AFP-L3、GP73、HBV-DNA水平于肝癌中的诊断价值分析

邓存文

酒泉市人民医院肝胆外科，甘肃酒泉 735099

肝癌是位列我国第三的恶性肿瘤，其患病率在世界范围内呈升高趋势，由一种或多种病因反复作用所致，恶性程度高，具有较高的病死率，危及患者的生命安全[1-2]。甲胎蛋白异质体（alpha fetoprotein heterogene-L3, AFP-L3）是常用的肝癌血清标志物，但研究表明，其敏感度较低，且在4/5的小肝癌患者中血清中未发现AFP-L3升高，且在30%的肝癌患者中AFP-L3检测结果显示为阴性，故探究一种高敏感性的血清标志物成为研究的重点课题[3-4]。高尔基体糖蛋白73（Golgi glycoprotein73, GP73）也被称为Ⅱ型高尔基体跨膜蛋白，作为一种新的肝癌肿瘤标志物逐渐运用于临床，最早于病毒感染的肝细胞之中发现，敏感性高[5]。多项肿瘤标志物的联合检测有望提高肝癌的诊断的敏感度、特异性，但目前关于乙型病毒性肝炎DNA（hepatitis B virus DNA,HBV-DNA）、GP73、AFP-L3等指标在肝癌的报道中较少见[6]。鉴于此，回顾性分析2018年1月—2020年11月期间酒泉市人民医院收治的41例肝癌患者与19例肝硬化患者的临床资料，旨在观察其血清HBV-DNA、GP73、AFP-L3的水平表达。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性选取本院收治的41例肝癌患者为肝癌组，19例肝硬化患者为肝硬化组，以及同期体检健康者60例为对照组。对照组中男35例，女25例；年龄30～65岁，平均（47.13±5.88）岁。肝癌组中男22例，女19例；年龄30～65岁，平均（48.10±5.98）岁；病程3～9年，平均（5.99±0.98）年。肝硬化组中男11例，女8例；年龄30～64岁，平均（48.10±5.72）岁；病程3～9年，平均（5.91±0.92）年。3组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：①经临床、病理学及实验室检查为肝癌[7]者；②所有受试者的临床资料完整，可随访者。

排除标准：①排除风湿免疫性疾病者；②合并其他心、肾疾病或其他恶性肿瘤疾病者；③合并血液系统疾病或精神疾病者；④合并脑血管疾病或肺结核疾病者。

1.3 方法

采集受试者空腹静脉血5 mL，低温保存30 min后以3 000 r/min的速度行离心处理10 min，离心半径为5 cm，分离血清并保存于-80℃冰箱中，等待进行集中检测。GP73、AFP-L3采用酶联免疫吸附法进行检测，操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。HBV-DNA的检测采用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）分析仪（型号：FQD-33A）进行检测，采用化学发光分析仪进行，所有步骤严格按照仪器说明书进行。灵敏度=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100%；特异度=真阴性例数/（假阳性例数+真阴性例数）×100%；准确度=（真阳性例数+真阴性例数）/总例数×100%。

1.4 观察指标

分别检测3组受试者的AFP-L3、GP73、HBVDNA含量。分析HBV-DNA、AFP-L3、GP73各项指标单独及联合检测肝癌的敏感度、特异度、准确度。

1.5 统计方法

采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析，计量资料符合正态分布，以（±s）表示，进行t检验；计数资料以例（n）和率表示，进行χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3组研究对象AFP-L3、GP73、HBV-DNA的表达情况比较

对照组AFP-L3、GP73、HBV-DNA指标水平均低于肝硬化组和肝癌组，肝硬化组各项指标水平低于肝癌组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 3组研究对象AFP-L3、GP73、HBV-DNA的表达情况比较(±s)

表1 3组研究对象AFP-L3、GP73、HBV-DNA的表达情况比较(±s)

注：与对照组比较，*P＜0.05；与肝硬化组比较，#P＜0.05。

组别对照组肝硬化组肝癌组F值P值例数60 19 41 AFP-L3（μg/L）2.56±0.58（4.21±0.73）*（5.62±1.01）*#192.153＜0.001 GP73（μg/L）47.13±8.14（178.39±21.36）*（251.79±38.79）*#855.401＜0.001 HBV-DNA（log copies/mL）76.78±12.13（93.11±10.58）*（124.78±18.49）*#135.083＜0.001

2.2 AFP-L3、GP73、HBV-DNA单一和联合诊断结果与诊断效能

AFP-L3、GP73、HBV-DNA联合诊断肝癌的敏感度、特异性、准确度高于HBV-DNA、ALP-L3及GP73单一诊断，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 AFP-L3、GP73、HBV-DNA单一和联合诊断结果与诊断效能

3 讨论

肝癌是由感染肝炎病毒引起肝硬化发展而来，由多种病因所致，是临床常见的恶性肿瘤疾病，侵袭性强、恶性程度高、致死率高[8]。因此尽早确诊并给予及时有效的治疗是临床关注的重点。

目前已有多项研究证实，可通过对患者的血清肿瘤标志物进行检测来评断疾病的病情严重程度[9]。现有报道中发现肝癌患者早期血清肿瘤标志物的敏感度低，多为无明显的临床症状，故早期诊断易漏诊、误诊，待症状明显再进行检测时多数患者已经处于中晚期，导致预后不理想，因此科研人员致力于发现敏感性、特异性较高的肝癌血清标志物[10]。AFP-L3是全球范围内公认的肝癌血清标志物，能够有效地判定肝脏疾病的良性、恶性病变，并且与肝癌的恶性程度密切相关，但其敏感性较低，仅在50%～65%，存在30%左右的假阴性问题[11]。随着研究的进展，新的肝癌标志物逐渐引起重视。GP73为高尔基体跨膜蛋白，主要在肝细胞中表达，若病情进展GP73会大量分泌，导致肝癌患者血清中GP73的含量异常升高[12]。Mak LY等[13]资料表明，GP73分子量73 kD，在正常患者肝脏的胆管壁上呈恒定表达状态，其表达水平随着病情的加重而升高，与肝癌的发生密切相关。近年来的国内临床实践中表明，GP73在肝癌患者中均呈高表达状态。本研究结果表明，肝癌组患者的血清AFP-L3、GP73、HBV-DNA表达水平显著高于肝硬化组和对照组（P＜0.05），可见，AFP-L3、GP73、HBV-DNA指标均在肝癌患者中呈高表达状态。这一结论说明HBV-DNA、GP73在肝癌患者中可能呈异常增高状态，对肝癌的诊断及鉴别有指导意义。

资料表明，HBV-DNA的增高多是因肝癌组织中HBV cccDNA过度分泌所致，由此认为AFP-L3在肝癌患者中具有一定的生物学行为，能够为病情向肝癌发展提供物质条件[14]。结果显示，AFP-L3、GP73、HBV-DNA联合诊断的敏感度92.68%、特异性89.47%、准确度91.67%，均高于各项指标单独检测（P＜0.05），与Sagnelli C等[15]研究中3项检测敏感度92.21%、89.34%、91.41%基本一致。可见3项指标联合检测的敏感度、特异度、准确度均较高，说明上述3项指标联合用于诊断肝癌准确性均较高，为临床早期诊断肝癌提供了参考依据。但本研究所纳入的样本含量较少，容易出现选择性偏倚，因此在今后的临床研究中，可扩大样本量进一步研究。

综上所述，AFP-L3、GP73、HBV-DNA联合检测可提高临床诊断肝癌的敏感度、特异性、准确度，对提高肝癌的检出及早期诊断具有重要意义，可在临床推广运用。