血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 水平在乳腺癌中的表达及意义

2023-09-07王聪张娜贤周阳王海彦

分子诊断与治疗杂志 2023年8期

王聪张娜贤周阳王海彦★

乳腺癌主要发生于乳腺上皮组织，发生率较高，早期无明显症状，随着疾病的进展会出现淋巴转移等恶化症状，进展至晚期肿瘤细胞会发生转移，威胁患者的生命，因此，寻找乳腺癌的标记物，分析其临床病理特征，对改善患者预后有重要意义［1］。微小核糖核酸（MicroRNA，miRNA）是非编码RNA，与多种恶性肿瘤关系密切［2］。miR-141-3p 是miR-200 家族的成员，通过调节不同的信号通路，在疾病发生、发展过程中发挥重要作用，目前已被证实其与前列腺癌、子宫内膜癌等发生密切相关［3］。sE-cadherin 广泛存在于肿瘤患者血清和尿液中，已证实其在乳腺癌患者体内水平升高，对乳腺癌的发生、侵袭和转移有重要意义；COX-2 是一种诱导基因，能增加基质金属蛋白酶活性，促进肿瘤侵袭淋巴结［4-5］。血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 在多种肿瘤中表达异常，但与乳腺癌的表达及临床病理相关性少有报道。因此，本研究旨在探讨血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 水平在乳腺癌中的表达，并分析其与不同病理特征、CD4+和CD8+的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020 年4 月至2021 年12 月南阳市第二人民医院收治的乳腺癌患者50 例进行研究，设为病例组，研究已获得院伦理会批准实施。年龄（48.72±4.41）岁，有淋巴结转移20 例，未转移30例。并选取同期入院的乳腺良性疾病患者50 名设为对照组，其中乳腺炎12 例，乳腺增生38 例，年龄（48.39±4.13）岁，两组年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

参照《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范》［6］，乳房肿块、乳房皮肤异常等症状；病理检查证实。

病例组纳入标准：①符合相关诊断标准；②无生命危险者；③未转移者；④知情同意。排除标准：①病情无法控制者；②深度昏迷，意识模糊者；③中途退出研究者；④妊娠者；⑤复发性者。

1.2 实验方法

采集两组对象入组后第2 d 清晨空腹静脉血，采用美国罗氏公司RNA 提取试剂盒聚合酶链反应法测定血清miR-141-3p。采用酶联免疫吸附法测定sE-cadherin、COX-2 水平，试剂盒购于赫澎（上海）生物科技有公司，仪器均使用酶标仪。试剂盒由深圳晶美生物技术有限公司生产，操作严格按试剂盒说明进行；流式细胞术检测CD4+和CD8+含量。

1.3 统计学方法

采用SPSS 24.0 软件进行数据分析。正态分布计量资料以（±s）表示，两两比较采用t检验，多组间比较采用方差分析；相关性分析采用Spearman 相关分析；以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 水平比较

病例组血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P均＜0.01）。见表1。

表1 两组血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 水平比较（±s）Table 1 Comparison of serum miR-141-3p，sE-cadherin and COX-2 levels between the two groups（±s）

2.2 两组免疫细胞水平比较

病例组CD4+、CD4+/CD8+水平显著低于对照组，CD8+显著高于对照组，差异有统计学意义（P均＜0.01）。见表2。

表2 两组免疫细胞水平比较（±s）Table 2 Comparison of immune cell levels between the two groups（±s）

2.3 血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 水平与乳腺癌临床病理的关系

所有患者不同年龄、病理组织学类型与血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 表达水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）；肿瘤最大径＞4 cm、病理分级Ⅲ级～Ⅳ级、分化程度高分化程度、淋巴结转移血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 水平均明显高于肿瘤最大径≤4 cm、病理分级Ⅰ～Ⅱ级级、中低分化程度、淋巴结未转移患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 水平与乳腺癌临床病理的关系（±s）Table 3 Relationship between serum miR-141-3p，sE-cadherin and COX-2 levels and clinicopathology of breast cancer（±s）

2.4 血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 水平达与乳腺癌临床病理、细胞免疫的相关性分析

相关性分析显示，血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 与乳腺癌患者肿瘤最大径、病理分级、分化程度、淋巴结转移及CD8+之间均呈正相关，血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 与乳腺癌患者CD4+、CD4+/CD8+之间均呈负相关（P＜0.05）。见表4。

表4 血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 水平达与乳腺癌临床病理、细胞免疫的相关性分析Table 4 Correlation analysis of serum miR-141-3p，sE-cadherin and COX-2 levels with clinicopathology and cellular immunity of breast cancer

3 讨论

乳腺癌是临床常见恶性肿瘤之一，临床表现为乳房肿块、乳房皮肤异常等，若控制不及时，疾病进展至晚期细胞会发生转移，出现器官病变，威胁患者生命［7］。近年来乳腺癌的发生率呈上升趋势，据调查显示，我国乳腺癌发生率居女性恶性肿瘤首位，死亡率居女性恶性肿瘤第二位，已成为当今社会的重大公共卫生问题［8］。因此，了解乳腺癌发展的分子机制，并对疾病进行早期诊断、及时采取干预措施，对改善预后有重要意义。

miRNA 广泛参与肿瘤的发展过程，miR-141-3p 是miR-200 家族的成员，可通过靶向表皮生长因子受体（Epithelial growth factor receptor，EGFR）影响下游途径蛋白，抑制成纤维细胞的增殖，促进细胞凋亡［9］。sE-cadherin 是一种跨膜糖蛋白，有维持上皮细胞极性和细胞粘附的功能，其水平异常是肿瘤发生侵袭和转移的关键，其水平下调时可减轻肿瘤细胞间的黏附能力，促进肿瘤细胞转移［10］。COX-2 属于诱导型酶，是合成前列腺素的重要限速酶，可通过调控细胞周期抑制细胞分裂，减少肿瘤新生血管形成，使肿瘤萎缩，在炎症细胞因子、生长因子等刺激后诱导表达［11-12］。有研究指出，sE-cadherin 均是乳腺癌诊断的有效指标，但其灵敏度较低，因此，联合多种血清肿瘤标志物对乳腺癌进行诊断，提高疾病的检出率［13］。本研究结果提示，血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 在乳腺癌中呈高表达，可能参与了疾病的发展。分析其原因可能是因为sE-cadherin 可通过组织蛋白酶降解组织表面的E-cadherin 释放入机体，肿瘤细胞组织蛋白酶的活性升高，能促进肿瘤组织表面的E-cadherin 发生降解，减弱肿瘤组织细胞间的黏附能力，E-cadherin 被释放进血液循环内，故而导致其水平升高。在病理状态下COX-2 可过量分泌，通过诱导前列腺素合成，促进乳腺癌血管生成和肿瘤细胞增殖，提高血管通透性，增强肿瘤细胞转移能力，从而参与了乳腺癌的发生与发展。

有研究显示，乳腺癌的发生是一个多因素过程，常伴有细胞免疫水平变化，细胞免疫能抑制淋巴细胞，改变肿瘤的微环境，抑制肿瘤细胞清除［14］。CD4+细胞能调控炎症与细胞毒相关的免疫应答，活化自然杀伤细胞；CD8+细胞毒性较轻，在杀死肿瘤细胞中发挥了重要的作用［15］。本研究结果提示，乳腺癌患者细胞免疫细胞异常。分析其原因可能是因为COX-2 可通过上调原癌基因Bcl-2 表达提高肿瘤细胞的抗凋亡能力，抑制淋巴因子产生，减少T 细胞增殖，减弱病人机体免疫监视功能，故与细胞免疫关系密切。相关性分析显示，血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 与乳腺癌患者肿瘤最大径、病理分级、分化程度、淋巴结转移及CD8+之间均呈正相关，血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 与乳腺癌患者CD4+、CD4+/CD8+之间均呈负相关。

综上所述，乳腺癌患者中血清miR-141-3p、sE-cadherin、COX-2 水平表达明显升高，与临床病理、细胞免疫之间关系密切，可能协同参与了乳腺癌的发生、发展，对乳腺癌患者预后的评估具有重要意义。