2018—2022年某地市级儿童医院小儿肺炎患者分离苛养菌分布及耐药性

黄轲琳,陈 亮,袁红霞,陈虹亮,欧阳育琪

(郴州市第一人民医院 1. 感控科; 2. 检验科,湖南 郴州 423000)

苛养菌与众多呼吸道疾病相关,如中耳炎、鼻窦炎、支气管炎、肺炎等,严重会导致败血症、心内膜炎、脑膜炎等疾病。由于小儿用药的局限、基层医院对苛养菌的分离培养鉴定技术掌握有限,以及苛养菌培养条件高等原因,临床一线常在小儿病原学诊断未明确前早期予以经验用药,导致苛养菌对常用抗菌药物的耐药率呈上升趋势[1-4]。细菌的分布及对抗菌药物的耐药性具有地域性差异,作为湘南地区最大的儿童专科医院,调查近年来苛养菌的耐药性变迁具有一定的区域代表性和临床指导意义。本研究旨在通过了解小儿呼吸道苛养菌的分布及对常用抗菌药物的耐药性特点,为临床医生在小儿病原菌感染初期及早合理使用抗菌药物提供参考。

1 对象与方法

1.1 研究对象 收集2018年1月—2022年12月湘南地区某医院患儿呼吸道标本(痰、肺泡灌洗液等)分离出的8 510株苛养菌及相关患儿的临床资料。纳入标准:(1)符合小儿感染性肺炎的诊断标准;(2)同一患儿相同菌株选取首次分离的菌株。排除标准:同一患儿相同部位分离得到的重复菌株,若抗菌药物敏感性(药敏)试验分析结果相同,可判定为同一菌株,不重复记录。

1.2 研究方法

1.2.1 细菌培养、分离纯化及鉴定 细菌的培养:使用无菌接种环,以三区划线方式将收集的痰标本接种于哥伦比亚血琼脂培养基与巧克力琼脂培养基上,随后置于5% CO2恒温培养箱中,在35～37℃条件下培养24～48 h。病原菌分离纯化及鉴定:观察哥伦比亚血琼脂培养基与巧克力琼脂培养基上菌株的形态,用无菌接种环挑选可疑的单个菌落三区划线接种于对应的培养基,于5% CO2恒温培养箱内35～37℃条件下培养18 h,挑取单个纯菌落进行鉴定,标本采集、培养及菌株鉴定等参照《全国临床检验操作规程(第四版)》[5]和科室检验操作程序文件执行。

1.2.2 药敏试验 在新鲜分离纯化的培养基上挑取单个菌落,采用细菌药敏分析系统进行菌株的药敏试验,部分药敏试验采用Kirby-Bauer(K-B)纸片扩散法和E试验法。药敏折点及抗菌药物选择参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)文件标准。

1.3 主要仪器和试剂 仪器:CO2培养箱购自赛默飞生物医疗股份有限公司,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)、Vitek 2 Compact微生物鉴定仪、自动微生物鉴定及药敏系统(ATB)均购自法国梅里埃公司。试剂:哥伦比亚血平板、巧克力平板购自广州迪景微生物科技有限公司;奈瑟菌-嗜血杆菌药敏条、GP68药敏条购自法国梅里埃公司;奥普托欣(Optochin)纸片、青霉素药敏条购自温州康泰有限公司;质控菌株为肺炎链球菌(Spn)ATCC 49619、流感嗜血杆菌(Hi)ATCC 49274,均购自国家卫生健康委员会(卫健委)临床检验中心。

1.4 统计分析 应用WHONET 5.6软件及SPSS 25.0进行分析,计数资料用百分数(%)表示,采用χ2趋势检验,P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2018—2022年苛养菌分布情况 共送检呼吸道标本46 773份,分离苛养菌8 510株,分离率为18.19%,其中Spn为3 826株(8.18%),Hi为2 723株(5.82%),卡他莫拉菌(Mc)为1 961株(4.19%)。以细菌为分组变量,Spn占比最高(44.96%),Mc占比最低(23.04%)。以年份为分组变量,2018、2020年以Spn、Mc为主,2021、2022年以Hi为主。见表1。

表1 2018—2022年该院苛养菌分布情况[株(%)]

2.2 苛养菌在不同科室中的分布 苛养菌以非重症科室检出为主,分别为Spn 3 617株(94.54%),Hi 2 674株(98.20%),Mc 1 899株(96.84%)。新生儿重症监护室(NICU)检出Hi 3株,儿童重症监护室(PICU)以检出Spn为主,非重症科室以检出Spn为主。见表2。

表2 2018—2022年该院不同科室苛养菌分布[株(%)]

2.3 主要苛养菌的耐药情况

表3 2018—2022年该院Spn耐药率变迁(%)

表4 2018—2022年该院Hi耐药率变迁(%)

表5 2018—2022年该院Mc耐药率变迁(%)

3 讨论

本研究通过分析2018—2022年监测数据发现,该地区苛养菌分离率为18.19%,低于苏州地区(67.14%)和南宁地区(37.48%),但高于宁波市(2.64%),分离率的高低与不同地区疫苗接种普及度有关[1-3]。该地区小儿呼吸道感染常见苛养菌排名前三分别为Spn、Hi和Mc,与对成年患者的研究[4,6]结果不一致。鉴于本研究仅针对14岁以下儿童,研究结果提示小儿呼吸道感染苛养菌与成人有差别。2020年后Spn、Hi、Mc的菌株检出量下降,推测新型冠状病毒疫情后,由于提倡戴口罩,减少出行,辅导机构停止授课,以及采用线上教学等,减少了包括学校在内的各类场所的聚集,使以呼吸道感染为主要就诊原因的患儿数量骤减,标本送检量减少。此外,研究结果显示96.24%的苛养菌来源于非重症科室,可能与病房患者呼吸道感染致病菌不同、诊治药物差异及侵入性医疗操作等因素有关。

Mc又名卡他微球菌,过去一直认为对人体无致病性,随着研究的深入,发现Mc菌体可以刺激呼吸道上皮细胞和单核细胞分泌炎性因子,引发一系列呼吸道症状。Mc的药敏结果显示其仅对氨苄西林耐药率高,对其余常用抗菌药物的耐药率均较低,可能与Mc的分离率低有关,不建议将氨苄西林用于临床一线治疗。五年数据显示每年都检出Mc对阿莫西林/克拉维酸的耐药菌株,且有上升趋势,其平均耐药率1.07%高于2020年儿童细菌耐药监测报告的0.8%[7],应重视产β-内酰胺酶Mc菌株增多的趋势。随着磺胺类药物在儿科广泛使用,Mc对磺胺类的耐药率较2020年前有升高趋势,亦需引起临床重视。

肺炎是我国住院小儿死亡的第一位原因,被国家卫健委列为重点防治的小儿四病之一。本研究结果显示,引起婴幼儿肺炎最常见的苛养菌是Spn、Hi和Mc,说明要重视呼吸道标本,特别是无菌标本(如肺泡灌洗液等)的送检,同时必须严格按照操作规程进行相关标本的采集、送检及鉴定。由于儿童使用抗菌药物的特殊性,氧氟沙星、四环素、氯霉素和利福平均不宜用于儿童,可以在最终病原学结果出来之前经验性使用β-内酰胺类、头孢菌素类等抗生素,后期根据药敏结果回报再调整用药方案。

利益冲突:所有作者均声明不存在利益冲突。