眼睑基底细胞癌组织中SIRT1、JAK2表达及其临床意义

郑 博 郅 瑛 杜 蕊

眼睑基底细胞癌发病速度较为缓慢,且恶性程度和转移性较低,因此早期诊断误诊和漏诊的可能性极大,但若不能及时进行治疗,一旦病情进展至晚期,极有可能导致患者丧失眼球,从而影响患者的正常生活,同时还会加大治疗的挑战性[1]。因此及时寻找有效的分子靶标,在眼睑基底细胞癌诊断和防治中可发挥出至关重要的作用。沉默信息调节因子1(silence information regulator 1,SIRT1)可通过去乙酰化的方式对基因表达进行调控,从而促进或抑制肿瘤进展[2]。酪氨酸蛋白激酶信号传导系统在促进肿瘤的发生、发展中具有重要意义,酪氨酸蛋白激酶-2(Janus kinase-2,JAK2)作为JAK家族的一员,其表达不仅对肿瘤的发生、发展有影响,还有可能影响患者的预后[3]。基于此,本文就眼睑基底细胞癌组织中SIRT1、JAK2的表达及临床意义进行分析。

1 资料与方法

1.1 一般资料

根据纳入、排除标准,于2017年5月至2022年5月选取经病理检查证实为眼睑基底细胞癌且经手术切除保留的癌组织蜡块70例作为观察组,男性37例、女性33例;年龄20～78岁,平均(54.56±5.34)岁。另将其同期切除的癌旁组织蜡块70例作为对照组,男性39例、女性31例;年龄21～80岁,平均(55.22±5.16)岁。两组基本资料比较差异不显著(P>0.05)。本次研究已获得医院伦理委员会批准。

1.2 方法

采用免疫组化SP法检测:对两组组织标本进行切面,厚度为4 μm,置于60 ℃烤箱内烤1 h,脱蜡、水化(无水乙醇、体积分数95%、85%、70%乙醇),滴入过氧化氢阻断过氧化酶,PBS清洗,封闭液封闭,滴入一抗SIRT1、JAK2,置于4 ℃环境中一夜,PBS清洗,滴入二抗孵育(45 min),DAB显色,10%苏木精复染,乙醇脱水,经二甲苯透明、封片,于显微镜下观察。SIRT1、JAK2阳性表达参照染色指数(staining index,SI)评估。SI为染色强度与阳性细胞百分比评分乘积。评分标准:0分表示无染色;1分表示浅黄色;2分表示棕黄色;3分表示棕褐色。(-):SI<3分;(+):SI=3分:(++):SI>3,<6分;(+++):SI≥6分。(-)、(+)表示低表达,(++)、(+++)表示高表达。

1.3 观察指标

(1)比较眼睑基底细胞癌组织的SIRT1、JAK2表达阳性率。(2)分析SIRT1、JAK2表达与眼睑基底细胞癌组织临床病理特征的关系,并分析其相关性,包括性别、年龄(≥60岁、<60岁)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)增殖指数(≥25%、<25%)、肿瘤直径(≥3 cm、<3 cm)、病理分型(结节型、溃疡型、浸润型、硬斑病样型)、TNM分期(Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期)。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 眼睑基底细胞癌组织中SIRT1、JAK2表达情况

眼睑基底细胞癌组织中SIRT1、JAK2表达阳性率明显高于癌旁组织(P<0.05),见表1。

表1 眼睑基底细胞癌组织SIRT1、JAK2表达情况/例

2.2 SIRT1、JAK2表达与眼睑基底细胞癌组织临床病理特征的关系

SIRT1低表达和SIRT1高表达与眼睑基底细胞癌患者性别、复发率无关(P>0.05),与患者年龄、PCNA增殖指数、肿瘤直径、病理分型相关(P<0.05);JAK2低表达和SIRT1高表达与眼睑基底细胞癌患者性别、年龄、PCNA增殖指数、肿瘤直径、病理分型、有无脉管浸润、复发无关(P>0.05),与TNM分期相关(P<0.05),见表2。

表2 SIRT1、JAK2表达与眼睑基底细胞癌临床病理特征的关系(例,%)

2.3 眼睑基底细胞癌临床病理特征与SIRT1、JAK2表达的相关性

SIRT1表达与眼睑基底细胞癌患者年龄、PCNA增殖指数、肿瘤直径、病理分型呈正相关性;JAK2表达与眼睑基底细胞癌组织TNM分期呈正相关性(P<0.05),见表3。

表3 眼睑基底细胞癌临床病理特征与SIRT1、JAK2表达的相关性

3 讨论

3.1 眼睑基底细胞癌组织SIRT1的表达及临床意义

SIRT1是一种赖氨酸脱乙酰基酶,具有组蛋白去乙酰化和乙酰化活性,可对转录水平中对一些基因的表达或沉默进行调节,同时还能通过促进上皮间质化的方式作为癌症转移的关键调节剂。鲁强等[4]学者的研究认为,利用慢病毒介导的RNA干扰技术对SIRT1靶向沉默,可通过p53/p21途径抑制RL95-2细胞增殖、非锚定依赖性、迁移及侵袭,可见SIRT1与肿瘤的发生、发展均存在一定关联。本次研究结果显示,与癌旁组织相比,眼睑基底细胞癌组织的SIRT1表达阳性率更高,SIRT1表达与眼睑基底细胞癌组织年龄、PCNA增殖指数、肿瘤直径、病理分型呈正相关性。提示SIRT1表达水平与眼睑基底细胞癌的发生、发展存在密切关联,推测眼睑基底细胞癌可能是眼睑基底细胞癌诊断与治疗的有效参照指标。刘法等[5]的研究也发现,眼睑基底细胞癌组织中SIRT1的阳性表达率显著比皮肤基底细胞乳头状瘤组织高,经Spearman法分析后发现,眼睑基底细胞癌组织中SIRT1蛋白表达具有正相关性,且SIRT1在眼睑基底细胞癌组织中的表达与患者年龄、PCNA增殖指数、肿瘤长径和肿瘤病理分型有关,与本次研究结果一致。

3.2 眼睑基底细胞癌组织JAK2的表达及临床意义

JAK在细胞因子信号传递中具有重要作用,可在细胞因子受体与相应配基结合后活化,并对另一种信号蛋白分子STAT进行激活,进而诱导目的基因表达。目前有相关研究认为JAK/STAT与多种肿瘤的发生发展均存在一定关联,因此临床多通过抑制JAK/STAT通路的方式抑制癌症进展[6]。袁前超等[7]的研究认为,敲低TCF7通过抑制JAK/STAT通路活化的方式,可在一定程度上抑制肺癌细胞的增殖能力。另外,贾茗博等[8]也发现,利用氯化两面针碱抑制胶质瘤细胞上皮-间质转化,其抑制作用可通过JAK/STAT3信号通路实现。JAK2是JAK家族的一员,与肿瘤的发生、发展均存在一定关联,但目前国内对于JAK2表达与眼睑基底细胞癌组织临床病理特征关系的相关研究较为缺乏。本次研究发现,相较于癌旁组织而言,眼睑基底细胞癌组织的JAK2表达阳性率更高,JAK2表达与眼睑基底细胞癌组织TNM分期呈正相关性。提示JAK2表达水平在促进眼睑基底细胞癌发生、发展方面具有重要意义。

综上所述,SIRT1、JAK2在眼睑基底细胞癌组织中呈高表达,与患者的年龄、PCNA增殖指数、肿瘤直径、病理分型、TNM分期存在一定关联,在诊断眼睑基底细胞癌方面具有重要意义。