甲状腺癌血清let-7e、DKK-1 及TSGF 的表达及与疾病严重程度的关系

2023-09-07凌云志沈益青

分子诊断与治疗杂志 2023年8期

凌云志沈益青

甲状腺癌是临床常见的恶性肿瘤之一，临床无明显症状，多数患者是在体检时通过甲状腺触诊发现甲状腺小肿块。甲状腺癌发病率较高，占全身恶性肿瘤的1%～5%，且以每年4%的速度增加，已成为困扰我国居民健康的重要问题［1-2］。甲状腺癌可依据组织学分为分化型、未分化型，其中分化型甲状腺癌预后较好。目前临床多使用超声检查诊断甲状腺癌，但超声检查诊断标准不统一，易被漏诊和误诊，因此寻找其他无创、简单鉴别疾病的方法具有重要意义［3］。血清线性能量传递7e（low energy transfer-7e，let-7e）可促进癌细胞增殖、体外血管生成和肿瘤生长，研究显示，let-7e在多种恶性肿瘤中表达较低［4］。Dick-kopfx 相关蛋白-1（Recombinant Dickkopf Related Protein 1，DKK-1）是Wnt 信号通路相关因子，可加剧氧化应激性障碍，通过旁分泌和自分泌参与肿瘤的增殖和转移。肿瘤特异性生长因子（Tumor Supplied Group of Factors，TSGF）是一种肿瘤标记物，参与多种恶性肿瘤的血管增生，对血管网形成起重要作用［5］。本研究旨在探讨血清let-7e、DKK-1及TSGF 在甲状腺癌中的表达，并分析其与疾病严重程度的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2019 年6 月至2022 年1 月于民航上海医院进行治疗的165 例甲状腺癌患者设为病例组，其中男49 例，女116 例，年龄平均（43.56±3.56）岁，体质量平均（23.22±0.36）kg/m2。其中乳头状癌82 例，滤泡癌39 例，髓样癌44 例；预后不良（肿瘤远处转移或死亡）23 例，预后良好（影像学检查提示无病变征象）142 例［6］；根据TNM 分期［7］分为Ⅰ+Ⅱ期124 例、Ⅲ期27 例、Ⅳ期14 例。选择同期在本院进行检查的100 名健康人为对照组（排除甲状腺手术史、妊娠、哺乳及不同意参加研究者），其中男31 例，女69 例，年龄平均（43.47±3.48）岁，体质量平均（23.31±0.37）kg/m2。两组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），研究已获得本院伦理委员会批准实施。

病例组纳入标准：①符合《甲状腺癌诊疗规范》［8］诊断标准；②首次确诊；③患者或家属签署知情同意书。排除标准：①颈部感染性疾病；②其他甲状腺疾病者；③甲状腺手术史；④合并其他感染者。

1.2 方法

抽取所有受试者入组后第1 d 空腹静脉血5 mL，3 000 r/min，半径10 cm，离心10 min，提取上层血清后置入EP 管，并置于冷冻箱内储存以备检测，使用酶联免疫吸附法对血清let-7e、DKK-1 及TSGF 进行检测，试剂盒购于英国Abcam 公司，仪器均使用东芝GA800 生化分析仪。

1.3 统计学分析

采用SPSS 24.0 统计软件包处理数据，计量资料用（±s）表示，行t检验，多组比较采用方差分析，相关性分析使用Spearman 相关系数，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清let-7e、DKK-1及TSGF表达水平比较

病例组血清let-7e 低于对照组，DKK-1 及TSGF 表达水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表达水平比较（±s）Table 1 Comparison of serum let-7e，DKK-1 and TSGF expression levels between the two groups（±s）

2.2 病例组不同临床分期血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表达水平比较

血清let-7e 水平：Ⅰ+Ⅱ期＞Ⅲ期＞Ⅳ期，DKK-1及TSGF 水平：Ⅰ+Ⅱ期＜Ⅲ期＜Ⅳ期，差异无统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 病例组不同临床分期血清let-7e、DKK-1 及TSGF表达水平比较（±s）Table 2 Comparison of serum let-7e，DKK-1 and TSGF expression levels at different clinical stages in case group（±s）

注：与Ⅰ+Ⅱ期比较，a P＜0.05，与Ⅲ期比较，bP＜0.05。

2.3 不同组织学类型血清let-7e、DKK-1 及TSGF表达水平比较

不同组织学类型之间血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表达水平比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3。

表3 不同组织学类型血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表达水平比较（±s）Table 3 Comparison of serum let-7e，DKK-1 and TSGF expression levels among different histological types（±s）

2.4 不同预后血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表达水平比较

预后良好患者血清let-7e 显著高于预后不良患者，DKK-1 及TSGF 表达水平显著低于预后不良患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

表4 不同预后血清let-7e、DKK-1 及TSGF 表达水平比较（±s）Table 4 Comparison of serum let-7e，DKK-1 and TSGF expression levels in different prognosis（±s）

2.5 血清let-7e、DKK-1 及TSGF 与甲状腺癌患者病情程度的相关性分析

相关性分析结果显示，血清let-7e 和病情程度之间呈负相关，血清DKK-1 及TSGF 和病情程度之间呈正相关（P＜0.05）。见表5。

表5 血清let-7e、DKK-1 及TSGF 与甲状腺癌患者病情程度的相关性分析Table 5 Correlation analysis between serum let-7e，DKK-1 and TSGF and the severity of thyroid cancer patients

3 讨论

甲状腺癌是一种起源于甲状腺滤泡上皮的恶性肿瘤，是头颈部最为常见的恶性肿瘤，可侵犯周围组织，发生远处转移或腺内扩散，严重威胁患者生命［9］。甲状腺癌的发病机制比较复杂，研究表明可能与遗传、碘摄入量、雌激素水平及其他甲状腺疾病有关［10］。因此，寻找与疾病相关的指标并对疾病进行早期预测有重要意义。近年来随着生物技术的进步，分子标记在甲状腺癌分化中的作用引起了临床的重视［11］。

miRNA 是一类短链非编码RNA，可参与调控甲状腺癌进展［12］。血清let-7e 是由22 个核苷酸组成的，参与胚胎发育、干细胞分化、肿瘤发生等多种病理过程，研究证实let-7e 被抑制能增加促炎细胞因子表达，加剧炎症反应［13］。本研究结果显示，甲状腺癌患者血清let-7e 较健康人更低，且随着疾病的加重而降低，不同组织学类型之间血清let-7e 表达水平无明显差异。周伟清［14］等研究也显示，let-7e 可抑制细胞增殖、侵袭、迁移和促进细胞凋亡，在甲状腺癌患者中血清let-7e 水平低于健康人，能促进癌细胞增殖、肿瘤生长，与甲状腺癌发生有关，但关于其是如何参与甲状腺癌发生的目前尚无定论。DKK-1 是一种抑制骨形成过程相关通路的关键性因子，含有1 个信号肽序列和2 段富含半胱氨酸的保守结构域，能通过提高炎症性因子增加心肌细胞线粒体损伤，对细胞的分化、增殖、凋亡和迁移有重要作用［15］。本研究结果与文献［16］报道血清DKK-1表达水平对胃癌的诊断效能结果接近。

TSGF 是一种肿瘤标记物，与恶性肿瘤有关，可促进肿瘤生长和周围血管增殖，其异常变化可以反映组织肿瘤的进展。本研究结果显示，甲状腺癌患者血清TSGF 高于健康人群，且Ⅰ+Ⅱ期＜Ⅲ期＜Ⅳ期，预后良好患者血清TSGF 显著低于预后不良。提示，TSGF 在甲状腺癌中表达异常升高，可作为恶性肿瘤诊断的指标。分析其原因可能是，甲状腺癌的生长和转移需要新生血管，而TSGF 可参与血管内皮细胞的信号通路，加速肿瘤组织增殖，促进血管网络的形成，在恶性肿瘤的发展中TSGF 随肿瘤细胞分化释放进入血液，从而导致其水平升高。王珊珊等［17］研究也显示，TSGF 在甲状腺癌中表达异常，可成为恶性肿瘤早期重要的诊断指标，与本研究结果相似。进一步相关性分析显示，血清let-7e 和病情程度之间呈负相关，血清DKK-1 及TSGF 和病情程度之间呈正相关。TSGF 与多种肿瘤的增殖、侵袭等有关，能促进血管网形成，加速淋巴管的生成，当发生甲状腺癌时其水平异常升高，同时随病情严重程度而升高。

综上所述，血清let-7e、DKK-1 及TSGF 在甲状腺癌患者表达异常，与疾病严重程度之间关系密切，对于病情控制具有重要临床意义。