子宫内膜异位症患者多种血清免疫因子检测的诊断意义

谷文文 马红梅 聂 德

安徽省马鞍山市人民医院妇产科，安徽马鞍山 243000

子宫内膜异位症（endometriosis，EM）是指腺体、间质等子宫内膜组织在子宫内膜外发生了增生。近年来的流行病学调查显示，育龄女性中的EM 发病率呈明显上升趋势[1]。目前关于EM 的发病机制尚未形成确切结论，在19 世纪20 年代有学者提出子宫内膜种植学说[2]，但该学说仍存在一定局限性。近年来有假设学说提出，EM 的进展中涉及到免疫学机制的变化。支持这类学说的学者认为，EM 属于免疫性、炎性疾病，腹腔内微环境中免疫细胞的功能异常，使子宫内膜细胞的侵袭能力加强，腹腔中的内膜细胞脱离免疫监视，导致盆腔内局部的炎症-免疫反应被诱发，加重盆腔粘连[3]。基于此，本研究通过对比分析，探讨腹腔液中免疫因子：转化生长因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）、白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-8（interleukin-8，IL-8）、白细胞介素-12（interleukin-12，IL-12）与肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF-α）的变化情况，希望为临床诊疗以及预后判定提供参考。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2020 年12 月至2022 年12 月来马鞍山市人民医院（本院）妇产科行腹腔镜手术的EM 患者44 例为观察组。纳入标准：①经术后病理诊断为EM，符合诊断标准[4]；②对研究内容充分知情，且自愿参与。排除标准：①术前服用过激素类药物；②放置药物宫内节育环者；③合并其他内分泌、肝、肾、自身免疫以及代谢性疾病；④合并盆腔炎性疾病及结核病史；⑤存在恶性肿瘤史，合并子宫良性肿瘤、乳腺异常增生症等其他激素依赖性疾病。观察组患者年龄25～49 岁，平均（37.97±4.61）岁；妊娠次数：0 次12 例，1 次22 例，2 次10 例；婚姻状况：已婚34 例，未婚10 例。另择同期卵巢良性肿瘤的手术患者44 例，为对照组。纳入标准：①经术后病理诊断为卵巢良性肿瘤，符合病理诊断结果；②对研究内容充分知情，且自愿参与。排除标准：①术前有服用过激素类药物史；②放置药物宫内节育环；③合并其他内分泌、肝肾、自身免疫以及代谢疾病；④存在盆腔炎性疾病及结核病史；⑤合并恶性肿瘤史，合并子宫良性肿瘤、乳腺异常增生症等其他激素依赖性疾病。对照组年龄24～60 岁，平均（38.19±4.92）岁；妊娠次数：0 次10 例，1 次21 例，2 次11 例；婚姻状况：已婚33 例，未婚11 例。两组患者一般资料比较，差异无统计学意义（P＞ 0.05）。具有可比性。本研究经本院医学伦理委员会批准。

1.2 方法

所有入选对象均取平卧或半卧体位，排空尿液后在B 超引导下，经穿刺点用无菌注射器（20 ml）抽取患者腹腔内液体或腹腔冲洗液约5～10 ml。室温0.5～1 h 内在3000 r/min 速度离心10 min。吸取上清液放于EP 管内封存，标记标本号。放置于-80℃冰箱待测。采用酶联免疫吸附法（ELISA）对两组患者腹腔液中的免疫因子（TGF-β、IL-6、IL-8、IL-12、TNF-α）予以检测，操作均严格遵从试剂盒说明进行。腹腔液抽取结束后两组均予以对症手术治疗，并取对应组织送病理检验。

1.3 观察指标

①比较两组腹腔液中TGF-β、IL-6、IL-8、IL-12、TNF-α 水平。②免疫因子的敏感性与特异性测算：以对照组的TGF-β、IL-6、IL-8、IL-12、TNF-α 单侧95%参考值范围上限为界点，若大于界点值即认定为阳性[5]。敏感度=真阳性例数/（真阳性+假阴性例数）×100%；特异度=真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）×100%。

1.4 统计学处理

采用SPSS 19.0 统计学软件进行数据处理，计量资料以均数±标准差（）表示，采用t检验，计数资料以[n（%）]表示,采用χ2检验，P＜ 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者腹腔液中免疫因子水平比较

观察组的腹腔液中TGF-β、IL-6、IL-8 与TNF-α 水平显著高于对照组，且观察组的腹腔液IL-12 相对更低，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。见表1。

表1 两组腹腔液中免疫因子水平比较（）

表1 两组腹腔液中免疫因子水平比较（）

注 TGF-β：转化生长因子-β；IL-6：白细胞介素-6；IL-8：白细胞介素-8；IL-12：白细胞介素-12；TNF-α：肿瘤坏死因子

2.2 不同免疫因子的诊断敏感度、特异度比较

结果显示，IL-8 的敏感度最高，IL-12 的敏感度最低；而在特异度方面，最高的为IL-8（63.64%），最低为TNF-α（54.55%）。不同免疫因子的敏感度与特异度比较，差异无统计学意义（P＞ 0.05）。见表2～3。

表2 不同免疫因子的诊断结果与病理诊断结果比较分析

表3 不同免疫因子的诊断敏感度和特异度比较（%）

3 讨论

3.1 EM的免疫学说概述

越来越多研究认为，免疫因素在EM 的发病、病情进展中有较大参与比重，且对EM 所致不孕症有一定影响[6-7]。关于EM 的发病机制研究仍未形成共识。目前受到较多支持的是Sampson 的逆流种植学说，即指在月经期由于有活性的子宫内膜碎屑脱落后逆流进入腹腔，并在直肠子宫凹陷等部位生根、蔓延而发病[8]。但该假说对盆腔外的子宫内膜异位症并不适用，且无法解释经血逆流女性中仅有少部分发生EM。在针对相关病例的临床研究中可知，这些免疫因子、炎性介质的产生与水平升高，会在病灶处引发类炎症反应[9]，免疫细胞在EM 发病机制中有重要作用。

3.2 不同免疫因子在EM中的生理变化机制

国内外学者的研究中，已经基本认定EM 的发病进程中涉及到免疫机制、炎性机制，相关免疫因子造成的腹腔内环境变化也备受关注。其中TGF-β 属于一族蛋白多肽，目前已鉴定出的TGF-β 包括5 类，即TGF-β1～5。EM 患者生理浓度下的TGF-β1 会促进腹膜间皮细胞的生长因子表达，加上TGF-β1 水平升高带来的机体免疫功能抑制效应，促进新生血管的形成，使子宫内膜组织在宫外组织中实现部分种植[10]。本研究结果显示，观察组在腹腔液中TGF-β 水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。与段婧等[11]的观点一致，证实在EM 的发病中腹腔液TGF-β 水平会出现明显提升。

白细胞介素由巨噬细胞、T 淋巴细胞分泌，目前已发现的包括IL-1～IL-18。IL-6 参与到多种免疫反应和炎症发病进程中，对内分泌与免疫系统调节有重要作用。大量研究表明，EM 患者腹腔液中，随着IL-6 的上升，其所起到的炎症反应会进一步加强，使盆腔粘连、免疫学异常等情况发生，为EM 的发病提供了前提条件[12]。本研究结果表明，IL-6 在观察组的腹腔液中含量水平均明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。与王小兰等[13]的观点存在一致性。

而IL-8 则由单巨噬细胞产生。当机体发生自限性疾病或出现感染时，IL-8 水平在体液中均会出现显著增高，甚至有学者在临床研究中发现这种增长高达500 倍以上[14]。本研究结果显示，观察组的腹腔液IL-8 水平明显高于对照组，但并未表现出500 倍增长。IL-12 则能对免疫反应的可适应性起到调节作用。研究证实，EM 患者的IL-12 的亚单位因子能调节NK 细胞上的IL-12 受体水平，抑制IL-12 的水平表达[15]。这与本研究结果基本一致，本研究表明，观察组的腹腔液IL-12 水平均较对照组有明显下降，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。与张艳[16]的结论存在较高相似性。有学者通过动物实验，发现通对EM 小鼠模型经腹腔注射IL-12，能减轻异位内膜的病灶总重量与病灶面积[17]。但关于IL-12 对EM 的疗效仍有待证实。

TNF-α 主要由巨噬细胞分泌，会促进异位内膜组织的血管形成，对于子宫内膜侵袭、血管成型能力的提升有积极加持效果[18]。有学者发现，TNF-α 对IL-6 等炎性因子的表达，有明显的诱导作用[19]。本研究结果显示，在EM 患者的腹腔液中TNF-α 表达水平明显高于对照组，与王莉等[20]所得结论一致。

3.3 免疫因子诊断EM的价值分析

采用腹腔液血清免疫因子诊断EM 的优势在于：①相较于手术病理检查，腹腔液抽取的创伤更小，对患者而言接受度更高；②准确率及敏感度满意。本研究发现TGF-β、IL-6、IL-8、IL-12、TNF-α 的敏感度在87%～91%，特异度在54%～64%，其中IL-8 的敏感度与特异度均处于最高水平。而李青等[21]在研究中则认为TGF-β与血管内皮生长因子，对于EM 的特异度和敏感度较高。与本研究结果存在一定差异，推断可能是由于所选病例的病变进程、标本采集规范性差异等因素导致。后续研究中可考虑进一步扩大病例纳入范围，纳入更多不同病程阶段的EM 患者开展研究，并不断提高标本取用、实验室相关因子检测水平，以提供更确切参考。

综上所述，EM 患者中的免疫因子水平参与到EM 发病进程，不同免疫因子对EM 的诊断敏感度和特异度有一定可信度，检测免疫因子对于EM 的诊断有较高敏感度和特异度，具有较高的临床诊断意义和应用价值。