缺氧缺血性脑病新生儿血清Netrin-1、NCAM水平与疾病严重程度、预后的关系*

张世民,王明东,许海鹏

海南现代妇女儿童医院新生儿科,海南海口 571100

新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)是一种围产期因缺血缺氧导致脑部血流异常引起的神经系统疾病,严重威胁我国儿童的生长发育及健康安全[1]。轻症HIE患儿经规律治疗后即可痊愈,然而中重症HIE患儿因病情进展快,错过最佳的治疗时机,容易遗留神经系统后遗症,预后较差[2]。因此,早期评估HIE患儿的病情及预后情况,有利于诊疗工作的正常开展。神经轴突导向因子-1(Netrin-1)是一种与层黏连蛋白具有相似结构及功能的分泌型蛋白质,具有保护神经系统功能的作用[3]。既往研究发现,急性缺血性脑卒中患者血清Netrin-1水平变化与近期神经功能恢复及预后有关[4]。神经细胞黏附分子(NCAM)是细胞黏附分子免疫球蛋白超家族的成员之一,可参与神经功能损伤及修复过程,已有研究证实,血清NCAM水平变化与多种神经退行性疾病的病情进展有关,包括阿尔茨海默病、脊髓损伤等[5-6]。但是目前关于血清Netrin-1、NCAM与HIE的相关报道仍较少。基于此,本研究主要探讨HIE患儿血清Netrin-1、NCAM水平及其与疾病严重程度、预后的关系,以期为临床诊疗提供参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2020年2月至2022年2月本院收治的106例HIE患儿作为研究对象。纳入标准:(1)符合HIE的相关诊断标准[7];(2)胎龄>36周。排除标准:(1)多胎妊娠;(2)合并先天性器官发育不全、染色体异常遗传病、代谢异常疾病;(3)合并肺炎、化脓性脑膜炎等感染性疾病;(4)临床资料丢失;(5)失访及中途退出本研究。根据疾病严重程度[8]将HIE患儿分为轻度组(n=37)、中度组(n=48)、重度组(n=21);轻度HIE患儿多无惊厥症状,易激惹,肌张力正常或轻度增加;中度HIE患儿存在嗜睡或活动减少,且伴有惊厥症状,肌张力降低;重度HIE患儿伴有意识障碍,各种反射消失,惊厥频繁。本院医学伦理委员会已审核批准本研究,患儿监护人对本研究知情同意。

1.2方法

1.2.1血清Netrin-1、NCAM水平检测 出生6 h内采集HIE患儿2 mL外周静脉血标本,3 000 r/min离心10 min后,保留上层清液,置于-80 ℃冰箱内保存待检。采用酶联免疫吸附试验检测患儿血清Netrin-1、NCAM水平。Netrin-1试剂盒购于天津科维诺生物科技有限公司,NCAM试剂盒购于上海抚生实业有限公司,检测流程参考操作说明书。

1.2.2预后 出院后连续随访12个月,记录HIE患儿的智力发育、神经系统发育及死亡情况,将智力及神经系统发育正常的患儿纳入预后良好组(n=81),将智力发育异常或存在脑瘫、癫痫等神经系统后遗症或死亡患儿纳入预后不良组(n=25)。

2 结 果

2.1各组患儿临床资料比较 3组患儿性别、胎龄、出生体重、出生身长、分娩方式比较差异无统计学意义(P>0.05);随着HIE患儿病情加重,出生1 min 后Apgar评分逐渐降低,不同病情严重程度患儿Apgar评分比较差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 各组患儿临床资料比较

2.2不同病情严重程度HIE患儿血清Netrin-1、NCAM水平比较 随着HIE患儿病情加重血清Netrin-1、NCAM水平由高到低依次为轻度组、中度组、重度组,差异有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 不同病情严重程度HIE患儿血清Netrin-1、NCAM水平比较

2.3不同预后HIE患儿血清Netrin-1、NCAM水平比较 预后不良组患儿血清Netrin-1、NCAM水平低于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05),见表3。

表3 不同预后HIE患儿血清Netrin-1、NCAM水平对比

2.4血清Netrin-1、NCAM对HIE患儿预后的预测价值 血清Netrin-1、NCAM预测HIE患儿预后的曲线下面积(AUC)分别为0.759、0.852,二者联合预测的AUC为0.902,见表4、图1。

图1 血清Netrin-1、NCAM预测HIE患儿预后的ROC曲线

表4 血清Netrin-1、NCAM对HIE患儿预后的预测价值

2.5HIE患儿预后的单因素及多因素Logistic回归分析 本研究将 HIE患儿的预后作为因变量,赋值方案见表5,将单因素分析差异有统计学意义的指标作为自变量进行多因素Logistic回归分析,结果显示,出生1 min 后Apgar评分、病情严重程度、Netrin-1、NCAM是HIE患儿预后不良的影响因素(P<0.05)。见表6。

表5 各研究变量及赋值情况

表6 HIE患儿预后的单因素及多因素Logistic回归分析

3 讨 论

HIE病情复杂多变,病因未明,容易因治疗延迟而遗留癫痫、智力低下等神经系统后遗症,是导致新生儿残疾及死亡的重要原因之一[9-10]。目前临床尚无有效手段来预防HIE的发生,早期评估患儿病情并给予对症治疗是降低致残及致死风险的重要环节。因此,寻求一种合适的血清标志物用于评估HIE患儿病情及预后是现阶段研究的热点议题。

Netrin-1是神经轴突导向因子家族的成员之一,主要表达于神经系统中,具有抗炎、抗细胞凋亡、神经元修复等作用,在维持中枢神经系统内环境稳态中扮演重要的角色[11]。张葛毅等[12]研究发现,向周围神经损伤小鼠注射Netrin-1后,可通过介导施万细胞的迁移过程,促进轴突再生并加速神经功能恢复。既往有研究发现,血清Netrin-1水平在动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者中明显下调,可作为评估预后的生物学标志物[13]。本研究结果显示,随着HIE患儿病情加重血清Netrin-1水平逐渐降低,预后不良组患儿血清Netrin-1水平低于预后良好组,提示血清Netrin-1可能参与HIE患儿病情进展过程,且与患儿预后关系密切。究其原因,Netrin-1是一种重要的抑炎因子,可阻碍炎症细胞聚集于脑损伤部位,并且可抑制炎症介质产生及神经细胞凋亡,进而减轻脑损伤部位的炎症程度,发挥神经保护作用[14]。同时,Netrin-1可激活细胞外调节蛋白激酶(ERK1)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路,调控新生血管的形成[15]。Netrin-1低表达可加重脑损伤部位的炎症反应程度,促使神经细胞凋亡,同时可抑制新生血管的形成,导致局部脑组织血氧供应不足,加重缺血缺氧程度,影响脑损伤后神经元的修复,进而导致病情恶化,增加HIE患儿预后不良的风险。

NCAM是一种高表达于神经细胞表面的糖蛋白,具有促进神经细胞间黏附、突触可塑性、髓鞘形成及再生等作用,同时可参与记忆形成及学习过程[16]。一项体外研究发现,与正常小鼠比较,血管性脑痴呆小鼠的神经元细胞病变加重,凋亡细胞增加,其血清NCAM表达明显降低[17]。赖珏等[18]研究发现,精神分裂症患者血清NCAM水平低于健康人,且与认知功能障碍有关。本研究结果显示,随着HIE患儿病情加重血清NCAM水平逐渐降低,预后不良组患儿血清NCAM水平低于预后良好组,提示血清NCAM水平变化与HIE患儿病情加重及预后不良有关。究其原因,正常情况下,细胞内环境的钙离子维持动态平衡,然而发生缺血缺氧后,钙离子平衡紊乱,导致血管内皮细胞功能被破坏,产生大量的氧化应激代谢产物,进而损害脑功能。NCAM可通过同型和异型细胞之间的相互作用介导神经细胞间的黏附,并激活相关跨膜信号通路,调控钙离子内流过程,同时具有恢复损伤后神经细胞功能、促进神经元再生等作用[19-20]。而血清NCAM表达水平下调后可引起内环境钙离子稳态失衡,导致脑血管内皮细胞功能异常,脑血流灌注量明显降低,进而加重脑损伤,同时阻碍神经功能修复过程。因此,可推测NCAM低表达与HIE患儿病情加重及预后不良有关。

ROC曲线分析结果显示,血清Netrin-1、NCAM预测HIE患儿预后的AUC分别为0.759、0.852,二者联合预测的AUC为0.902,提示血清Netrin-1、NCAM对HIE患儿预后具有较好临床预测价值,且与单一指标相比,联合检测的预测价值更高。多因素Logistic回归分析结果显示,出生1 min 后Apgar评分、病情严重程度、Netrin-1、NCAM是HIE患儿预后不良的影响因素。上述结果进一步证实血清Netrin-1、NCAM与HIE患儿预后相关。因此,临床医务工作人员可通过检测血清Netrin-1、NCAM变化来预测HIE患儿预后不良的风险,其具有获取简单、特异度高等优点,临床应用前景较好。

综上所述,血清Netrin-1、NCAM水平随着HIE患儿病情加重而降低,且二者与患儿预后密切相关,可作为预测HIE患儿预后的血清标志物。