血清CA242、CEACAM-1、TSGF对胰腺癌肝转移的诊断效能及预后的影响*

刘赫, 吴学军, 陈昌明

北京市丰台区中医医院(北京市丰台区南苑医院) 1检验科, 2治未病科(北京 100076)

胰腺癌(pancreatic cancer,PC)是世界公认的恶性度最高的肿瘤,5年生存率不足10%,其诊治困难主要在于其起病隐匿、转移迅速[1-2]。近年来PC的发病率及死亡人数呈逐渐上升趋势[3]。肝脏是PC最易发的转移器官,与其他肿瘤不同,PC肝转移表现出以下三大特征:小肿瘤并发大转移,根治术后短期内仍出现肝转移,肝转移确诊后平均生存期极短。因此,了解促进PC肝转移的机制在临床上具有重要意义[4-6]。血清糖类抗原242(carbohydrate antigen 242,CA242)、CEA细胞黏附分子1 (CEA cell adhesion molecule 1, CEACAM-1)和恶性肿瘤特异性生长因子 (tumor specific group of factors, TSGF) 是新型生物标志物的候选分子。CEACAM1是癌胚抗原 (carcinoembryonic antigen,CEA) 家族中 CEA 相关细胞黏附分子 (CEACAM) 亚家族成员,其在肿瘤环境中高度表达,并且在淋巴细胞上受到严格调节,参与入侵宿主和逃避免疫系统[7]。TSGF是恶性肿瘤生长相关的糖类物质,在血液中含量升高,是肿瘤的早期发现、治疗后、转移、复发的重要线索,可以和其他分子标志物联合检测提高PC诊断效力[8-9]。但是CA242、CEACAM-1和TSGF的联合检测是否可以作为预测PC肝转移的分子标志物尚不清晰。因此,本研究探讨PC患者血清CA242、CEACAM-1和TSGF水平及预测患者发生肝转移的能力,旨在为PC相关疾病的诊治治疗提供新思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年11月至2021年11月北京市丰台区中医医院收治的92例PC患者,按照PC术后发生/不发生肝转移将患者分为2组,其中发生肝转移患者46例(肝转移组),未发生转移46例(无肝转移组)。

入组标准:(1)经病理学诊断为PC;(2)体力状况ECOG评分0～1分;(3)预计生存期至少3个月。

排除标准:(1)术前存在肝转移者和并发其他恶性肿瘤者;(2)免疫或血液系统疾病;(3)严重的糖尿病、甲状腺疾病和精神病等或其他任何情况;(4)不配合或中途退出者。

本研究内容经患者及家属签署知情同意书,且经医院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 样品采集 本研究中所有患者均于入院24 h内的空腹静脉血5 mL,在4℃ 3 000 r/min条件下离心20 min,分离上清液并分装于EP管中,于-80℃保存备用。

1.2.2 血清CA242、CEACAM-1、TSGF水平检测 采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清CA242、CEACAM-1、TSGF水平,其试验步骤严格按照人CA242(货号:EH0398,武汉菲恩生物科技有限公司),人CEACAM-1(货号:EH0491,武汉菲恩生物科技有限公司)和TSGF(货号:EH2241,武汉菲恩生物科技有限公司)试剂盒说明书进行操作,分离获取上清液后,分别加入酶标抗体,37℃, 30 min,加入底物液,每孔100 μL,置37℃避光放置5 min,加入终止液显色,每孔加入反应终止液50 μL终止反应,于20 min内测定实验结果,酶联检测仪测定吸光度OD值,每组实验设置3个复孔。

2 结果

2.1 两组患者临床资料的比较 见表1,两组患者性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05),BMI、术前肝功能分级、癌组织分化程度、脉管癌栓、合并脂肪肝、术后化疗和肠系膜上静脉(SMV)侵犯差异有统计学意义(P<0.05)。

表1 两组患者临床资料比较分析 例(%)

2.2 两组患者CA242、CEACAM-1和TSGF水平分析 见表2,与无肝转移组相比,肝转移组患者CA242、CEACAM-1和TSGF表达水平显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。

表2 两组患者CA242、CEACAM-1和TSGF水平分析

2.3 PC患者肝转移的多因素logistic回归分析 以PC有无发生肝转移为因变量,进行多因素logistic回归分析,结果表明BMI>23 kg/m2、术前肝功能分级B级、癌组织低分化、CA242、CEACAM-1、TSGF、SMV侵犯为PC肝转移的影响因素(P<0.05)。见表3。

表3 PC患者肝转移临床指标的多因素logistic回归分析

2.4 血清CA242、CEACAM-1、TSGF 对PC患者肝转移预测的评估价值 血清CA242、CEACAM-1、TSGF 以及联合使用对PC肝转移预测的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.812、0.850、0.862、0.903,特异度分别为90.20%、85.50%、74.00%、92.90%,敏感度分别为64.70%、70.0%、82.00%、83.80%。三者联合预测效力显著升高,见表4、图1。

图1 血清CA242、CEACAM-1、TSGF 对PC患者肝转移预测的评估价值

表4 血清CA242、CEACAM-1、TSGF 对PC患者肝转移预测的评估价值

2.5 不同血清CA242、CEACAM-1、TSGF水平患者生存时间比较 通过对患者进行随访6个月,根据血清CA242、CEACAM-1、TSGF中位表达将患者分为高表达组和低表达组,高表达组患者的生存率时间均低于CA242、CEACAM-1、TSGF低表达组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。见图2。

图2 不同血清CA242、CEACAM-1、TSGF水平患者生存时间比较

3 讨论

PC是一种在世界范围内流行的常见的致死疾病,每年导致33.1万多人死亡,是癌症死亡的第七大原因[10-12]。

研究表明PC细胞可以通过PI3k/Akt、JAK-STAT和Hedgehog等信号传导途径、炎症细胞因子和活性氧成分激活PSC,进而自分泌转化生长因子-β(transforming growth factor- β,TGF-β)诱导胰腺肿瘤的发生、发展。也有研究表明TGF-β、神经源性基因座notch同源物(neurogenic locus notch homolog,Notch)通路、Wnt癌基因(Wnt oncogene,Wnt)/β-连环蛋白(β-Catenin)通路等可以驱动靶向基因转录,上调N-钙黏蛋白等间充质标志物表达,抑制E-钙黏蛋白等上皮标志物表达,从而促进PC的侵袭和扩散[13-15],揭示生物标志物在PC肝脏转移中发挥的作用并探索PC新型生物标志物是当前学界的热点。新型生物标志物具有敏感度高、特异性强的特点,研究表明CA199 和 CA50 作为PC诊断的生物标志物具有良好的敏感度和特异度。然而这两种肿瘤标志物都很大程度上受到肝功能和胆汁淤积的影响,从而导致良性胆汁淤积性黄疸和肝实质疾病出现假阳性值,并且不能够作为PC肝转移的生物标志物[16]。

CA242是一种新的肿瘤相关抗原,当消化道发生肿瘤时,其含量升高。有研究通过76例PC患者,按PC分期不同将患者分为早期组41例和中晚期组35例,发现PC患者肿瘤进展程度与CA724、CA242、CA199水平呈正相关且CA724、CA242、CA199联合检测预测PC患者肿瘤进展的价值较高[17]。

CEACAM-1 是 CEACAM 家族成员,可介导细胞间黏附。研究表明CEACAM1 在血管生成、新血管形成及肿瘤发生中起重要作用,也有研究表明结直肠癌组织中CEACAM-1和VEGF阳性表达组中微血管密度(microvessel density,MVD)值显著高于阴性组;CEACAM-1与VEGF在结直肠癌组织中的表达呈正相关性[18-19]。TSGF存在于恶性肿瘤患者的血清中,对恶性肿瘤血管增生、向恶性肿瘤细胞提供营养物质发挥重要调控作用,在肿瘤形成的早期就可明显升高,是一种新的高敏感度、高特异度的广谱肿瘤标记物,研究表明三期动态增强MSCT联合血清甲胎蛋白(AFP)、TSGF及AFP-L3检测对原发性肝癌具有诊断价值,能够显著提高诊断的阳性率。以上研究提示CA242、CEACAM-1和TSGF可以在PC和肝癌诊断中发挥重要作用,但是CA242、CEACAM-1和TSGF在临床PC肝转移的诊断未得到阐明。

因此本研究通过临床入组PC患者,发现合并肝转移患者血清CA242、CEACAM-1及TSGF水平显著升高,提示上述三者可能参与了PC患者的肝转移发生,并且可能与患者后期发生为肝转移相关,本研究进一步通过多因素logistic回归分析结果表明CA242、CEACAM-1及TSGF均是并发肝转移的风险因子,提示入院时CA242、CEACAM-1及TSGF高表达的患者,需要警惕减少患者发生肝转移风险。在手术后治疗中和随访时关注上述三者的水平变化。

并且本研究还进一步对数据进行了ROC分析,结果发现CA242、CEACAM-1及TSGF均可以独立预测PC患者肝转移风险,AUC均高于0.7,具有较高的敏感度和特异度,将血清CA242、CEACAM-1、TSGF三者联合使用可以显著提高预测效力。因此,将3种指标联合使用,有助于提高预测敏感度和特异度,早期预测患者发生肝转移的风险。最后本研究对3种指标高表达和低表达的患者生存期进行了分析,发现CA242、CEACAM-1、TSGF与患者生存时间呈负相关,3种指标低表达的患者生存期较长,高表达者生存期较短,进一步证实了CA242、CEACAM-1、TSGF水平升高对不良预后和恶性进展具有促进作用,三者促进其他肿瘤的发生、发展作用[17-20]一致。

综上所述,本研究证实了血清CA242、CEACAM-1和TSGF在PC肝转移患者中升高,可作为PC肝转移评估的血清生物标志物,对PC患者疾病进展的诊治和预测有重大意义。本研究可以进一步扩大样本量,通过人工智能算法等方法验证CA242、CEACAM-1、TSGF的预测效能,为PC的肝转移诊治提供准确的大数据依据。

利益相关声明:本文全体作者均知晓并同意论文投稿,并承诺无任何利益冲突。

作者贡献说明:刘赫:论文设计与实施研究,撰写论文;吴学军:收集与整理数据;陈昌明:统计学处理。