA10和其他肠道病毒，与近年北京丰台[12]、江苏徐州[13]，陕西西安[14]等地区基本一致。本研究结果显示，CVA16为绝对优势基因型，阳性占比51.00%，其次为CVA6型，阳性占比16.00%。不同血清型肠道病毒可能引起不同严重程度的症状，分型鉴定有助于评估病情，指导治疗和隔离措施的制定。阳性病例中男童占比高于女童（Plt;0.05），说明男童更易感染肠道病毒引起手足口病[15]。肠道病毒阳性病例中～4岁患儿占比最高，～3岁、～4岁次之，最低为～2岁、～6岁，可能因为～4岁患儿最活跃，不注重个人卫生，防护意识差，1～2岁患儿由家长照顾，相对卫生习惯良好，尚有母传抗体保护，～6岁患儿抵抗力较强，除个人卫生意识较强外，还可能通过隐性感染而获得抗体[16]。本研究还发现，咽拭子阳性检出率低于肛拭子（Plt;0.05），提示结合两种方式开展肠道病毒检查可提升诊断准确率和降低漏检率。

[参考文献]

[1] 郑嘉颖，吴艳芝. 郑州市0～6岁儿童手足口病流行现状及其影响因素［J］. 中国卫生工程学，2022，21（2）：258-260.

[2] HU X，ZHANG W，YUAN T，et al. Evolving pathogen trends and spatial-temporal dynamics of hand，foot，and mouth disease in Fengxian District，Shanghai（2009-2022）［J］. Sci Rep，2024，14（1）：20398.

[3] LI K，CHEN S，LI Z，et al. Epidemiological characterization of hand，foot，and mouth disease among hospitalized children from 2014 to 2023 in a hospital in Henan Province： longitudinal surveillance study［J］. J Med Virol，2024，96（9）：e29916.

[4] 戴雨珂，陈果，周良君，等. 2016—2021年绵阳市手足口病流行特征与病原学检测分析［J］. 医学动物防制，2023，39（7）：648-652.

[5] 钱晓萍，凌健，刘腾. 吴兴区6岁以下儿童手足口病流行特征分析［J］. 预防医学，2023，35（3）：243-245，249.

[6] 何斌，孙亚敏，邱传营. 2009—2019年北京市海淀区学龄前儿童手足口病流行病学及病原学特征分析［J］. 中国国境卫生检疫杂志，2022，45（2）：151-154.

[7] LI X W，NI X，QIAN S Y，et al. Chinese guidelines for the diagnosis and treatment of hand，foot and mouth disease（2018 edition）［J］. World J Pediatr，2018，14（5）：437-447.

[8] MILLER G，TINDALL J. Hand-foot-and-mouth disease［J］. JAMA，1968，203（10）：827-830.

[9] 赵晓莉，李慧，宋宇，等. 儿童EV71型手足口病血清内皮素-1和炎性因子水平及其与重型发病的关系［J］. 中华医院感染学杂志，2023，33（6）：929-932.

[10] ZHANG S Y，WANG J，YAN Q，et al. A one-step，triplex，real-time RT-PCR assay for the simultaneous detection of enterovirus 71，Coxsackie A16 and pan-enterovirus in a single tube［J］. PLoS One，2014，9（7）：e102724.

[11] WANG M，REN Q，ZHANG Z J，et al. Rapid detection of hand，foot and mouth disease enterovirus genotypes by multiplex PCR［J］. J Virol Methods，2018，258：7-12.

[12] 曹佳琪，邢洪光，张志敏，等. 2019-2021年北京市丰台区手足口病及疱疹性咽峡炎病原学监测结果分析［J］. 寄生虫病与感染性疾病杂志，2023，21（2）：95-99，103.

[13] 张文婷，杜阳光，高雪，等. 2021年江苏省徐州市手足口病和疱疹性咽峡炎病例肠道病毒病原谱分析［J］. 疾病监测杂志，2024，39（7）：863-868.

[14] 薛泽润，陈海龙，杜全丽，等. 西安市2022年手足口病的病原构成与EV-A71抗体调查［J］. 公共卫生与预防医学杂志，2024，35（5）：134-137.

[15] MOHAMMAD F M，NAZIRUL H，IZYAN A M，et al. Biological and ecological determinants of hand foot and mouth disease （HFMD） in coastal district of Northeastern Peninsular Malaysia： A 5-Year retrospective study［J］. J Public Hlth Dev，2024，22（3）：256-271.

[16] GUI J，LIU Z，ZHANG T，et al. Epidemiological characte-ristics and spatial-temporal clusters of hand，foot，and mouth disease in Zhejiang Province，China，2008-2012［J］. PLoS One，2015，10（9）：e0139109.

[收稿日期] 2024-09-21

（本文编辑" "赵喜）