气相色谱-三重四极杆质谱法测定水果中9 种氨基甲酸酯农药残留量

◎ 赵艺羽

（佛山市南海区里水镇农林服务中心，广东 佛山 528244）

氨基甲酸酯类农药是一类新型合成的有机农药，因具有高效杀虫、作用迅速、残毒性低于有机磷农药等优点，被广泛应用于农业生产[1]。然而，在中华人民共和国农业农村部发布的禁限用农药名录中，克百威、灭多威、涕灭威等氨基甲酸酯类农药，被列为在蔬果种植过程中禁止使用的农药品种。因此，对此类氨基甲酸酯农药检测方法的开发优化有迫切的现实需求。在农药残留分析中，为应用GC、GC-MS 进行多组分同时检测，已成为研究和应用的热点[2]。目前，测定氨基甲酸酯类农药的方法中，NY/T 761—2008 第三部分液相色谱法涉及提取、固相萃取小柱纯化、浓缩等步骤，不仅需要使用二氯甲烷等中高毒性溶剂，还需配备柱后衍生反应装置，对实验员身体健康及环境均不友好；液相色谱-质谱联用法中仪器试剂要求高，测定成本较高。GB 23200.113—2018 仅有克百威、3-羟基克百威有参数说明，涕灭威、灭多威等限用农药暂无气质质方法。因此，本文结合2 个标准，使用QuEChERS 法前处理，用三重四极杆气相色谱质谱仪测定水果中克百威、3-羟基克百威、涕灭威及其代谢物、异丙威、仲丁威、甲萘威、灭多威等农药残留量的气相色谱-质谱方法，并在多个基质中进行方法验证，以探索QuEChERS 前处理法应用在测定水果中氨基甲酸酯类农药残留量的可能性。

1 材料与方法

1.1 仪器设备

GCMS-TQ8040 三重四极杆气相色谱质谱联用仪（日本岛津公司）、电子分析天平（赛多利斯BS2202S，分度值0.01 g）、高速冷冻离心机（Sigma-Aldrich）、氮吹仪（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）、有机相尼龙针式滤膜（安谱，0.22 μm），DB-5MS 色谱柱（美国安捷伦公司）。

1.2 标准物质与试剂

3-羟基克百威、克百威、涕灭威、涕灭威亚砜、涕灭威砜、异丙威、灭多威、甲萘威、仲丁威（浓度均为100 μg·mL-1，溶于甲醇或丙酮，坛墨质检科技股份有限公司）。

乙腈（色谱纯，德国Merck 公司）、QuEChERS试剂盒系列（美国安捷伦公司，含萃取盐包、净化管）、乙酸乙酯（色谱纯，德国Merck 公司）。

1.3 试验方法

1.3.1 样品前处理

水果样品取样量按相关标准执行，取样缩分后，用食物搅拌机打至匀浆。

称取10.00 g（精确到0.01 g）匀浆后的水果样品于50 mL 离心管，加入10 mL 乙腈，涡旋振荡5 min后加入萃取盐包，剧烈振荡并涡旋混匀5 min，以速度6 000 r·min-1离心5 min；吸取6 mL 上清液加入净化管中，涡旋混匀5 min，速度6 000 r·min-1离心5 min；准确吸取2 mL 上清液于10 mL 离心管中，50 ℃氮吹至近干。用乙酸乙酯定容至1 mL，过0.22 μm尼龙针式滤器后上机[3]。

1.3.2 标准溶液配制

农药混合标准储备液（5 μg·L-1）：以移液管吸取3-羟基克百威、克百威、灭多威、甲萘威、异丙威、仲丁威、涕灭威、涕灭威亚砜、涕灭威砜各0.5 mL 于10.00 mL 容量瓶，用乙酸乙酯定容至刻度线，混匀，转移至棕色试剂瓶内，置于-30 ℃冰箱保存，有效期2～3 周。

农药混合标准系列工作液：精确吸取一定量的混合标准溶液，逐级用空白基质乙酸乙酯溶液稀释成质量浓度为0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5 mg·L-1的标准工作溶液。

1.3.3 仪器条件

色谱柱：安捷伦DB-5 ms，30 m×0.25 mm×0.25 μm；进样口温度：250 ℃；传输线温度：250 ℃；离子源温度：200 ℃；离子源类型：ESI；进样量：1 μL；检测方式：多反应检测（MRM）；溶剂延迟：1.50 min；载气：氦气，纯度≥99.999 %，流速为1.69 mL·min-1；升温程序：50 ℃保持1 min，然后以25 ℃·min-1升到125 ℃，再以10 ℃·min-1升到300 ℃，保持8 min。监测离子对及碰撞电压参数见表1。

表1 9 种氨基甲酸酯农药监测离子对及碰撞电压表

2 结果与分析

2.1 结果计算

试样中被测农药残留量以质量分数计，单位以mg·kg-1表示，按公式（1）计算。

式中：AS为基质标准工作液中被测农药的色谱峰面积；A为试样溶液中被测农药的色谱峰面积；V1为提取溶剂体积，mL；V2为分取溶液体积，mL；V3为样品溶液定容体积，mL；m为试样的质量，g；ρ为标准溶液中农药的质量浓度，μg·L-1。计算结果保留3 位有效数字。

2.2 线性范围与检出限

将克百威、3-羟基克百威、灭多威、甲萘威、异丙威、仲丁威、涕灭威、涕灭威亚砜、涕灭威砜标准品用空白基质配置成浓度分别为0.0 1、0.0 2、0.0 5、0.1、0.2、0.3 m g·L-1的工作溶液。以标准工作溶液各个组分的浓度（μ g·mL-1）为横坐标，以农药标准溶液中被测农药定量离子对峰面积为纵坐标，绘制校准曲线，见表2。

表2 9 种氨基甲酸酯线性关系与检出限表

表3 添加水平为0.02 mg·kg-1 时，各组分结果、回收率及样品间变异系数表

根据GB/T 27417—2017 的要求，以可接受信噪比为3∶1 时确定检出限，评估LOD，以3 倍LOD 作为仪器的LOQ，计算各项目的最低检出限和定量限如下：

式中：m为试样质量，g；V1为提取溶剂体积，mL；V2为分取溶液体积，mL；V3为样品溶液定容体积，mL。

2.3 方法的准确度和精密度

在本方法中，用回收率表示准确度，以此评价测得值与真值的符合程度，取12 个各10 g 的阴性雪梨样品，参照NY/T 761—2008 第3 部分和GB 23200.113—2018 各组分检出限，分别添加混合标准溶液至0.02、0.10 mg·kg-1（涕灭威亚砜为0.04、0.10 mg·kg-1）2 个水平浓度，在自由度=5 的基础上，进行平行测定，以实验室内变异系数（CV）评价精密度[4]。样品按前文处理步骤，将试样溶液和基质标准工作液依次注入气相色谱-质谱联用仪中[5]，计算各检测项目的平均值、平均回收率、样品间变异系数（CV），计算结果见表 3、表4。

表4 添加水平为0.10 mg·kg-1 时，各组分结果、回收率及样品间变异系数表

结果表明，3-羟基克百威、灭多威、甲萘威、异丙威、仲丁威、涕灭威、涕灭威亚砜、涕灭威砜的回收率为93.10%～118.00%；每水平6 个平行实验室内变异系数（CV）为2.07～9.41，回收率和变异系数均满足农业部2386 号公告及GB/T 27404—2008 相关要求。

3 结语

本方法使用QuEChERS 法前处理，配合特定气相色谱质谱仪参数设定，对克百威、3-羟基克百威、涕灭威、涕灭威亚砜、涕灭威砜、灭多威、甲萘威、异丙威、仲丁威等农药残留量进行了测试。实验中，测试了百香果、葡萄、西瓜、火龙果、雪梨、苹果等多个水果基质，其曲线相关系数、精密度、准确度均满足GB/T 27404—2008 的要求，检出限基本满足GB 2763 中判定限的要求。然而，以该方法处理部分芸薹属蔬菜，如小白菜、上海青、菜心时，阴性样品在涕灭威亚砜采集时间段内出现明显特征峰，容易误判。对此，韩阳阳等选择使用Carb/NH2固相萃取柱的方法处理后，特征峰明显变小。由此可见，测定此类蔬菜时，应注意选取合适的前处理方法，一旦出现可疑数据，应采取其他检测仪器进行核实。