刺五加注射液对急性心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌保护作用的研究*

2023-12-25冯玲玲陈树杰车炜

天津中医药 2023年12期

冯玲玲，陈树杰，车炜

（邯郸市中心医院老年病二科，邯郸 056001）

心力衰竭（HF）是ST 抬高型急性心肌梗死（AMI）患者最常见并发症。据统计，AMI 后1 年内HF 发病率超过45%，而AMI 后HF（HF-AMI）患者5 年生存率不足40%，HF-AMI 是影响AMI 患者中远期预后的重要因素[1-2]。HF-AMI 病理机制复杂，其中氧化应激和心肌组织纤维化在HF-AMI 发生发展过程中扮演着重要角色，由核因子E2 相关因子2（Nrf2）及其下游蛋白血红素加氧酶1（HO-1）组成的信号通路对氧化应激具有重要调控作用。有文献报道通过干预Nrf2/HO-1 信号通路可有效减轻 HF-AMI大鼠心肌组织氧化应激和纤维化，改善心功能[3]。

刺五加（又名五加参）为《中国药典（一部）》收录中药品种，以五加科植物刺五加的干燥根和根茎入药，性温、味辛，归脾、肾、心经，具有益气健脾、补肾安神等功效。刺五加注射液（CWJI）是以刺五加水醇提取物为有效成分制成的中成药，目前主要用于缺血性脑病以及冠心病、心绞痛的治疗。有研究报道CWJI 可通过激活Nrf2/HO-1 信号通路减轻氧化应激对大鼠肾缺血再灌注损伤起到保护作用[4]，并且CWJI 对化疗药物等所致大鼠心肌损伤具有保护作用[5-6]，但CWJI 对HF-AMI 大鼠的影响及相关机制尚未见文献报道。本研究通过复制HF-AMI 大鼠模型，探讨CWJI 对HF-AMI 大鼠心肌组织的影响及相关机制，以期为HF-AMI 临床治疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验动物清洁级Wistar 大鼠（雄性、7 周龄、210～240 g）105 只购自北京科宇动物养殖中心[许可证号：SCXK（京）2018-0010]。在（23±1）℃、相对湿度（55±10）%、光照12 h 黑暗12 h 的控制环境中饲养，进食饮水不限。本实验获得医院伦理委员会批准。实验动物相关操作遵循减少、替代、优化原则。

1.2 药物与试剂 CWJI（黑龙江乌苏里江制药有限公司，国药准字Z23023215，批号21A0917005）；卡托普利注射液（CPT，常州制药厂有限公司，国药准字H10970293，批号220113）；心肌肌钙蛋白T（cTnT）、血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）酶联免疫吸附法（ELISA）试剂盒和苏木精-伊红（HE）、原位末端转移酶标记（TUNEL）、马松（Masson）染色试剂盒（北京索莱宝生物科技公司，货号SEKR-0047、SEKR-0049、G1120、T2190、G1340）；醛固酮（ALD）ELISA法试剂盒（泉州市睿信生物科技有限公司，货号RXJ302392R）；总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）检测试剂盒和RIPA 裂解液、2，2’-联喹啉-4，4’-二甲酸二钠（BCA）法蛋白定量试剂盒（上海碧云天生物科技有限公司，货号S0109、S0056、S0131S、W063-1-1、A045-4-1）；活性氧（ROS）检测试剂盒、TRIzol 总RNA 提取试剂、一步法RT-PCR 试剂盒（南京建成生物工程研究所，货号E004-1-1、N065、N116）；Nrf2、HO-1、β-肌动蛋白（β-actin）抗体和免疫球蛋白G 抗体（IgG 二抗）、增强化学发光液（ECL）（北京博奥森生物技术公司，货号bs-1074R、bs-2075R、bs-0061R、bs-0295G、C05-07004）。

1.3 主要仪器小动物呼吸机（DW-3000 型，安徽正华生物仪器公司）；多普勒超声仪（770TM-120型，加拿大Visual Sonics 公司）；生理信号采集系统（MP150 型，美国BSI 公司）；酶标仪（DTX880 型，美国贝克曼公司）；紫外-可见分光光度计（ND2000C型，美国Thermo 公司）；930F 型荧光分光光度计（上海仪电分析仪器有限公司）；石蜡切片机（RM2016型，上海徕卡仪器公司）；超薄切片机（EMUC7 型，德国Leica 公司）；透射电子显微镜（HT7700 型，日本日立公司）；蛋白电泳转膜系统（PowerPac 型，美国Bio-Rad 公司）；QuantStudio 5 型PCR 仪（美国ABI公司）。

1.4 实验方法

1.4.1 HF-AMI 大鼠模型制备与给药适应性饲养1 周后，随机取105 只大鼠中的16 只作为假手术（Sham）组，剩余89 只通过结扎左冠状动脉前降支复制HF-AMI 大鼠模型，结扎后心尖部位颜色变苍白、心电图ST 段明显抬高或T 波高耸则说明心肌梗死制备成功，2 周后通过多普勒超声检测左室射血分数（LVEF），LVEF ＜50%即可判定HF-AMI 大鼠模型制备成功[7]。共造模成功82 只，随机取80 只HF-AMI 成模大鼠随机分为模型（Model）组、CPT 组和CWJI 低（CWJI-L）、中（CWJI-M）、高剂量（CWJIH）组，每组16 只。Sham 组大鼠除了不结扎左冠状动脉前降支外，其余操作同Model 组。CPT 组腹腔注射给药10 mg/kg[8]，CWJI-L、CWJI-M、CWJI-H 组分别腹腔注射给药15、30、60 mg/kg（参照人临床应用剂量，根据人与大鼠剂量换算公式计算所得，分别相当于人临床剂量的1/2、1、2 倍），Sham 组和Model组分别腹腔注射给予生理盐水，给药频次均为1 次/日，疗程4 周。

1.4.2 大鼠心功能指标检测治疗完成后，随机取每组8 只大鼠，腹腔注射水合氯醛溶液（0．35 mg/kg）进行麻醉后，通过多普勒超声仪，取左室短轴解剖位M 模式图像，检测大鼠心功能指标[LVEF 和左室短轴缩短率（LVFS）]；通过生理信号采集系统检测心功能指标[左室内压最大上升速率和最大下降速率（+dp/dtmax、-dp/dtmax）]。

1.4.3 ELISA 法检测血清 cTnI、AngⅡ、ALD 水平经腹主动脉采血 5 mL 并离心（1 500 r/min，离心半径10 cm，5 min）取血清，遵照试剂盒操作说明，采用ELISA 法检测血清 cTnI、Ang Ⅱ、ALD 水平。

1.4.4 计算左室心肌肥厚指数（LVHI）称量大鼠体质量（M1），开胸取心脏，剪取左心室心肌用生理盐水冲洗干净后称质量（M2），LVHI（%）=（M2/M1）×100%。

1.4.5 HE、TUNEL、Masson 染色法观察心肌组织病理学改变、细胞凋亡和组织纤维化状况取左心室缺血区心肌组织，经4%多聚甲醛溶液固定、石蜡包埋、切片、展片、烤片等处理后，按照各试剂盒操作说明：1）行HE 染色后显微镜下观察心肌组织病理学改变。2）行TUNEL 染色后观察心肌细胞凋亡状况（细胞核黄褐色为阳性着色），400 倍光学显微镜下取每张切片5 个互不重叠的视野，计数视野内凋亡细胞数和细胞总数，凋亡指数（AI）=（凋亡细胞数/细胞总数）×100%。3）行Masson 染色后观察心肌组织纤维化状况（蓝色为胶原着色），400 倍光学显微镜下拍取5 个互不重叠的视野，通过Image J 软件分析视野内蓝色胶原纤维面积和视野总面积，胶原容积分数（CVF）=（蓝色胶原纤维面积/视野总面积）×100%。

1.4.6 透射电子显微镜观察心肌细胞线粒体超微结构变化取每组剩余的8 只大鼠，颈椎脱臼处死后开胸取心脏，剪取少量左心室心肌修饰成1 mm3小块后行2．5%戊二醛3 h 和1%锇酸1 h 双固定，脱水和丙酮置换后环氧树脂包埋，50 nm 超薄切片后行醋酸双氧铀和柠檬酸铅双染色，通过透射电子显微镜观察心肌细胞线粒体超微结构。

1.4.7 分光光度法检测心肌组织T-SOD、GSH-Px 活性和MDA、ROS 含量取部分左心室缺血区心肌组织加入适量4 ℃生理盐水研磨匀浆，离心（3 500 r/min，离心半径10 cm，5 min）取上清液，遵照试剂盒操作说明，通过紫外-可见分光光度计检测心肌组织TSOD 活性（检测波长560 nm）、GSH-Px 活性（检测波长340 nm）、MDA 含量（检测波长535 nm）；通过荧光分光光度计检测心肌组织ROS 含量（激发波长502 nm，发射波长530 nm）。

1.4.8 RT-PCR 法检测心肌组织Nrf2、HO-1 mRNA表达取适量左心室缺血区心肌组织，TRIzol 法提取总RNA，按试剂盒说明将RNA 逆转录成cDNA后行PCR 扩增，引物序列：Nrf2 上游引物5’-TGACAATGAGGTTTCTTCGGCTACG-3’，下游引物5’-TGCCCCTGAGATGGTGACAA-3’，扩增长度 112 bp；HO-1 上游引物5’-GGCCTCCCTGTACCACATCT-3’，下游引物5’-CTGCA TGGCTGGTGTGTAGG-3’，扩增长度 173 bp；β-actin 上游引物5’-CTGTGTTG TCCCTGTATGCC TCTG’，下游引物5’- GGAACCG CTCATTGCCGATAGTG-3’，扩增长度 116 bp。扩增程序：95 ℃5 min；95 ℃30 s、60 ℃30 s，重复40 个循环。以β-actin 为内参，运用公式2-ΔΔCt计算Nrf2、HO-1 mRNA 相对表达量。

1.4.9 Western Blot 法检测心肌组织Nrf2、HO-1 蛋白表达取100 mg 左心室缺血区心肌组织加入1 mL RIPA 裂解液提取总蛋白，BCA 法进行蛋白定量后，30 μg 总蛋白量上样、凝胶电泳分离蛋白、转PVDF膜、5%蛋白封闭液室温封闭2 h 后，加目标蛋白一抗稀释液Nrf2（1∶1 000）、HO-1（1∶1 000）和内参蛋白稀释液β-actin（1∶2 000）4 ℃孵育过夜，洗膜后加二抗稀释液IgG（1∶2 000）室温孵育1 h，洗膜后加ECL 显影，通过蛋白条带灰度值半定量目标蛋白相对表达量。

1.5 统计学处理采用SPSS 20．0 软件行统计分析。计量资料符合正态分布以均数±标准差（）表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间多重比较采用LSD-t 检验，P＜0．05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠心功能指标比较与Sham 组比较，Model 组大鼠LVEF、LVFS、+dp/dtmax、-dp/dtmax 显著降低（P＜0．05）。与Model 组比较，CPT 组和CWJIL、CWJI-M、CWJI-H 组LVEF、LVFS、+dp/dtmax、-dp/dtmax（CWJI-L 组除外）显著升高（P＜0．05），CWJI各剂量组间上述效应呈剂量依赖性（P＜0．05）。与CPT 组比较，CWJI-H 组LVEF、+dp/dtmax、-dp/dtmax 显著升高（P＜0．05），两组间LVFS 差异无统计学意义（P＞0．05）。见表1。

表1 各组大鼠心功能指标比较（±s）Tab.1 Comparison of cardiac function indexes of rats in each group（±s）

注：与Sham 组比较，*P＜0．05；与Model 组比较，#P＜0．05；与CPT 组比较，△P＜0．05；与CWJI-L 组比较，▲P＜0．05；与CWJI-M 组比较，&P＜0．05。

组别动物数LVEF（%）LVFS（%）+dp/dtmax（mmHg/s）-dp/dtmax（mmHg/s）Sham 组879．84±8．1353．09±5．262 399．04±243．181 871．92±230．71 Model 组836．02±3．97*25．48±2．33*1 193．57±160．31*1 145．07±148．26*CPT 组862．14±6．50#5．24#41．36±4．20#1 834．71±212．28#1 424．35±187．31#CWJI-L 组848．66±30．14±3．17#1 442．89±191．76#1 274．30±155．62 CWJI-M 组859．31±6．40#▲37．96±3．68#▲1 800．64±206．05#▲1 438．75±170．19#▲CWJI-H 组870．78±7．53#△▲&45．07±4．41#▲&2 095．32±227．28#△▲&1 659．11±193．27#△▲&

2.2 各组大鼠血清 cTnI、Ang Ⅱ、ALD 水平比较与Sham 组比较，Model 组大鼠血清 cTnI、Ang Ⅱ、ALD水平显著升高（P＜0．05）。与Model 组比较，CPT 组和CWJI-L、CWJI-M、CWJI-H 组血清 cTnI、Ang Ⅱ、ALD 水平显著降低（P＜0．05），CWJI 各剂量组间上述效应呈剂量依赖性（P＜0．05）。与CPT 组比较，CWJIH 组cTnI、Ang Ⅱ、ALD 水平显著降低（P＜0．05）。见表2。

表2 各组大鼠血清cTnI、Ang Ⅱ、ALD 水平比较（±s）Tab.2 Comparison of the level of cTnI，Ang Ⅱ，ALD in serum of rats in each group（±s）

注：与Sham 组比较，*P＜0．05；与Model 组比较，#P＜0．05；与CPT组比较，△P＜0．05；与CWJI-L 组比较，▲P＜0．05；与CWJI-M 组比较，&P＜0．05。

?组别动物数 cTnI（pg/L） Ang Ⅱ（pg/mL）ALD（pg/mL）Sham 组824．75±2．9185．17± 9．03469．20± 52．47 Model 组873．00±8．26*162．49±18．50*991．57±104．33*CPT 组839．84±4．50#114．08±11．92#658．13± 72．54#CWJI-L 组863．29±7．12#135．74±16．24#853．09± 92．17#CWJI-M 组846．30±4．97#▲ 112．61±12．38#▲ 672．48± 75．40#▲CWJI-H 组831．26±3．38#△▲& 96．27±10．85#△▲& 561．73± 61．28#△▲&

2.3 各组大鼠LVHI 比较与Sham 组比较，Model组大鼠LVHI 显著升高（P＜0．05）。与Model 组比较，CPT 组和CWJI-L、CWJI-M、CWJI-H 组LVHI 显著降低（P＜0．05），CWJI 各剂量组间上述效应呈剂量依赖性（P＜0．05）。与CPT 组比较，CWJI-H 组LVHI 显著降低（P＜0．05）。见表3。

表3 各组大鼠LVHI、AI 及CVF 比较（±s）Tab.3 Comparison of LVHI，AI，CVF of rats in each group（±s）

注：与Sham 组比较，*P＜0．05；与Model 组比较，#P＜0．05；与CPT组比较，△P＜0．05；与CWJI-L 组比较，▲P＜0．05；与CWJI-M 组比较，&P＜0．05。

2.4 各组大鼠心肌组织病理学改变比较 Sham 组大鼠心肌组织形态和细胞结构均未见异常。Model组心肌组织可见明显的病理学改变，如心肌纤维断裂，细胞排列紊乱、空泡变性、坏死、消失，结缔组织增生，间质区水肿、巨噬细胞及中性粒细胞浸润等炎性细胞浸润。与Model 组比较，CPT 组和CWJI-L、CWJI-M、CWJI-H 组心肌组织病理学改变均明显改善，CWJI 各剂量组改善效果呈剂量依赖性，且CWJI-H 组效果优于CPT 组。见图1。

图1 各组大鼠心肌组织病理学改变比较（HE 染色，×400）Fig.1 Comparison of myocardial histopathological changes of rats in each group(HE staining，×400)

2.5 各组大鼠心肌细胞凋亡状况及AI 比较 Sham组心肌组织可见少量散在分布的凋亡细胞。Model组心肌细胞凋亡数量较Sham 组明显增多。与Model组比较，CPT 组和CWJI-L、CWJI-M、CWJI-H 组心肌细胞凋亡数量明显减少，CWJI 各剂量组上述效应呈剂量依赖性，且CWJI-H 组优于CPT 组。与Sham 组比较，Model 组AI 显著升高（P＜0．05）。与Model 组比较，CPT 组和CWJI-L、CWJI-M、CWJI-H组AI 显著降低（P＜0．05），CWJI 各剂量组对AI 的作用呈剂量依赖性（P＜0．05）。与CPT 组比较，CWJI-H组AI 显著降低（P＜0．05）。见图2、表3。

图2 各组大鼠心肌细胞凋亡状况比较（TUNEL 染色，×400）Fig.2 Comparison of cardiomyocyte apoptosis of rats in each group(TUNEL staining，×400)

2.6 各组大鼠心肌组织纤维化状况及CVF 比较 Sham 组心肌组织可见生理状态下极少量丝状的胶原纤维分布。Model 组心肌组织间质区和血管壁周围可见大量条索状胶原纤维沉积，部分融合成片状。与Model 组比较，CPT 组和CWJI-L、CWJIM、CWJI-H 组胶原纤维沉积状况明显减轻，CWJI各剂量组效应呈剂量依赖性，且CWJI-H 组优于CPT 组。与Sham 组比较，Model 组CVF 显著升高（P＜0．05）。与Model 组比较，CPT 组和CWJI-L、CWJI-M、CWJI-H 组CVF 显著降低（P＜0．05），CWJI各剂量组对CVF 的作用呈剂量依赖性（P＜0．05）。与CPT 组比较，CWJI-H 组CVF 显著降低（P＜0．05）。见图3、表3。

图3 各组大鼠心肌组织纤维化状况比较（Masson 染色，×400）Fig.3 Comparison of myocardial fibrosis of rats in each group(Masson staining，×400)

2.7 各组大鼠心肌细胞线粒体超微结构变化比较 Sham 组大鼠左心室心肌细胞线粒体形态结构均未见异常。与Sham 组比较，Model 组可见肌原纤维紊乱，线粒体空泡化、肿胀、破裂，嵴断裂或者减少，可见线粒体自噬体。与Model 组比较，CPT 组和CWJI-L、CWJI-M、CWJI-H 组心肌细胞线粒体上述病变明显改善，CWJI 各剂量组效果呈剂量依赖性，且CWJI-H 组效果优于CPT 组。见图4。

图4 各组大鼠心肌细胞线粒体超微结构变化比较（透射电子显微镜，×20 000）Fig.4 Comparison of mitochondrial ultrastructural changes of cardiomyocyte of rats in each group(Transmission electron microscope，×20 000)

2.8 各组大鼠心肌组织T-SOD、GSH-Px 活性和MDA、ROS 含量比较与Sham 组比较，Model 组大鼠心肌组织T-SOD、GSH-Px 活性显著降低，MDA、ROS 含量显著升高（P＜0．05）。与Model 组比较，CPT组和CWJI-L、CWJI-M、CWJI-H 组T-SOD、GSH-Px活性显著升高，MDA、ROS 含量显著降低（P＜0．05）；CWJI 各剂量组间上述效应呈剂量依赖性（P＜0．05）。与CPT 组比较，CWJI-H 组T-SOD、GSH-Px 活性显著升高，MDA、ROS 含量显著降低（P＜0．05）。见表4。

表4 各组大鼠心肌组织T-SOD、GSH-Px 活性和MDA、ROS 含量比较（±s）Tab.4 Comparison of the activity of T-SOD，GSH-Px and the content of MDA，ROS in myocardial tissue of rats in each group（±s）

注：与Sham 组比较，*P＜0．05；与Model 组比较，#P＜0．05；与CPT 组比较，△P＜0．05；与CWJI-L 组比较，▲P＜0．05；与CWJI-M 组比较，&P＜0．05。

?组别动物数T-SOD（U/mg）GSH-Px（U/mg）MDA（nmol/mg）ROS（μmol/mg）Sham 组849．35±6．4738．16±4．091．27±0．22120．64±11．52 Model 组820．08±2．83*15．37±2．14*4．36±0．60*351．76±43．09*CPT 组835．61±5．40#25．83±3．32#2．31±0．28#243．03±27．46#CWJI-L 组827．50±3．61#19．48±2．27#3．53±0．49#299．58±30．27#CWJI-M 组836．28±5．38#▲27．62±3．51#▲2．47±0．32#▲235．19±25．61#▲CWJI-H 组844．25±6．09#△▲&33．17±4．16#△▲&1．64±0．19#△▲&171．40±18．83#△▲&

2.9 各组大鼠心肌组织Nrf2、HO-1 mRNA 表达比较与Sham 组比较，Model 组大鼠心肌组织Nrf2、HO-1 mRNA 表达量显著降低（P＜0．05）。与Model组比较，CPT 组和CWJI-L、CWJI-M、CWJI-H 组Nrf2、HO-1 表达量显著升高（P＜0．05）；CWJI 各剂量组间上述效应呈剂量依赖性（P＜0．05）。与CPT 组比较，CWJI-H 组Nrf2、HO-1 表达量显著升高（P＜0．05）。见表5。

表5 各组大鼠心肌组织Nrf2、HO-1 mRNA 表达量比较（±s）Tab.5 Comparison of the expression of Nrf2，HO-1 mRNA in myocardial tissue of rats in each group（±s）

注：与Sham 组比较，*P＜0．05；与Model 组比较，#P＜0．05；与CPT组比较，△P＜0．05；与CWJI-L 组比较，▲P＜0．05；与CWJI-M 组比较，&P＜0．05。

?组别动物数Nrf2HO-1 Sham 组82．15±0．191．95±0．18 Model 组80．36±0．04*0．40±0．05*CPT 组81．09±0．11#1．17±0．14#CWJI-L 组80．71±0．08#0．82±0．11#CWJI-M 组81．15±0．13#▲1．30±0．15#▲CWJI-H 组81．68±0．17#△▲&1．72±0．19#△▲&

2.10 各组大鼠心肌组织Nrf2、HO-1 蛋白表达比较与Sham 组比较，Model 组大鼠心肌组织Nrf2、HO-1 蛋白表达量显著降低（P＜0．05）。与Model 组比较，CPT 组和CWJI-L、CWJI-M、CWJI-H 组Nrf2（CWJI-L 组除外）、HO-1 蛋白表达量显著升高（P＜0．05）；CWJI 各剂量组间上述效应呈剂量依赖性（P＜0．05）。与CPT 组比较，CWJI-H 组Nrf2、HO-1 蛋白表达量显著升高（P＜0．05）。见图5、表6。

图5 各组大鼠心肌组织Nrf2、HO-1 蛋白表达比较Fig.5 Comparison of the expression of Nrf2，HO-1 in myocardial tissue of rats in each group

表6 各组大鼠心肌组织Nrf2、HO-1 蛋白表达量比较（±s）Tab.6 Comparison of the expression of Nrf2，HO-1 in myocardial tissue of rats in each group（±s）

注：与Sham 组比较，*P＜0．05；与Model 组比较，#P＜0．05；与CPT组比较，△P＜0．05；与CWJI-L 组比较，▲P＜0．05；与CWJI-M 组比较，&P＜0．05。

3 讨论

CWJI 是由刺五加水醇提取物制成的一种中药注射剂，主要成分包括刺五加苷D、刺五加苷E、异嗪皮啶、咖啡酸、绿原酸等，具有较好的抗氧化、抗凋亡等药理学作用[9-10]。本研究探讨了CWJI 对HFAMI 大鼠心肌组织的影响及相关机制，结果显示，CWJI 可剂量依赖性提高 HF-AMI 大鼠LVEF、LVFS、+dp/dtmax、-dp/dtmax，提示CWJI 具有改善HF-AMI 大鼠心功能的作用，与李影雄等[11]报道相似。HE、TUNEL 染色结果显示，HF-AMI 模型大鼠心肌组织可见心肌纤维断裂，细胞空泡变性、数量减少，结缔组织增生，间质区水肿、炎性细胞浸润等病理学改变，以及大量心肌细胞凋亡，与顾峥等[12]研究结果一致；线粒体是细胞能量代谢的场所，对维持细胞生理状态及新陈代谢具有重要作用，本研究发现HF-AMI 模型大鼠心肌线粒体呈现空泡化、肿胀、破裂，嵴断裂或者减少，自噬体形成等超微结构改变，与Cheng 等[13]研究结果一致。CWJI 可剂量依赖性改善HF-AMI 大鼠心肌组织病理学改变、细胞凋亡和线粒体结构改变，并且CWJI-H 组效果优于CPT 组，提示CWJI 具有减轻 HF-AMI 大鼠心肌组织损伤的作用。

氧化应激和心肌组织纤维化是HF-AMI 发生和进行性加重的重要原因，并且心肌组织纤维化与氧化应激密切相关。AMI 发生后线粒体结构和功能受损导致氧化呼吸链电子传递受阻，致使大量活性氧簇（ROS）生成，过度消耗内源性ROS 还原性清除酶T-SOD、GSH-Px 等，导致ROS 蓄积而引发氧化应激，损伤线粒体脊结构、线粒体膜等，并破坏细胞膜、核酸、结构蛋白等引发细胞凋亡[14-15]。心室重构是HF-AMI 的病理基础，而心肌纤维化是导致心室重构的关键，血清 cTnT 水平能够敏感地反映心肌损伤程度，而Ang Ⅱ、ALD 水平能够反映心肌纤维化及心室重构状况[16]。ROS 可刺激心肌成纤维细胞向肌成纤维细胞分化，分泌大量细胞外基质（ECM）而促进心肌组织纤维化病变[17]。Nrf2 是哺乳动物细胞内广泛存在的一种核转录因子，可诱导T-SOD、GSH-Px等抗氧化酶和下游靶蛋白HO-1 转录表达，HO-1具有催化血红素降解的生理学作用，降解产物中 Fe2+、胆绿素等均具有较好的抗氧化作用，从而提高机体抗氧化能力[18-19]。本研究发现，CWJI可剂量依赖性降低HF-AMI 大鼠血清cTnI、Ang Ⅱ、ALD 水平，改善心肌组织纤维化状况，提高 T-SOD、GSH-Px 活性并降低MDA、ROS 含量，提高 Nrf2、HO-1 mRNA 和蛋白表达量，并且CWJI-H 组效果优于CPT 组，提示CWJI具有抑制HF-AMI 大鼠心肌组织纤维化和氧化应激的作用，激活Nrf2/HO-1 信号通路可能是其重要的作用机制。与纪新博等[20]报道相似。

综上，CWJI 可减轻 HF-AMI 大鼠心肌组织病变、细胞凋亡、组织纤维化和线粒体超微结构病变，改善心功能，其机制可能与激活Nrf2/HO-1 信号通路，抑制氧化应激有关。本研究结果为CWJI 作为HF-AMI 治疗备选药物提供了理论依据，但其作用机制尚需深入研究。

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